幽门螺杆菌检查方法课件

幽门螺杆菌检查方法金哲幽门螺杆菌检查方法金哲1分类临床诊断方法分类无创检查血清学方法、同位素标记尿素的呼气试验、胃液PCR创伤性检查形态学、微生物学、分子生物学技术原理微生物学方法、血清学方法、尿素酶依赖技术、形态学方法、基因诊断分类临床诊断方法分类2一、微生物学方法主要为细菌分离培养技术，诊断Hp感染的“金标准”获得抗原制备、药敏试验、分型和致病性研究等所需的细菌要求具有一定的厌氧培养条件和技术，作为常规诊断手段不易推广一、微生物学方法主要为细菌分离培养技术，诊断Hp感染的“金标3二、血清学方法1、ELISA检测：检测外周血中Hp全菌及其组分（细胞毒素的抗体），主要用于不同人群中Hp感染情况的流行病学调查和根除治疗后较长期（﹥3月）的复查一般不单独用作医院病人Hp感染和根除（治疗后一个月）的诊断依据操作复杂但方法日益标准化，商品化试剂大大简化了技术难度，但需昂贵的酶标仪二、血清学方法1、ELISA检测：检测外周血中Hp全菌及其组4二、血清学方法2、免疫酶试验用固定于玻片中的Hp菌，与病人血清中的Hp抗体结合，经酶标二抗显色镜检进行诊断操作简便，不需要特殊仪器，但准确性稍差，判断需要经验二、血清学方法2、免疫酶试验5二、血清学方法3、胶乳凝集试验用结合在胶乳颗粒上的Hp检测微量血中的抗体优点是不需仪器，血样需量少但结果需要经验且准确性不满意二、血清学方法3、胶乳凝集试验6二、血清学方法4、Western-blot主要用于分析感染者血中对Hp多种抗原组分的抗体产生情况可以控制抗原制备质量和分析与其他类似菌的交叉反应但操作复杂，技术难度大且不稳定，不作常规诊断方法二、血清学方法4、Western-blot7

由于Hp感染数周后血中才出现特异抗体，阴性者血中也可存在交叉反应抗体（如空场弯曲菌感染），且Hp根除后血中抗体可长时间（﹥6个月）维持在阳性水平，故血清学阳性不能完全肯定病人有活动性感染；阴性不能排除初期的感染。因此，血清学抗体的检测只能用于流行病学筛查，而不能用于临床诊断由于Hp感染数周后血中才出现特异抗体，阴性者血中也可存在交8三、尿素酶依赖技术1、呼气试验用13C或14C同位素标记尿素让病人口服后被Hp尿素酶分解，产生13CO214CO2，阳性者可在呼出气中检测出13C丰度和14C活性，从而确诊Hp感染13C试验:优点：准确，特异，快捷，无创伤，无放射性缺点：仪器价格昂贵三、尿素酶依赖技术1、呼气试验9三、尿素酶依赖技术2、15N-尿氨排出试验病人口服15N-尿素后，测定尿液中的15N丰度优点:非侵袭性，无放射性，有一定定量意义，敏感性与特异性极高，能克服胃活检标本局限性缺点：设备昂贵三、尿素酶依赖技术2、15N-尿氨排出试验10三、尿素酶依赖技术3、快速尿素酶试验原理:根据试剂pH值变化引起颜色变化来判断Hp感染状态操作简便易行标本中细菌数104以上时才能显示阳性，而标本的大小、反应时间、环境温度，观察者主观因素等均可影响结果三、尿素酶依赖技术3、快速尿素酶试验11四、形态学方法组织切片染色，组织学染色，免疫组化染色可在显微镜下直接观察细菌，可进行胃粘膜的病理学诊断需要胃镜检查和观察者经验四、形态学方法组织切片染色，组织学染色，免疫组化染色12五、基因诊断插胃管吸取胃液或胃镜下取胃液或活检组织，提取DNA做PCR扩增和探针杂交诊断Hp感染准确性好，检测灵敏度高操作复杂，易污染，费用高，不宜作为常规检查方法五、基因诊断插胃管吸取胃液或胃镜下取胃液或活检组织，提取DN13各种诊断方法优缺点方法侵袭性快速价廉技术难度备注组织学++++++++++同时可以观察病变分离培养+++++++++获得细菌和可做药敏血清学+++++++不能用于临床检诊细胞学+++++++++不能单独用于正规研究尿素酶+++++++++尤其适于治疗的复查13C-UBT+++++14C-UBT---++需要昂贵的质谱仪组织PCR+++++