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文档简介
酶活力的测定一、实验原理淀粉酶包括几种催化特点不同的成员,其中α--淀粉酶随机地作用于淀粉的非还原端,生成麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉浆的粘度下降,因此又称为液化酶;β-淀粉酶每次从淀粉的非还端切下一分子麦芽糖,又被称为糖化酶;葡萄糖淀粉酶则从淀粉的非还原端每次切下一个葡萄糖。几乎所有植物中都存在有淀粉酶,特别是萌发后的禾谷类种子淀粉酶活性最强,主要是α-和β-淀粉酶。Α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下迅速钝化;而β-淀粉酶不耐热,在70℃15min则被钝化。根据它们的这种特性,在测定时钝化其中之一,就可测出另一个的活力。二、材料、仪器设备及试剂(一)材料:萌发的小麦种子(芽长约1cm)。(二)仪器设备:
1.分光光度计2.离心机3.恒温水浴(37℃,70℃,100℃)4.具塞刻度试管
5.刻度吸管6.容量瓶。(三)试剂(均为分析纯):
1.标准麦芽糖溶液(1mg/ml)
2.3,5-二硝基水杨酸试剂
3.01mol/LpH5.6的柠檬酸缓冲液
4.1%淀粉溶液三、实验步骤(一)麦芽糖标准曲线的制作(二)酶液制备(三)酶活力的测定(四)结果计算
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