2021高考山东卷生物试题(含官方答案和解析)

#25®.Sall②.EcoRI3.6④.F7与R扩增产物不含完整的启动子，荧光蛋白基因不表达⑤.引物F4与F5在调控序列上所对应序列之间的区段上⑥.根据有无荧光情况判断，F1〜F4与R扩增产物上均有结合位点，因此结合位点位于F4所对应调控序列的卞游（右侧）；F5〜F6与R扩増产物上均无结合位点，可知结合位点位于F5所对应调控序列的上游（左侧），所以结合位点位于引物F4与F5在调控序列上所对应序列之间的区段上【分析】1、据题意可知，科研人员扩增了丫基因上游不同长度的片段，据图中注释可知，F1〜F7以及R位置均为引物，故扩增的序列分别是引物F1和引物R之间的序列，引物F2和引物R之间的序列，引物F3和引物R之间的序列，引物F4和引物R之间的序列，引物F5和引物R之间的序列，引物F6和引物R之间的序列，引物F7和引物R之间的序列；2、据图中对限制酶的注释可知，限制MunI识别并切割后的黏性末端与限制晦EcoAI识别并切割后的黏性末端相同，限制^XhoI识别并切割后的黏性末端与限制晦SRI识别并切割后的黏性末端相同。【详解】（1）据提意可知，需妥将扩增后的产物定向插入并指导荧光蛋臼基因的表达，则含有启动子P的扩增后的产物读取方向与荧光蛋臼基因的读取方向一致，故扩增后的产物中的R端与荧光蛋臼基因中限制MunI识别序列端结合，才能保证扩增后的产物定向插入并指导荧光蛋臼基因的表达。要做到定向插入，需要引物末端两端添加限制酶的识别序列，且被限制酶识别并切割后，两端的黏性末端不能相同。而扩增后的产物中可能含有A/mI和XhoI的识别位点，故在引物末端添加限制晦的识别序列不能被限制酶MmI和XhoI所识别，故应该选用添加限制酶EcoAI和限制SalI识别序列，据图中对限制晦的注释可知，限制MunI识别并切割后的黏性末端与限制晦EcoAI识别并切割后的黏性末端相同，故R末端添加的序列所对应的限制酶是EsAI,在F1~F7末端添加的序列所对应的限制酶是曲I；荧光蛋臼基因中含有限制酶EcoRI的识别位点，故对载体使用限制MunI和XhoI切割。综上所述，对载体使用限制MunI和I切割，对扩增后的产物用限制酶EcoAI和限制欝S刃I识别序列，然后在DNA连接酶的催化作用下，连接形成重组载体；产物扩增中需妥使用T叫酶催化，合成更多的产物，故从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要6种酶，分别是兀g酶、限制EcoRI、限制晦曲I、限制晦、限制酶XhoI、DNA连接晦；（2）受体细胞中已经除去BCL11A基因，故扩增产物中的BCLUA蛋臼結合位点，不会抑制荧光蛋臼基因的表达；基因的表达需要RNA聚合酶与启动子结合，才能完成荧光蛋臼基因的转录过程；含F1〜F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋臼，受体细胞有荧光，含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光，则可能是F7与R扩增产物不含完整的启动子，荧光蛋臼基因不表达；（3）向培养液中添加适量的雌激素，此时重组载体上的BCL11A基因表达，产生BCL11A蛋臼，BCL11A蛋臼与BCL11A蛋臼结合位点结合后，导致荧光蛋臼基因被抑制；含F1~F4与R扩增产物的受体细胞不再有荧光，则说明BCL11A蛋臼结合位点結合后在引物F4与引物R之间的序列上；含F5〜F6与R扩增产物的受体细胞仍有荧光，则说明BC