盐酸多奈哌齐口腔崩解片的生物等效性研究

盐酸多奈哌齐口腔崩解片的生物等效性研究

盐酸多吉是一种高选择性乙酰胆碱酯酶抑制剂。抑制乙酰胆碱酯酶对乙酰胆碱的分解，激活中间胆碱能系统，减少胆碱能传输损失引起的细胞退行性变，保护和改善与学习和记忆相关的神经系统功能。它用于改善阿尔茨海默病的大脑胆碱能神经系统功能，缓解症状，达到治疗的目的。1数据和方法1.17岁,体长为2632共纳入健康男性受试志愿者22例,年龄20~27岁,平均23.3岁;身高166~181cm,平均172.0cm;体质量指数19.0~24.0kg/m1.2试验组和样品采集采用2×2交叉设计,将受试志愿者随机分为两组,每组11例,分别交叉口服盐酸多奈哌齐试验制剂和参比制剂5mg,清洗期为21d。受试者于试验日前晚进食低脂清淡饮食并入住Ⅰ期临床试验病房,次日晨于一侧前臂静脉安置留置针,抽取空白血样3mL;受试者空腹用200mL温开水口服试验制剂或参比制剂,并于给药后20、40min,1、2、3、4、6、8、12、24、48、96、144、192、240、288h取静脉血3mL,置肝素抗凝试管,立即离心分离血浆,置-30℃冰箱储存待测。1.3盐酸多奈哌齐片试验制剂为盐酸多奈哌齐口腔崩解片,由四川升和制药有限公司提供,规格5mg/片,批号081101;参比制剂为盐酸多奈哌齐片(商品名:安理申),购自日本卫材公司,规格5mg/片,批号080315A。盐酸多奈哌齐对照品购自中国药品生物制品检定所,内标氢溴酸西酞普兰对照品购自成都市科伦药物研究所,纯度99.5%。甲醇、甲酸、二氯甲烷为色谱纯,购自美国TEDIA公司;醋酸铵和氢氧化钠为分析纯;去离子水由美国Millipore公司Rois1.4重四极杆串联质谱仪采用SIL-HTc型高效液相色谱仪(日本岛津公司),API3000三重四极杆串联质谱仪(美国AB公司)。色谱柱为ShisheidoC1.5低温离心+低温离心取受试者血浆0.5mL,加入0.05mL内标工作液(西酞普兰10ng/mL)及0.1mL2mol/L氢氧化钠溶液,混匀后,加入3.5mL二氯甲烷涡旋混合7min,再低温离心7min(离心半径18cm,转速3300r/min),抽取上层水层,转下层有机相于尖底管中,水浴45℃,空气流挥干,0.1mL流动相复溶,进样0.03mL。1.6评估指标1.6.1建立专属性的考察方案将多奈哌齐和内标对照品的混合溶液、经样品预处理后的空白血浆样品、经样品预处理后的空白血浆加多奈哌齐和内标对照品及经预处理后的受试者血浆样品按“1.5”项方法进样,考察所建立方法的专属性。1.6.2标准曲线回归法取空白血浆0.5mL,分别加入0.05mL各浓度多奈哌齐标准系列工作液,使其浓度分别为15、12、4、1、0.5、0.1和0.05ng/mL,按“1.5”项方法操作,记录多奈哌齐及内标峰面积,以其峰面积比值y对应其浓度x进行线性回归。1.6.3方法回收率和精密度配制含多奈哌齐0.1、1.0和12.0ng/mL浓度血浆样品各6份,于同日内测定,计算日内精密度和方法回收率;连续测定3d,计算日间精密度。精密度以变异系数(CV)表示,CV越小,精密度越高。1.6.4基质效应测定在经过预处理的空白血浆基质中加入0.1、1.0和12.0ng/mL浓度的多奈哌齐对照品溶液,记录进样得到的峰面积作为分子,以相应对照品溶液直接进样得到峰面积作为分母,二者相比得基质效应;配制上述3个浓度的血浆样品,经样品预处理后进样所得峰面积作为分子,以预处理后的空白血浆基质加入3个相应浓度对照品溶液进样所得峰面积作为分母,二者之比得萃取回收率。1.6.5血药浓度-时间曲线采用建立的HPLC-MS/MS法测定受试者口服试验制剂与参比制剂后的不同采血时间点血浆样品浓度,以时间为横坐标,浓度为纵坐标,绘制血药浓度-时间曲线。1.6.6血药浓度计算用中国药理学会编制的实用药代动力学计算程序DAS2.0拟合受试者单次口服盐酸多奈哌齐试验制剂与参比制剂的经时血药浓度数据,峰浓度(C2结果2.1测定产物的保留时间多奈哌齐和内标对照品、空白血浆、空白血浆加多奈哌齐、内标对照品及受试者血浆样品色谱图见图1。多奈哌齐保留时间为4.8min;内标(西酞普兰)的保留时间为5.0min。血浆杂质不干扰药物及内标色谱峰。2.2线性域多奈哌齐血浆标准曲线回归方程为y=0.0056x+0.5120(r=0.9972,权重为1/x2.3方法的精度和回收率3个浓度的日内和日间CV均<8%,方法回收率均>95%,结果良好,见表1。2.4回收率与基本效果之间的关系3个浓度的基质效应均>80%,萃取回收率>45%,结果良好,见表1。2.5血药浓度曲线22例受试者交叉口服盐酸多奈哌齐试验制剂和参比制剂各5mg后,均值血药浓度-时间曲线见图2。2.6药代动力学与生物等效的分析22例受试者交叉口服盐酸多奈哌齐试验制剂和参比制剂各5mg后,主要药动学参数见表2。试验制剂和参比制剂的AUC2.7肠道反应受试者单次口服盐酸多奈哌齐试验制剂后,3例(13.6%)出现轻度头晕头痛,4例(18.2%)出现胃肠道反应,1例(4.5%)出现手臂肌肉轻微跳动,10例(45.4%)出现窦性心动过缓;受试者单次口服盐酸多奈哌齐参比制剂后,1例(4.5%)出现双下肢皮肤瘙痒,8例(38.1%)出现窦性心动过缓。上述不良反应与实验室检查异常未处理均自行缓解,所有不良反应均在参比制剂说明书所述范围内,判断与药物可能有关。3不良反应的消除目前已报道的人血浆中多奈哌齐浓度的方法有高效液相色谱法目前罕见盐酸多奈哌齐口腔崩解片的药动学研究的相关报道。已有的报道盐酸多奈哌齐普