蛋白质-氨基酸纸上层析（食品生物化学课件）_第1页
蛋白质-氨基酸纸上层析（食品生物化学课件）_第2页
蛋白质-氨基酸纸上层析（食品生物化学课件）_第3页
蛋白质-氨基酸纸上层析（食品生物化学课件）_第4页
蛋白质-氨基酸纸上层析（食品生物化学课件）_第5页
已阅读5页，还剩7页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

模块三蛋白质与食品加工任务一氨基酸纸上层析一、实验目的1.掌握纸上层析的一般原理和方法2.了解氨基酸的特征性颜色反应任务一氨基酸纸上层析二、实验原理纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，吸附一层水作为固定相，有机溶剂为流动相。当有机相流经固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示：在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。三、实验器材（1）层析缸（2）毛细管：5只/组。（3）培养皿：1只/组。（4）层析滤纸（长16cm、宽16cm的）：1张/组。（5）直尺、铅笔：自备。（6）电吹风：1只/组。（7）针、白线：1套/组。（8）小试管：4只/组四、实验试剂1.展层剂和平衡液正丁醇:冰醋酸:水=4:1:5，充分摇匀，用分液漏斗取上层液作展层剂；下层液作平衡液(弃去)。2.样品液取苯丙氨酸，赖氨酸，酪氨酸，脯氨酸，用0.01mol/L的盐酸溶液分别按1mg/mL的浓度配制。氨基酸混合液：以上各种氨基酸按0.5mg/mL的浓度配制成混合液。3.茚三酮按展层剂0.25%的比例将茚三酮加入展层剂中，使其溶解。五、实验操作检查层析缸是否干燥、洁净；若否，将其洗净并置于干燥箱内120℃烘干。（2）规划：取宽约16cm、高约16cm的层析滤纸一张。在纸的下端距边缘2cm处轻轻用铅笔划一条平行于底边的直线A，在直线上做4个记号，记号之间间隔2cm，这就是原点的位置。另在距左边缘1cm处画一条平行于左边缘的直线B，在B线上以A、B两线的交点为原点标明刻度（以厘米为单位），参见左图。

（3）点样：在每个圈下用铅笔记上每种氨基酸的代号(混合样可写M)，然后用毛细管吸取样品，轻轻地点到相应的氨基酸圈内，待晾干或用冷风吹干后再点第二次。前三种氨基酸各点3次，混合液点6次。将点过样的滤纸用针线卷成筒状（点样面向内），注意纸的两边不能接触，留一定缝隙。。（4）层析：将培养皿中放入2/3量的展层剂，迅速放置于层析缸中。把滤纸筒转移到此培养皿内，样品端向下垂直放置，切勿使展层剂浸到样品点。当溶剂前沿到达滤纸2/3处，取出滤纸，用铅笔描出溶剂前沿。（5）显色：热风吹干滤纸至显出氨基酸斑点，用铅笔描出轮廓。参见左图。（6）计算各种氨基酸的Rf值，并判断混合样品中都有哪些氨基酸，各人将自己的实验结果贴在实验报告上。（7）倒掉用过的展层液，将培养皿洗净，整理好桌面上的仪器和试剂，并注意清洁自己的操作台，请老师验收，实验报告当场交给老师。（8）计算

Rf＝X/Y纸层析结果AA种类测定结果苯丙氨酸赖氨酸酪氨酸脯氨酸待测氨基酸原点到层析斑点中心的距离原点到溶剂前沿的距离Rf判断待测氨基酸思考题1、氨基酸纸上层析用哪种物质作为显色剂

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论