《高三生物复习》二轮复习课件

选修1生物技术实践选修1生物技术实践1细菌培养基LB（Luria-Bertani)液体培养基酵母提取物0.25克蛋白胨0.5克氯化钠0.5克将上述物质溶解后，添加自来水，定溶至50mL。一、

培养基LB固体培养基需加琼脂 1克细菌培养基酵母提取物0.25克蛋白胨0.5克氯化钠0.5克21、培养基的配制原则(1)目的要明确根据种类、目的配制(2)营养要协调(3)pH要适宜如细菌：pH6.5~7.5真菌(如霉菌)：pH5.0~6.01、培养基的配制原则(1)目的要明确32、细菌培养基的制备：培养基的配制灭菌搁置斜面称量溶化调pH分装加棉塞包扎2、细菌培养基的制备：培养基的配制灭菌搁置斜面称量溶化调pH4什么叫灭菌？什么叫消毒？为什么要灭菌？若混有杂菌，将与菌种形成竞争关系，影响菌种的生长或不能分离到所需的微生物。灭菌是指用物理或化学方法，杀死一定环境中所有微生物的细胞、芽孢和孢子的方法。二、

灭菌操作消毒是指用物理或化学方法，杀死病原菌的方法。在培养微生物时必须进行无菌操作什么叫灭菌？什么叫消毒？为什么要灭菌？若混有杂菌，将与菌种形5无菌操作的要求:

(1)各种器皿必须是无菌的(2)各种培养基必须是无菌(3)转移操作及其它环境也应是无菌的无菌操作的要求:6灭菌的方法(1)干热灭菌(火焰灼烧)(2)高压蒸汽灭菌(在1kg/cm2压力的高压蒸气锅中(121℃)灭菌15min。)(3)过滤灭菌法（G6玻璃砂漏斗）(4)紫外光灭菌法(5)化学药剂灭菌法（如70%~75%酒精等）灭菌的方法(1)干热灭菌(火焰灼烧)7实验操作前，实验用具放在超净台上，以紫外灯和过滤风灭菌30min。如果培养基中有葡萄糖，为防止葡萄糖分解碳化，可在90℃以上(500g/cm2压力)的高压蒸气锅中灭菌30min。有些不能加热灭菌的化合物，如尿素，可用G6玻璃砂漏斗过滤灭菌。灭菌或消毒对象接种环等金属或某些玻璃用具手培养基试管、培养皿、三角瓶等超净台灭菌或消毒方法火焰灼烧70%~75%酒精高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌紫外光和过滤风实验操作前，实验用具放在超净台上，以紫外灯和过滤风灭8三、

细菌的分离1、划线分离法方法：用烧红后冷却的接种环蘸取带菌的培养物，在固体培养基的平板上划线。分离划线法连续划线法三、细菌的分离1、划线分离法方法：用烧红后冷却的接种环蘸92、涂布分离法方法：将培养的菌液稀释，通常稀释10-5~10-7倍。取0.1mL稀释度不同的菌液，加在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基的平面上，然后进行培养。在某个稀释度下，可培养得到相互分开的菌落，通常以每个培养皿中有20个以内的单菌落最为合适。划线分离法：方法简单。涂布分离法：单菌落更易分开，但操作复杂些。单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。2、涂布分离法方法：将培养的菌液稀释，通常划线分离法：方法简10实验1大肠杆菌的培养和分离一、实验内容

1、用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌。2、在固体平面培养基上划线进行分离。实验1大肠杆菌的培养和分离一、实验内容11大肠杆菌和革兰氏染色大肠杆菌：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。大肠杆菌和革兰氏染色大肠杆菌：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌12二、设备及用品灭菌锅、三角瓶、封口膜和橡皮圈（或棉塞）、培养皿、接种环和玻璃三角刮刀、恒温培养箱、摇床、酒精灯和超净台、一次性手套、酒精棉球、镊子、有棉塞的试管等。二、设备及用品13三、实验材料

1、LB培养基（液体和固体）2、大肠杆菌菌种斜面3、空白斜面三、实验材料14将装有LB液体和固体培养基的三角瓶，加上封口膜（或棉塞）。将培养皿用牛皮纸包好，一起放入高压灭菌锅内，1kg/cm2压力（121℃），灭菌15min四、实验步骤灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上1、为什么用棉塞而不用橡皮塞？棉塞（封口膜）能防止杂菌污染，又保证通气良好。将装有LB液体和固体培养基的三角瓶，加上封口膜152、高压蒸汽灭菌以前，为什么要将灭菌锅内的冷空气排尽？3、灭菌完毕后，如果压力未降至零，就打开气阀，会出现什么现象？为什么？如果灭菌锅内的冷空气没有排尽，当压力上升至98kPa（1kg/cm2压力）时，锅内的温度就不会上升到应有的高度（121℃），导致灭菌不彻底。如果压力未降到零就打开气阀，试管内的培养基就会冲出管口。这是因为高压蒸气灭菌锅内外压力不平衡的缘故。灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上2、高压蒸汽灭菌以前，为什么要将灭菌锅内的冷空气排尽？3、灭164、固体培养基冷却至60℃左右才能用来倒平板。用什么方法来估计培养基的温度？用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉有些热又不烫手时。5、为什么需使锥形瓶瓶口通过火焰？通过烧灼灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上将三角瓶内的固体培养基倒入培养皿中，使之置于水平位置，并轻轻晃动，使培养基铺满底部，凝固后即可形成平面。4、固体培养基冷却至60℃左右才能用来倒平板。用什么方法来估176、接种操作为什么要在火焰旁进行？空气中存在有大量的微生物，而接种灯的火焰旁能形成一个无菌的区域，在这里操作，可以避免杂菌的污染。灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上在酒精灯火焰旁，用灭菌的接种环将菌种接种到三角瓶内的液体培养基中，37℃摇床振荡培养12h。7、如何使接种环冷却后再挑取菌体？为什么要冷却？让环先接触培养基上未长菌的部位，使环冷却。以免接种环温度太高,杀死菌种。6、接种操作为什么要在火焰旁进行？空气中存在有大量的微生物，18灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上在酒精灯火焰旁，用灭菌的接种环蘸菌液一次，在固体培养基的平板上连续划线，将培养皿倒置，37℃恒温培养箱中培养24h。8、为什么在操作的第一步要灼烧接种环？为了避免接种环上可能存在的微生物造成污染。灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上在酒精199、若用分离划线的方法，为什么每次划线前都要灼烧接种环？及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上10、为什么在划线操作结束时仍需灼烧接种环？为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使一次划线时，接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目减少，以便得到单菌落。9、若用分离划线的方法，为什么每次划线前都要灼烧接种环？及时2011、进行恒温培养时为什么要将培养皿倒置?恒温培养时，培养基中的水分会以水蒸汽的形式蒸发，倒放培养皿则会使水蒸汽所凝结的水滴留在盖上；如果正放培养皿，则水分形成的水滴会落入培养基表面并且扩散开。则菌落中的菌会随水扩散，菌落间相互影响，很难再分成单菌落，达不到分离的目的。灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上11、进行恒温培养时为什么要将培养皿倒置?恒温培养2112、接种斜面画线时要注意什么？(1)由里向外画，(2)线条要细且密；(3)不要重复划线，(4)不要画破培养基，不要接触到管壁或管口。13、在什么条件下培养细菌？恒温箱中，在37℃下培养24小时。灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上在酒精灯火焰旁，将单菌落用灭菌的接种环取出，用划线法接种在斜面上，37℃恒温培养箱中培养24h后,置于4℃冰箱中保存。12、接种斜面画线时要注意什么？(1)由里向外画，(2)线条2214、如何操作才可以尽量避免被杂菌污染?(1)胆大心细，操作快捷。(2)注意灭菌原则，灭菌彻底，降低环境污染几率，手和实验服要清洁，减少操作时间。(3)注意微生物生长条件，如pH、渗透压、温度等。灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上14、如何操作才可以尽量避免被杂菌污染?(1)胆大心细，操作2315、培养后如何判断是否有杂菌污染?(1)从菌落形态看：细菌菌落：表面一般光滑而湿润，有黏稠性，多数透明或半透明。放线菌菌落：表面是紧密的绒状、坚实多皱，长孢子后就成粉末状，常有不同颜色，菌丝可深入到培养基内。霉菌菌落：为绒毛状，孢子有各种颜色。(2)用显微镜镜检，观察其形态、大小，看是否有菌丝、孢子等。灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上15、培养后如何判断是否有杂菌污染?(1)从菌落形态看：灭菌2416、实验完成后，接触过细菌的器皿应如何处理?所有接触过细菌的器皿都必须先高压灭菌后再洗涤，特别是培养基。使用后的废弃物也要高压灭菌后再抛弃。17、如果分离的是转基因工程的工程菌，如何保证没有被普通的大肠杆菌污染?因转基因用的质粒通常是经过改造的质粒，具有某种抗性基因。可用含某种相应抗生素的培养基培养。灭菌倒平板接种至液体培养基中划线分离接种至斜面上16、实验完成后，接触过细菌的器皿应如何处理?25实验4果汁中的果胶和果胶酶实验4果汁中的果胶和果胶酶261、果胶一、果胶和果胶酶的基础知识果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，起着将植物细胞粘合在一起的作用。它是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物(含半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯)，不溶于乙醇。会减少水果组织的分散性，故在果汁加工中，果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊。1、果胶一、果胶和果胶酶的基础知识果胶是植物细胞壁以27

果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，通常包括果胶酸酶（多聚半乳糖醛酸酶）、原果胶酶和果胶甲酯水解酶等。2、果胶酶去掉果胶，植物组织变得松散，利于榨取果汁。作用：果胶酶分解果胶，瓦解细胞壁和胞间层，使榨取果汁变得更容易，提高水果的出汁率。果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使浑浊的果汁变得澄清。来源：有些微生物如黑曲霉、苹果青霉等都可用于生产果胶酶。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总28二、实验内容

1、探究利用苹果匀浆制作果汁的最佳条件。

2、检测果胶酶的活性。

3、了解果胶酶对果汁形成的作用和收集果胶酶的应用材料。二、实验内容29三、设备及用品匀浆机、小刀、烧杯、水浴锅或酒精灯、试管、移液管、量筒等。四、实验材料

1、山楂或苹果

2、黑曲霉提取液或2%果胶酶溶液

3、95%的乙醇三、设备及用品四、实验材料30五、实验步骤1、将苹果洗净、切开，去皮、籽、柄，切成小块，将切成小块的苹果放入匀浆机中，榨取苹果汁2、将榨取的苹果汁倒出，用双层纱布过滤后装入烧杯中备用。五、实验步骤1、将苹果洗净、切开，去皮、籽、柄，切成小块，将31+4ml苹果汁+45℃保温15分钟121ml果胶酶++34+沸水浴4ml苹果汁+45℃保温15分钟1ml果胶酶4ml苹果汁+45℃保温15分钟1ml蒸馏水沸水浴4ml苹果汁+45℃保温15分钟1ml蒸馏水1234+4ml+45℃121ml++34+沸水浴4ml+45℃32+2ml乙醇+静置10分钟121ml1号管上清液++34+12342ml乙醇+静置10分钟1ml2号管上清液2ml乙醇+静置10分钟1ml3号管上清液2ml乙醇+静置10分钟1ml4号管上清液1234+2ml+静置121ml++34+12333烧杯号试管号处理加酒精前现象加酒精后现象A(加酶)1加热2不加热B(加水)3加热4不加热分层十分明显，沉淀浓缩成一小团，果汁澄清度(++++)分层十分明显，不如1号试管澄清度(+++)液体浑浊，比4号稍澄清度(+

+)。液体浑浊，澄清度(+)果汁被稀释沉淀物(+)果汁被稀释沉淀物(++)产生絮状沉淀沉淀物(+++)产生大量絮状沉淀沉淀物(++++)12341234六、实验结果另取试管做烧杯号试管号处理加酒精前现象加酒精后现象A1加热2不加热B334七、实验原理1、果胶酶能使果胶完全水解成半乳糖醛酸，增加固形物的分散度，降低水果匀浆的黏度，使果汁澄清。2、果胶不溶于乙醇，加乙醇能使果胶析出。七、实验原理1、果胶酶能使果胶完全水解成半乳糖醛酸，增加固形351.影响果胶酶降解果胶的因素①温度②pH值③酶作用时间④酶的用量⑤酶抑制剂等等八、问题讨论1.影响果胶酶降解果胶的因素①温度②pH值③酶作用时间④酶362.设计实验，探究果汁制作中果胶酶催化的最适温度。3.设计实验，探究果汁制作中果胶酶催化的最适pH。用滤出的苹果汁的体积大小或果汁的澄清度来判断果胶酶活性的高低。自变量、因变量、无关变量分别是什么？如何控制自变量和无关变量？观察指标是什么？混合苹果泥和果胶酶之前，要将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理。2.设计实验，探究果汁制作中果胶酶催化的最适温度。3.设计实374.设计实验，探究果汁制作中果胶酶的最佳用量。自变量、因变量、无关变量分别是什么？如何控制自变量和无关变量？观察指标是什么？4.设计实验，探究果汁制作中果胶酶的最佳用量。自变量、因变量385.果胶酶还可能有什么作用？果胶酶除用于制备果汁外，还用于果酒澄清，还可作为洗衣粉的添加剂（除去衣服上的果汁、果酱等）。6.果胶酶水解果胶的最终产物是什么？要使果汁澄清，应该使用果胶酶和果胶甲酯酶中的哪一种？还是同时使用？为什么？这样才能使果胶完全水解成半乳糖醛酸，增加固形物的分散度，降低水果匀浆的黏度，有利于过滤掉不溶物，使果汁澄清。应同时使用。果胶酶水解果胶的最终产物是半乳糖醛酸。5.果胶酶还可能有什么作用？果胶酶除用于制备果汁外，还用39实验5

加酶洗衣粉的使用条件和效果实验540

表面活性剂有离子型和非离子型两种类型。离子型又可分为阳离子型和阴离子型。一、基础知识一般的家用洗衣粉和其他各种家用洗涤剂的成分基本相同，主要含有表面活性剂、水软化剂、碱剂、漂白剂和香精等成分。洗衣粉中主要含阴离子表面活性剂如十二烷基硫酸钠，有的也加入非离子型表面活性剂如脂肪醇聚氧乙烯醚。表面活性剂种类表面活性剂有离子型和非离子型两种类型。离子型又可分为阳41表面活性剂能优先吸附在各种界面上,起到降低表面张力、改变体系界面状态的作用。表面活性剂中含有疏水基团和亲水基团，在洗涤过程中有乳化作用和通透作用，使衣服中的脂肪类物质进入水中。表面活性剂作用表面活性剂能优先吸附在各种界面上,起到降低表面张力、42加酶洗衣粉就是在普通洗衣粉中，加入0.2％～0.5％的酶制剂制成的。在洗衣粉中添加的酶的种类很多，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶等。其中蛋白酶多用枯草杆菌碱性蛋白酶。加酶洗衣粉添加的酶加酶洗衣粉就是在普通洗衣粉中，加入0.2％～0.43二、实验内容1、探究加酶洗衣粉与普通洗衣粉洗涤效果的区别。2、用加酶洗衣粉洗涤沾有鸡血的棉织品，观察不同温度下的洗涤效果。三、设备及用品三角瓶、镊子、水浴锅、沾有鸡血的棉布等。四、实验材料加酶洗衣粉和不加酶洗衣粉二、实验内容三、设备及用品四、实验材料44+100ml水+40℃水浴保温120.5g加酶洗衣粉3摇匀沾有鸡血的棉布搅拌或摇动+观察洗涤效果+100ml水+100ml水+40℃水浴保温摇匀沾有鸡血的棉布搅拌或摇动++40℃水浴保温摇匀沾有鸡血的棉布搅拌或摇动+0.5g普通洗衣粉不加洗衣粉五、实验步骤比较污物的残留状况，如：已消失、颜色变浅、面积缩小等。判断洗涤效果好与差的指标是什么？+100ml+40℃水浴保温120.5g加酶洗衣粉3摇匀沾45六、实验原理衣服上的污渍，一般有血、汗、油、色素和食物的汁液等，它们无非是淀粉、蛋白质、脂质等物质。这些物质可用淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶水解成为水溶性小分子物质。因此，加酶洗衣粉除了具有表面活性剂的作用外，还有各种水解作用，更有利于去除污渍。六、实验原理衣服上的污渍，一般有血、汗、油、色素461.设计实验，探究加酶洗衣粉在什么温度下洗涤效果最好？自变量、因变量、无关变量分别是什么？如何控制自变量和无关变量？观察指标是什么？2.设计实验，探究不同种类的加酶洗衣粉洗涤效果的差别？七、问题讨论1.设计实验，探究加酶洗衣粉在什么温度下洗涤效果最好？自变量47+100ml水+40℃水浴保温120.5g加酶洗衣粉3摇匀沾有鸡血的棉布搅拌或摇动+观察洗涤效果+100ml水+100ml水+40℃水浴保温摇匀沾有鸡血的棉布搅拌或摇动++40℃水浴保温摇匀沾有鸡血的棉布搅拌或摇动+0.5g普通洗衣粉不加洗衣粉+100ml+40℃水浴保温120.5g加酶洗衣粉3摇匀沾483.丝绸和毛织品能否用加酶洗衣粉洗涤？为什么？加酶洗衣粉中，多数都加了蛋白酶，丝绸和毛织品都是由蛋白质纤维组成的织物，酶能切断纤维蛋白。因此，不能使用。4.脂肪酶对沾有矿物油的棉布是否起作用？脂肪酶水解的是酯键，只有对羟基和羧基形成的酯键起作用。但矿物油多为饱和链烃，没有酯键，不能将其水解。因此，不起作用。3.丝绸和毛织品能否用加酶洗衣粉洗涤？为什么？加酶洗49实验6α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测实验6α-淀粉酶的固定化50一、基础知识固定化酶：是将酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。优点：固定化酶固定在一定的空间范围内，可以重复使用，且能及时与产物分离。一、基础知识固定化酶：是将酶用物理或化学的方法固定在某种介质51酶固定化的常用方法1.吸附法

(1)物理吸附法

(2)离子交换法4.包埋法将酶蛋白包埋在凝胶交联后的“格子”中。3.交联法

酶蛋白的氨基以戊二醛与载体相连。酶固定化的常用方法1.吸附法4.包埋法3.交联法521.吸附法

(1)物理吸附法：将酶蛋白分子吸附在惰性载体上。惰性载体指对蛋白质有高度吸附能力的活性炭、石英砂等。

(2)离子交换法：酶蛋白带有电荷的基团与离子交换剂形成离子键。2.共价偶联法酶蛋白的一些基团与载体共价结合。1.吸附法2.共价偶联法53二、实验内容

1、用吸附法将α-淀粉酶固定在石英砂上。

三、设备及用品塑料注射器、烧杯、滴管、自行车用气门心和夹子、注射器架、试管或微量离心管等。四、实验材料

1、α-淀粉酶，石英砂，

2、可溶性淀粉溶液

3、5mmol/LKI-I2溶液二、实验内容三、设备及用品四、实验材料54五、实验原理一定浓度的淀粉溶液经过固定酶柱后，可使淀粉水解成糊精。用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色，表明水解产物糊精生成。淀粉糊精麦芽糖葡萄糖遇碘显蓝色遇碘显红色遇碘不显色α-淀粉酶β-淀粉酶糖化淀粉酶五、实验原理一定浓度的淀粉溶液经过固定酶柱后，可55六、实验步骤5mgα-淀粉酶+4mL蒸馏水+5g石英砂（搅拌30min）装入下端接有气门心并用夹子封住的注射器中10倍体积蒸馏水洗涤注射器以除去未吸附的淀粉酶，流速1mL/min用滴管滴加淀粉溶液，以0.3mL/min流速过柱流出5mL溶液后接收0.5mL流出液，加1~2滴KI-I2溶液，观察颜色10倍体积蒸馏水洗涤注射器4℃保存为什么要控制流速？六、实验步骤5mgα-淀粉酶+4mL蒸馏水+5g石英砂（搅56吸附有α-淀粉酶的石英砂淀粉溶液淀粉溶液吸附有α-淀粉酶的石英砂

12341、2mL水+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉液+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉滤液+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉滤液+1~2滴KI-I2溶液+稀释1倍七、实验结果吸附有α-淀粉酶的石英砂淀粉溶液淀粉溶液吸附有α-淀粉酶的石571.冰箱保存后的固定化酶柱，重复实验，是否有相同结果？2.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶？八、问题讨论1.冰箱保存后的固定化酶柱，重复实验，是否有相同结果？2.如58实验8果酒及果醋的制作实验8果酒及果醋的制作59一、酵母菌的基础知识形态结构单细胞真菌，属真核生物，呈圆形、椭圆形等。繁殖方式酵母菌的繁殖方式有出芽生殖、分裂生殖和孢子生殖，常进行出芽生殖。分布自然界中，酵母菌分布广泛，多分布在含糖较高的偏酸环境中，如水果、花、树皮等。一年四季，土壤始终是酵母菌的大本营。

第一节、果酒的制作一、酵母菌的基础知识形态结构第一节、果酒的制作60①需氧呼吸的反应式：②厌氧呼吸的反应式：C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量酶当乙醇浓度超过16％时，酵母菌死亡。代谢类型异养，兼性厌氧

繁殖的最适温度：20℃；酒精发酵的温度范围：18~25℃。影响酒精发酵的主要环境条件

酶温度、氧气和pH

①需氧呼吸的反应式：C6H12O6+6O2+6H2O→661三、设备及用品

5~10L的大瓶、适合于瓶口的软木塞或橡胶塞或压紧的一大团棉花、有弯曲的安全玻璃管、过滤器、纱布、多功能榨汁机或研钵及杵、若干带瓶盖的小口瓶等四、实验材料(葡萄酒的制作）

1、紫葡萄

2、新鲜酵母或干酵母

三、设备及用品四、实验材料(葡萄酒的制作）62四、实验步骤清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存1、高锰酸钾溶液中浸泡5min

的作用？应该先冲洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。葡萄洗净→高锰酸钾溶液中浸泡5min→冲洗后榨成浆状2、你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？四、实验步骤清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存1、高63清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存适量干酵母(每2.5kg葡萄约1g干酵母)加少量温水(小于40℃)在烧杯内调成糊状。为使其迅速发生作用，可加极少量蔗糖，混匀，放置片刻，出现气泡即可。清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存适量干酵母(每2.64清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存葡萄浆放入发酵瓶中，装量不超过2/3，然后加入酵母悬液，搅拌均匀。加上一个软木塞，塞内插入弯曲玻璃管。3.为什么发酵瓶中的液体不能装满?发酵过程中有气体产生，留有空间可暂时储气，起缓冲作用；否则液体装满后气体会使液体外溢，损失发酵液，且瓶口等处由于有发酵液易引起杂菌污染。4.装水的弯曲玻璃管起什么作用?既可防止氧气进入，又可排出二氧化碳，同时还能防止杂菌污染。清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存葡萄浆放入发酵瓶中65清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存5.发酵完毕的标志是什么?6.适宜温度是多少？高于30℃，为什么需要降温？发酵瓶放在25~30℃条件下2~3天，当停止出现气泡，表示发酵完毕。若温度偏低，则时间相对延长。若温度高于30℃，需要降温，否则酒的风味不佳。清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存5.发酵完毕的标志66清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存用两层纱布滤去葡萄皮和籽，将获得的滤液分装到1~2L的细口瓶中，加盖密封，静置。待沉淀后，上清夜即为葡萄酒。（可保存1~2年）在发酵的过程中，随着酒精度的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液，使葡萄酒呈红色7、葡萄酒呈红色的原因？清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存用两层纱布滤去葡萄67七、实验原理C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量酶酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵，将葡萄糖氧化成酒精七、实验原理C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能68八、问题讨论1.葡萄或其他果实上常有天然的野生酵母存在,为什么上述实验还要接种酵母?为了加速反应，使观察更直观，需要较多数量的酵母菌；同时，加酵母后使酵母的酒精发酵占有优势，避免许多霉菌生长，出现异味。2.制酒时必须保证所有用具都是清洁的，为什么?各种水果对微生物来说都是良好的培养基，特别是霉菌。如果用具不洁净，就可能有许多杂菌进入果汁，那制作的就不是果酒，而是杂菌培养液。八、问题讨论1.葡萄或其他果实上常有天然的野生酵母存在,为什693、你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？对发酵瓶、纱布、榨汁机、盛葡萄汁的器皿等实验用具进行清洗并消毒。先用温水反复冲洗几次,再用浓度为75%的酒精擦拭消毒，晾干待用。如果要快速可以使用吹风机吹干。3、你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？对发酵瓶70用果汁制作果酒用葡萄制作的葡萄酒含糖较低，酒精含量也低（平均体积分数为8%）。用果汁制作的果酒含糖量高，酒精含量也较高（可达）15%。设备及用品同“用葡萄制作葡萄酒”材料1.苹果（最好）、梨、柑橘或其他水果2.新鲜酵母或干酵母用果汁制作果酒用葡萄制作的葡萄酒含糖较低，酒精含量也71实验步骤清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存1.为什么要加蔗糖?向发酵瓶中先加一定量蔗糖，再倒入果汁，最后倒入酵母悬液，混匀，加盖。2、发酵开始时，酵母菌的需氧呼吸会使发酵瓶内出现负压，为什么?为了加速反应，使观察更直观，需要更多的底物参加反应。实验步骤清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存1.为什么72清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存3天后气泡冒出，10天后剧烈的发酵停止，取出过滤分装。若3天后还没有气泡冒出，必须加入更多酵母，使发酵尽快发生。静置5~6个月，酵母下沉，上清液即为果酒。可用虹吸法取出。清洗榨汁制备酵母悬液原料装瓶发酵过滤、保存3天后气泡冒出，173一、醋化醋杆菌的基础知识形态结构单细胞原核生物，椭圆、杆状等。繁殖方式分裂生殖第二节、果醋的制作代谢类型异养需氧型

C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O最适生长温度：30℃~35℃。最适pH值为3.5~6.5。在有氧条件下，能将乙醇氧化成醋酸

醋杆菌醋酸含量可高达13％。一、醋化醋杆菌的基础知识形态结构第二节、果醋的制作代谢类型C74二、设备及用品5L的下口瓶2个、500L锥形瓶1个、直角玻璃管(长短不同)3根、直玻璃管4根、单孔橡胶塞2个、双孔橡胶塞1个、胶管约1m、锯末适量(足以装满1.5L的下口瓶、脱脂棉少量、铝箔少量、水族箱通气泵1、铁架及铁夹几副三、材料1.果酒2.醋酸杆菌二、设备及用品5L的下口瓶2个、500L锥形瓶1个、三、材75四、步骤1.装置连接如图，甲内装入800mL酒-水混合物，铝箔盖住上口。乙瓶为发酵瓶，内填锯末至八分满；下口各插入一直角玻璃管(发酵液出口)和另一直角玻璃管(内塞脱脂棉,用以过滤空气,另一端升至锯末之上)通入空气四、步骤1.装置连接如图，甲内装入800mL酒-水混合物，铝76(2)将水族箱通气泵的出气管与乙瓶上塞棉花的玻璃管相连，通气。2.醋酸发酵(1)适量醋化醋杆菌的培养物或醋曲悬液加入200mL酒-水混合物中混匀，pH调至7.0后倒入乙瓶，使锯末均匀湿透。通入空气2.为什么要向发酵瓶中通入空气?3.为什么空气要用棉花过滤?醋酸发酵为需氧发酵可防止微生物进入1.锯末的作用是什么?使醋化醋杆菌附着在锯末上(2)将水族箱通气泵的出气管与乙瓶上塞棉花的玻璃管相连，通气77(3)发酵48h，检测pH，若明显酸性，则进入下一步。(4)调节甲到乙的流量为每5分钟1滴。乙到丙也同样速度。2.醋酸发酵通入空气(5)每天检测pH，等到流出液pH不再减少，或甲瓶液体全部流入乙瓶时，停止实验。(3)发酵48h，检测pH，若明显酸性，则进入下一步。(4)782.醋瓶子、未喝干的啤酒瓶子放置久了，在醋和啤酒表面形成一层“白膜”。它是怎样形成的？

醋酸菌大量繁殖形成的。1.影响醋酸发酵的环境因素有哪些？3.你所得到的丙瓶中的液体是否就是市售的白醋,为什么?不是，市售白醋除含有醋酸外还有丰富的不挥发性酸、糖、酯、醇等物质，这些多为酵母所产生。温度、氧气和pH等八、问题讨论2.醋瓶子、未喝干的啤酒瓶子放置久了，在醋和啤酒表面形成一层79实验现象发酵酒精发酵醋酸发酵气味和味道酒味酸味气泡和泡沫有气泡和泡沫无气泡和泡沫发酵液颜色混浊混浊，液面形成白色菌膜酒精发酵和醋酸发酵的比较

醋酸发酵酒精发酵为醋酸发酵提供

。

酒精发酵联系氧气微生物区别酵母菌醋化醋杆菌无氧有氧酒精实验现象发酵酒精发酵醋酸发酵气味和味道酒味酸味气泡和泡沫有气80实验10

泡菜的腌制和亚硝酸测定实验1081第一节泡菜的制作泡菜腌制过程中起作用的主要是假丝酵母和乳酸菌。无氧条件下，微生物利用菜中的糖和其它营养物进行发酵，发酵产物有有机酸和醇类物质等，其中也有亚硝酸盐。泡菜是一种以湿态发酵方式加工制成的浸制品，是一种发酵食品。泡菜制作容易，成本低廉，风味可口，利于贮存。一、基础知识（泡菜的制作）第一节泡菜的制作泡菜腌制过程中起作用的主82

三、设备及用品泡菜坛、菜刀、菜板；

四、实验材料各种蔬菜均可，一般用白菜、洋白菜、黄瓜、柿子椒、胡萝卜、白萝卜等；添加的调味品，如花椒、大蒜、辣椒等；白酒；食糖和盐。二、实验内容

制作泡菜并对亚硝酸盐进行测定三、设备及用品四、实验材料二、实验内容制作泡菜83

五、实验步骤

原料清洗、切块、晾干清洗泡菜坛原料装瓶、加入调味品，再加一些白酒加盖、密封发酵1.起发酵作用的主要菌种是什么？来自哪里？假丝酵母和乳酸菌，主要来自蔬菜等自然环境。2.加入白酒起什么作用？可抑制泡菜表面杂菌的生长，它也是一种调味剂，可增加醇香感。五、实验步骤原料清洗、切块、晾干清洗泡菜坛原料装瓶、加84原料清洗、切块、晾干清洗泡菜坛原料装瓶、加入调味品，并加一些白酒加盖、密封发酵创造无氧环境，使乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭，则会有许多需氧细菌生长，蔬菜会腐烂。3.用水封闭坛口起什么作用？不封闭有什么结果？原料清洗、切块、晾干清洗泡菜坛原料装瓶、加入调味品，并加一些85原料清洗、切块、晾干清洗泡菜坛原料装瓶、加入调味品，并加一些白酒加盖、密封发酵无氧环境，使许多需氧菌不能生存。乳酸菌产生的乳酸及某些代谢产物能抑制细菌的生长。4.为什么泡菜较耐贮存？5.有时要加一些“腌制过的泡菜汁”，有什么作用?腌制过的泡菜汁中有较多假丝酵母和乳酸菌等菌种，可减少腌制时间。原料清洗、切块、晾干清洗泡菜坛原料装瓶、加入调味品，并加一些86第二节亚硝酸盐含量的测定

一、实验原理亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，这一产物再与N-1－萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物。可用光电比色法定量。（将经过反应显色后的待测样品与标准液比色，即可大概算出样品中的亚硝酸盐含量。）第二节亚硝酸盐含量的测定一、实验原理87《高三生物复习》二轮复习课件88

二、材料与器具泡菜N-1－萘基乙二胺溶液、对氨基苯磺酸、硫酸锌溶液、氢氧化钠、亚硝酸钠、氯化铵缓冲液等蒸馏水、移液器、容量瓶、榨汁机、分光光度计等二、材料与器具89亚硝酸钠标准溶液(测定时用)：

取1mL亚硝酸钠储液，移至100mL容量瓶中，加蒸馏水定容，即制得5μg/mL亚硝酸钠标准液。显色液：将N－1－萘基乙二胺溶液与对氨基苯磺酸溶液(上清液)等体积混合。试剂的配制

亚硝酸钠标准溶液(测定时用)：显色液：将N－1－萘基乙二胺溶90泡菜样品处理测定光密度值绘标准曲线计算取25g泡菜，打成匀浆，过滤，洗涤，用NaOH调pH至8，加25mLZnSO4，60℃水浴，过滤，洗涤，定容于500mL容量瓶中。泡菜样品处理测定光密度值绘标准曲线计算取25g泡菜，打成匀浆91泡菜样品处理测定光密度值绘标准曲线计算用移液器吸取10mL样品溶液，加入4.5mLNH4CL缓冲液，2.5mL60%乙酸和5mL显色液，加水定容于25mL的容量瓶中。混合均匀，暗处静止25min，测光密度值。以10mL水为空白对照。泡菜样品处理测定光密度值绘标准曲线计算用移液器吸取1092泡菜样品处理测定光密度值绘标准曲线计算用移液器先吸取0，0.5，1.0，3.0，5.0mL的亚硝酸钠标准溶液，分别置于25mL容量瓶中。再各加入4.5mLNH4CL缓冲液，2.5mL60%乙酸和5mL显色液，加水定容至25mL，混合均匀，暗处静置25min，测光密度值。以亚硝酸钠质量为横坐标，以光密度值为纵坐标，绘标准曲线。泡菜样品处理测定光密度值绘标准曲线计算用移液器先吸取0，0.93泡菜样品处理测定光密度值绘标准曲线计算若通过标准曲线，查出10mL样品中含m2(μg)的亚硝酸盐，则每千克样品中含亚硝酸盐多少mg?泡菜样品处理测定光密度值绘标准曲线计算若通过标准曲线，查出194实验11植物的组织培养实验11植物的组织培养951、植物组织培养的过程外植体愈伤组织胚状体或根、芽等植物体脱分化再分化愈伤组织一、基础知识1、植物组织培养的过程外植体愈伤组织胚状体植物体脱分化再分化96你认为培养基应有哪些成分?2、植物组织培养的培养基培养基的成分矿质元素蔗糖

植物激素维生素有机添加物琼脂等外植体愈伤组织胚状体或根、芽植物体脱分化再分化培养基培养基2、植物组织培养的培养基培养基的成分外植体愈伤组织胚状体植物97MS培养基

MS培养基含有十几多种化合物，配制不方便也难称量准确，可将培养基中的各种成分扩大一定倍数分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。(母液配制见下表)

Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的。能满足植物细胞的营养和生理需要，适用范围比较