乳与乳制品中糖的测定-测定方法

乳与乳制品中糖的测定检测方法——高效液相色谱法一二三四试剂和材料仪器和设备分析步骤分析结果表述1.乙腈2.乙腈：色谱纯。

3.标准溶液（1）乳糖标准贮备液（20mg/mL）：称取在94℃±2℃烘箱中干燥2h的乳糖标样2g（精确至0.1mg），溶于水中，用水稀释至100mL容量瓶中。放置4℃冰箱中。（2）乳糖标准工作液：分别吸取乳糖标准贮备液0mL，1mL，2mL，3mL，4mL，5mL于10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成乳糖标准系列工作液，浓度分别为0mg/mL，2mg/mL，4mg/mL，6mg/mL，8mg/mL，10mg/mL。（试剂和材料）检测的试剂和材料（3）蔗糖标准溶液（10mg/mL）：称取在105℃±2℃烘箱中干燥2h的蔗糖标样1g（精确到0.1mg），溶于水中，用水稀释至100mL容量瓶中。放置4℃冰箱中。（4）蔗糖标准工作液：分别吸取蔗糖标准溶液0mL，1mL，2mL，3mL，4mL，5mL于10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成蔗糖标准系列工作液，浓度分别为0mg/mL，1mg/mL，2mg/mL，3mg/mL，4mg/mL，5mg/mL。（试剂和材料）检测的试剂和材料1.天平（感量为0.1mg）2.高效液相色谱仪，带示差折光检测器或蒸发光散射检测器3.超声波振荡器（仪器和设备）检测的仪器和设备（分析步骤）1.试样处理固态试样1g或液态试样2.5g→50mL容量瓶中→加15mL、50℃～60℃水→溶解→超声波振荡10min→乙腈定容→静置数分钟→过滤。取5.0mL滤液→10mL容量瓶中→乙腈定容→0.45μm滤膜过滤→滤液供色谱分析。（分析步骤）2.测定——参考色谱条件气流量：2.5L/min；色谱柱：氨基柱4.6mm×250mm，5μm；示差折光检测器条件：温度33℃～37℃；进样量：10μL；柱温：35℃；流速：1mL/min；流动相：乙腈:水=70:30；蒸发光散射检测器条件：飘移管温度：85℃～90℃；撞击器：关。（分析步骤）2.测定——标准曲线的制作将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的峰面积或峰高，以峰面积或峰高为纵坐标，以标准工作液的浓度为横坐标绘制标准曲线。标准曲线示例图（分析步骤）2.测定——试样溶液的测定将试样溶液注入高效液相色谱仪中，测定峰面积或峰高，从标准曲线中查得试样溶液中糖的浓度。（分析结果表述）计算公式

c×V×100×nX=————————m×1000式中：X——试样中糖的含量，g/100g；c——样液中糖的浓度，mg/mL；V——试样定容体积，Ml；n——样液稀释倍数；m——试样的质量，g。乳与乳制品中糖的测定检测方法——莱因-埃农氏法一二三四试剂和材料仪器和设备分析步骤分析结果表述1.乙酸铅溶液（200g/L）；2.草酸钾—磷酸氢二钠溶液；3.盐酸（1+1）；4.氢氧化钠溶液（300g/L）；5.费林氏液（甲液和乙液）；6.酚酞溶液（5g/L）；7.次甲基蓝溶液（10g/L）。（试剂和材料）一、检测的试剂和材料1.天平（感量为0.1mg）2.水浴锅：温度可控制在75℃±2℃。（仪器和设备）二、检测的仪器和设备

三、分析步骤（一）费林氏液的标定

（1）称取预先在94℃烘箱中干燥2h的乳糖标样约0.75g→用水溶解并定容至250mL→将此乳糖溶液转入50mL滴定管中，待用。1.用乳糖标定（分析步骤）

（分析步骤）三、分析步骤（一）费林氏液的标定

（2）预滴定：取10mL费林氏液→三角瓶→加20mL蒸馏水→从滴定管中放15mL样液→三角瓶→电炉上加热→2min内沸腾，保持微沸15s→加3滴次甲基蓝溶液→继续滴定→至蓝色褪尽→记录样液消耗体积。（3）精确滴定：另取10mL费林氏液→三角瓶→加20mL蒸馏水→加比预滴定量少1.0mL的样液→电炉上加热→2min内沸腾，维持微2min→加3滴次甲基蓝溶液→缓慢滴定→至蓝色褪尽→记录样液消耗体积。1.用乳糖标定（分析步骤）三、分析步骤（一）费林氏液的标定

（4）按式（1）、（2）计算费林氏液的乳糖校正值（f1）：

…………（1）

………………（2）

式中：A1——实测乳糖数，mg；V1——滴定时消耗乳糖溶液的体积，mL；m1——称取乳糖的质量，g；AL1——由乳糖液滴定毫升数查乳糖及转化糖因数表所得的乳糖数，mg。（分析步骤）三、分析步骤（一）费林氏液的标定

（1）取在105℃烘箱中干燥2h的蔗糖约0.2g→用50mL水溶解并洗入100mL容量瓶中→加水10mL→加10mL盐酸→置75℃水浴锅中→使溶液温度在67.0℃～69.5℃，保温5min→冷却→加2滴酚酞溶液→用氢氧化钠溶液调至微粉色→用水定容。再用乳糖标定法中的预滴定和精确滴定操作。2.用蔗糖标定（分析步骤）三、分析步骤（一）费林氏液的标定

（2）按式（3）、（4）计算费林氏液的蔗糖校正值（f2）：

………（3）………………（4）

式中：A2——实测转化糖数，mg；V2——滴定时消耗蔗糖溶液的体积，mL；m2——称取蔗糖的质量，g；AL2——由蔗糖液滴定的毫升数查乳糖及转化糖因数表所得的转化糖数，mg。（分析步骤）三、分析步骤（二）乳糖的测定1.试样处理（1）称取婴儿食品或脱脂粉2g，全脂加糖粉或全脂粉2.5g，乳清粉1g→用100mL水分数次溶解并洗入250mL容量瓶中。（2）徐徐加入4mL乙酸铅溶液、4mL草酸钾-磷酸氢二钠溶液→振荡容量瓶→用水稀释至刻度→静置数分钟→过滤，弃去最初25mL滤液→所得滤液作滴定用。2.滴定（1）预滴定：操作同上述费林氏液的标定中的预滴定。（2）精确滴定：操作同上述费林氏液的标定中的精确滴定。（分析步骤）三、分析步骤（三）蔗糖的测定样液的转化与滴定：

取50mL样液于100mL容量瓶中→按乳糖的测定1.（2）操作→按费林氏液的标定1.（2）自“加10mL水”起操作。（分析结果表述）四、分析结果表述步骤（一）乳糖

试样中乳糖的含量X，以质量分数（g/100g）表示，按式（5）计算：…………（5）式中：X——试样中乳糖的质量分数，g/100g；F1——由消耗样液的毫升数查表1-23所得乳糖数，mg；f1——费林氏液乳糖校正值；V1——滴定消耗滤液量，mL；m——试样的质量，g。（分析结果表述）四、分析结果表述步骤（二）蔗糖

利用测定乳糖时的滴定量，按式（6）计算出转化前转化糖X1，以质量分数(g/100g)表示。…………（6）式中：X1——转化前转化糖的质量分数，g/100gF2——由测定乳糖时消耗样液的毫升数查表2-11所得转化糖数，mg；f2——费林氏液蔗糖校正值；V1——滴定消耗滤液量，mL；m——样品的质量，g。（分析结果表述）四、分析结果表述步骤（二）蔗糖

用测定蔗糖时的滴定量，按式（7）计算出转化后转化糖X2，以质量分数(g/100g)表示。…………（7）式中：X2—转化后转化糖的质量分数，g/100g；F3——由V2查得转化糖数，mg；f2——费林氏液蔗糖校正值；m——样品的质量，g；V2——滴定消耗的转化液量，mL。（分析结果表述）四、分析结果表述步骤（二）蔗糖

试样中蔗糖的含量X,以质量分数(g/10