火炬树叶片丙酮浸提液对植物病原菌的抑制作用

火炬树叶片丙酮浸提液对植物病原菌的抑制作用

0火炬树叶片丙酮浸提液的动态特性作为一种绿化树种，火炬树具有许多良好的生物学特性，并具有许多入侵物种的特点。除关注其入侵特性外,近年来,国内研究人员对火炬树形态结构该文通过对火炬树叶片丙酮浸提液抑菌作用的研究,了解不同浓度的火炬树浸提液对不同受体植物病原菌菌丝生长的影响,为其在抑制植物病害等方面的利用提供依据。1材料和方法1.1病原菌的保鲜火炬树(Rhustyphina)叶片采集于河南科技学院校园,棉花枯萎病菌(Fusariumoxysporum),棉花红腐病菌(Fusariummoniliforme),葱黑斑病菌(Stemphyliumbortyosum)由河南科技学院院植物病理实验室保存。1.2测试方法1.2.1提取时间的确定火炬树叶采回后洗净、粉碎,取粉末50g,用丙酮于室温下提取3次,时间分别为72,48,24h。合并3次滤液在40℃以下用旋转蒸发器浓缩然后转入刻度试管,用丙酮定容为2g/mL,密封,保存于4℃的冰箱中备用。1.2.2琼脂糖添加量水1000mL,马铃薯200g,用水煮沸10~20min,然后用纱布过滤补水到1000mL,煮沸后加入蔗糖和琼脂各20g,pH自然。用移液管分别量取相应的浸提液于三角瓶中,配成浸提液含量分别为0.1、0.2、0.3g/mL的培养基。为检测丙酮对菌丝生长的影响,在另一组PDA培养基中加入丙酮,丙酮含量和含有相应浓度浸提液的培养基相同,另设PDA培养基作为对照。常规高压灭菌,在无菌条件下将三角瓶中的培养基分装在直径90cm的培养皿中,冷却凝固备用。每处理3次重复。1.2.3共感染1.2.4抑制率相对抑制率计算观察菌落的生长状况,并记录菌落的生长速度,每24h记录1次,用十字交叉法测量供试真菌菌落的生长直径(取3次重复的平均值),用下述公式计算抑制率相对抑制率=(对照菌落直径-处理菌落直径)/对照菌落直径×100%。菌落直径(cm)=测量菌落直径平均值-0.5(菌饼直径)。棉花枯萎病菌和葱黑斑病菌培养7天、棉花红腐病菌培养6天后结束培养,拍照记录菌丝生长情况、对相同时间内不同浓度的浸提液对菌丝生长的影响进行统计分析,同时观察比较相应浓度的丙酮对菌丝生长的影响。2结果与分析2.1火炬树浸提液对棉花枯病病原菌生长的影响火炬树叶片丙酮浸提液对棉花枯萎病菌菌丝生长的抑制作用见表1,培养7天后的菌丝生长情况见图1。从表1可以看出,和对照组(空白)相比,含量为0.1、0.2、0.3g/mL火炬树浸提液对棉花枯萎病菌菌丝生长均有显著的抑制作用,随浸提液浓度增加抑菌作用加强,随着菌丝生长时间的延长,抑制逐渐减弱。图1显示,和对照相比,不同处理对菌丝生长的影响除菌落直径大小有差异外,含量为0.2g/mL和0.3g/mL火炬树浸提液培养形成的棉花枯萎病菌菌落中菌丝较为稀疏。2.2火炬树叶片浸提液对棉花红腐病菌植物芽孢杆菌生长的影响火炬树叶片丙酮浸提液对棉花红腐病菌菌丝生长的抑制作用见表2和图2。从表2可以看出,和对照组(空白)相比,含量为0.1,0.2,0.3g/mL的火炬树叶片浸提液对棉花红腐病菌的菌丝生长有显著的抑制作用,随浸提液浓度升高,抑制作用加强;随着菌丝生长时间的延长,抑制作用逐渐减弱。培养6天时,火炬树浸提液对棉花红腐病菌菌丝的抑菌率最低仍达到60.37%,和对照组相比有显著的差异。图2显示,和不同含量火炬树浸提液处理相比,对照组菌丝生长旺盛,除菌落直径明显较大外,菌丝密度较大,出现自然扭结现象。2.3叶片浸提液对葱测定结果的影响火炬树叶片丙酮浸提液对葱黑斑病菌菌丝生长的影响见表3和图3。从表3可以看出,和对照组相比,在同一时间内含量为0.1,0.2,0.3g/mL的火炬树叶片浸提液对葱黑斑病菌菌丝生长有不同的抑制作用,但和前两种菌丝的生长情况相比,相对抑制率低,最高抑制率仅为52.7%。随着菌丝生长的时间延长,抑制作用逐渐减弱。图3显示,和不同含量的火炬树叶片浸提液处理相比,对照组菌丝除菌落直径较大外,菌丝颜色较深。综合表1~3,火炬树叶片丙酮浸提液对供试的3种植物病原菌菌丝生长均具有抑菌作用,但相同浓度的浸提液对不同病原菌的抑制作用不同,其中,对棉花红腐病菌菌丝的抑制作用最强,对葱黑斑病菌菌丝生长抑制作用最弱。2.4丙酮浸提液对火炬树植物病原菌病原菌生长的影响丙酮对3种菌丝生长的影响见图4-1、4-2、4-3。从图4-1、4-2、4-3可以看出,相应浓度的丙酮浸提液对3种菌丝生长的抑制作用小于相应浓度的浸提液,进一步说明火炬树叶片中含有菌丝生长的抑制物质。3丙酮浸提液抑菌效果丙酮是植物抑菌活性物质提取中较常使用的溶剂,在火炬树叶片抑菌物质提取中亦有效。火炬树丙酮浸提液经过高温灭菌过程仍具有抑菌活性,说明其抑菌物质具有热稳定性。郭义等火炬树叶片丙酮浸提液对菌丝生长的抑制作用显示其叶片内含有抑菌活性物质,但相同浓度下,浸提液对不同菌丝生长的抑制效果差异较大。试验中,棉花红腐病菌菌丝生长受火炬树浸提液的抑制作用最明显,棉花红腐病是影响棉花产量和质量的重要病害之一外来植