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微生物检验实验室弯曲菌属检验标准操作规程1.概述弯曲菌属是一类氧化酶阳性、有动力、微需氧、菌体弯曲的革兰阴性细菌,与人有关的包括空肠弯曲菌、空肠弯曲菌德莱亚种、唾液弯曲菌唾液亚种等21个种和亚种。2.标本类型粪便、肛拭子等标本。3.鉴定3.1形态与染色革兰阴性,菌体细长,弯曲呈弧形。3.2培养特性粪便标本应选用CCDA活性炭无血液培养基(CSM)或Campy-CVA等选择培养基。在弯曲菌CCDA平板上微需氧(5%CO2)培养48小时后,可形成半透明、边缘整齐的菌落。3.3生化反应氧化酶试验阳性,不分解糖类,H2S(醋酸铅)、马尿酸钠、触媒和硝酸盐还原试验均为阳性,脲酶试验阴性,42℃生长,对啶萘酸敏感,对头孢噻吩耐药。3.4鉴别要点3.4.1本菌属特征革兰阴性弯曲菌,微需氧,氧化酶、触酶试验阳性,不分解糖类,42℃时生长。3.4.2空肠弯曲菌与胎儿弯曲菌的鉴别空肠弯曲菌马尿酸钠试验阳性,25℃时不生长;而胎儿弯曲菌则相反。3.4.3空肠弯曲菌与幽门螺杆菌的鉴别空肠弯曲菌脲酶试验阴性,42℃时生长;而幽门螺杆菌脲酶试验强阳性,42℃时不生长。3.5操作步骤3.5.1氧化酶试验参见《氧化酶试验标准操作规程》。3.5.2鉴定从CCDA平板上挑取可疑菌落,用仪器鉴定或手工生化(触酶、H2S、马尿酸钠、奈啶酸敏感试验)进行菌落鉴定。4.药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20最新版本文件。5.质量控制见《质量管理程序》。6.检验结果解释与分析本菌感染轻症病人,一般不需治疗。体外药敏显示对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、红霉素、四环素、氯霉素、林可霉素、呋喃妥因和亚胺培南均敏感,对青霉素、万古霉素、利福平、甲氧苄啶等耐药。7.临床意义弯曲菌属可引起肠外感染和慢性持续性感染。空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一,引起婴幼儿和成人腹泻。临床表现为水样便,每日3~20次,以后转为黏液脓血便。胎儿弯曲菌则主要引起肠外感染,如菌血症、关节炎、脑膜炎、肺部感染等。8.鉴定流程菌落观察:CCDA上呈微凸、半透明、边缘整齐的菌落菌落观察:CCDA上呈微凸、半透明、边缘整齐的菌落涂片染色:G-,菌体细长,弯曲呈弧形氧化酶+脲酶幽门螺杆菌+25℃生长-胎儿弯曲菌+马尿酸钠-空肠弯曲菌大肠弯曲菌参考文献[1]周庭银编著.临床微生物学诊断与图解,第二版,上海:上海科学技术出版社,2007[2]叶应妩,王毓三,申子瑜主编,全国临床检验操作规程,第三版,南京:东南大学出版社,2006[3]中国合格评定国家认可委员会,CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南,2008
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