药物分析学课件

第一节学科的性质和任务第二节药物分析与质量标准第三节药物分析学的主要内容第四节最新进展主要内容1、明确药物分析学在药学领域中的重要地位；2、熟悉药品质量检验与标准，初步建立药品质量管理概念；3、了解原料药与各类制剂的常规检验项目与一般分析方法；4、初步了解新药药品质量标准研究一般方法与技术要求；5、初步了解药物分析的最新进展。学习要求学科的性质与地位与相关学科的关系药物分析工作的基本任务第一节药物分析学的性质和任务

药品，指用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应证、用法和用量的物质，包括药材、中药饮片、中成药、化学原料及其制剂，抗生素、生化药品、放射性药品、血清制品和诊断药品等。

凡从事药品生产、经营、使用的单位均应配备相应的执业药师，并以此作为开办药品生产、经营、使用单位的必备条件之一。

研究药物质量控制方法与技术“方法”学科。运用化学、物理化学或生物学的方法和技术研究化学结构已经明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量控制方法，也研究有代表性的中药制剂和生化制剂的质量控制方法。一学科性质与地位药物分析学

用药的安全、合理、有效；在药品的研制、生产、供应以及临床使用过程中对药品进行严格的分析检验；

从各个环节全面保证、控制与研究提高药品的质量，实现药品的全面质量控制。一学科性质与地位药品质量的重要性(合成)药物化学药剂学药理学天然药物化学药物化学药物分析学生药学微生物与生化药学药学(下设6个二级学科)药剂学药理学药物分析学药物化学药事管理与法规生药学执业药师(考试科目)地位数学与计算机药物分析学有机化学无机化学

药理学分析化学

药剂学

生理学

药物化学

生物工程提供数学方法结构与性质提供分析方法体内药物分析工艺考察生物利用度体内外相关质量控制作用机理体内药物分析提供体内环境药动与药代合成工艺二药物分析与相关学科的关系

☆☆☆☆☆

数数物无有分物生微药生药药学理理机机析理物生物理理剂统学化化化化化物化学学学计学学学学学学学涉及的相关学科二药物分析与相关学科的关系

重量分析法酸碱滴定配位滴定容量分析法沉淀滴定

分氧化还原滴定纸色谱

析 电化学分析 平面色谱

化经典色谱薄层色谱

学

☆色谱分析柱色谱现代色谱GC

*HPLC(包括毛细管电泳)UV-Vis

光谱分析

IR

或波谱分析NMRMS1.药品的常规检验——以“药品质量全面监控”为中心,开展药品质量检验（鉴别、检查和含量测定）①成品药检验（西药、天然药、中药、生化药物等原料、制剂）②生产过程中质量控制（中间体）优化工艺③贮藏过程中的质量控制（稳定性考察）三药物分析的主要内容2.为新药研究开发提供科学的质量控制方法①新药开发及新剂型药物质量及稳定性研究②天然产物活性成分的化学结构确证③现代生物技术所研制的生化药物和基因工程药物质量标准研究.三药物分析的主要内容3.临床药物分析—研究药物进入体内后的动态变化开展临床研究,研究药物进入体内的吸收、分布、代谢、排泄等过程,研究药物作用机制,将为临床合理用药提供科学指导,以提高药物疗效,降低其毒副作用.

三药物分析的主要内容4.分析新技术的研究应用追踪国际分析新技术的发展前沿,改进或自主开发质量控制平台和分析技术,建立准确、灵敏、专属、快速、自动化、最优化和智能化的分析方法,以使我国药品质量研究与世界同步.进而达到——药品标准的国际化.三药物分析的主要内容我国药品质量标准体系中国药典与主要国外药典全面控制药品质量的科学管理第二节药物分析与药品质量标准药品质量标准是国家对药品质量、规格及检验方法所作的技术规定，是药品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的法定依据。组织生产提高质量的手段科学管理和技术监督的组成部分联系科研、生产、供应、使用和检验的技术纽带

概述

我国制定药品质量标准的指导思想：中药标准立足于特色，西药标准立足于赶超。一我国药品质量标准体系标准体系

中国药典 上市药品(国家食品药品监督管理局)局标准国家标准地方标准药临床研究用标准(临床研究)品新药研发暂行标准(试生产)标试行标准(正式生产初期)准使用非成熟(非法定)方法检测企业标准标准规格高于法定标准Pharmacopoeia：是一个国家记载药品标准、规格的法典。是国家管理药品生产与质量的依据，和其他法令一样具有约束力.特点:由国家药典委员会编辑出版，由国家政府颁布执行，具有法律的约束力;所收载的品种是疗效确切、副作用小、质量稳定的常用药品及其制剂;需要不断修订。

二中国与主要发达国家及地区药典药典

在一定程度上反映出国家在药品生产和医药科技方面的水平。药典在制剂的研究和生产上有积极的促进作用，其最终目的是保证临床用药的安全与有效。

二中国与主要发达国家及地区药典药典的重要性中国药典-沿革

1953年收载品种531种

1963年1310种

1977年1925种

1985年1489种

1990年1751种

1995年2375种

2000年2691种

2005年3214种

ChinesePharmacopeia，缩写为ChP（2000）。二中国与主要发达国家及地区药典中国药典

中国药典（2000年版）分为一、二两部。另专门出版了：《药品红外光谱集》 《中国药典》英文版

《临床用药需知》

各年的增补本 药典注释（一部、二部）药品检验操作规程——中华人民共和国医药行业标准二中国与主要发达国家及地区药典中国药典中国药典-基本结构和内容：一般分为凡例、正文、附录和索引四部分。1.凡例（GeneralNotices）把一些与标准有关的、共性的、需要明确的问题，以及采用的计量单位、符号与专门术语等，用条文加以规定，以避免在全书中重复说明。凡例是标准的一部分，同样具有法律约束力。2.正文（Monographs）是药典的主要内容，为所收载药品或制剂的质量标准。正文主要包括：名称、性状-------------二中国与主要发达国家及地区药典中国药典3.附录（Appendix）附录部分记载了制剂通则、生物制品通则；一般杂质检查方法、一般鉴别试验、有关物理常数测定法、试剂配制法以及色谱法、光谱法；指导原则。4.索引（Index）中文索引（汉语拼音索引）和英文名称索引。附录不是标准的正式内容------二中国与主要发达国家及地区药典中国药典

进出口药品检验或仿制国外药品标准时，可供参考的国外药典有：1．美国药典与美国国家处方集美国药典TheUnitedStatesPharmacopoeia，目前为24版，即USP（24）美国国家处方集TheNationalFormulary，目前为19版，即NF（19）二者合并为一册，缩写为USP(24)-NF(19)，通常简写为USP（24），37777种二中国与主要发达国家及地区药典主要国外药典2．英国药典BritishPharmacopoeia，缩写BP，目前为2000年版，即BP（2000）收载2663种.

3．日本药局方缩写JP，目前为14版，即JP（14）二中国与主要发达国家及地区药典主要国外药典4．欧洲药典EuropeanPharmacopoeia，缩写Ph.Eup，目前为第三版，2000年增补本。欧洲药典对其成员国，与本国药典具有同样约束力，并且互为补充。5.国际药典TheInternationalPharmacopoeia，缩写Ph.Int，目前为第三版，由世界卫生组织（WHO）组织编撰并颁布。二中国与主要发达国家及地区药典主要国外药典药品非临床研究质量管理规范GLP

GoodLaboratoryPractice药品生产质量管理规范GMP

GoodManufacturePractice药品经营质量管理规范GSP

GoodSupplyPractice药品临床试验管理规范GCP

GoodClinicalPractice三全面控制药品质量的科学管理GLP药品非临床研究质量管理规范(1999.11.1)科研单位研制安全有效药物必须按照GLP规定开展工作.严格控制药物研制的质量,确保实验数据的准确可靠；三全面控制药品质量的科学管理GMP药品生产质量管理规范(1999.8.1)生产企业生产出全面符合药品标准的药物,必须按GMP规定组织生产、严格把关.GSP药品经营质量管理规范(2000.7.1)药品供应部门为了保证药品运输、贮存、销售过程中药品的质量和效力，必须按照GSP进行.三全面控制药品质量的科学管理GCP药品临床试验管理规范（1999.9.1)在新药研究中保护受试者和病人的安全和权利；新药临床研究人员保证药品临床试验资料的科学性、可靠性、重视性.

第三节药物分析学的主要内容药品检验工作的基本内容生物药物的分析药品质量标准的制定

药品检验工作的根本目的就是保证人民用药安全、有效.一般原则

药物分析工作者应具备：高度的责任感、严谨的科学作风、求实和一丝不苟的工作态度、熟练、正确的操作技能一.药品检验工作的基本内容（程序）1.取样2.鉴别3.检查4.含量测定5.检验报告工作程序一.药品检验工作的基本内容（程序）

取样——科学性、真实性、代表性

1取样均匀性合理性取样原则

根据药物性质、不同剂型,采用不同的取样方法及不同的取样量.一.药品检验工作的基本内容（程序）取样程序先进行外观检查包括：品名、剂型、批号、保质期及包装情况等.

1取样当n≤3时，每件取样；当n≤300时,按+1当n>300时,按/2+1一.药品检验工作的基本内容（程序）原料取样制剂分析片剂、胶囊剂（非均匀制剂）每批至少1020片注射剂（均匀制剂）一般35支（测定３次）2性

状性状

——包括颜色、臭味等应有的外观以及溶解度和物理常数.

是质量重要表征之一,在一定程度上反映药品的纯度及疗效.一.药品检验工作的基本内容（程序）3鉴别

依据药物的化学结构和理化性质进行某些化学反应,测定某些物理常数或光谱特征,判断药物及其制剂的真伪.一.药品检验工作的基本内容（程序）鉴别方法要求:专属性强、再现性好、灵敏度高、简便快速一般鉴别试验（generalidentificationtest）是依据某一类药物的物理化学性质为依据,通过化学反应来鉴别药物真伪.无机药物:根据阴、阳离子（钠盐、钙盐、硫酸盐、氯化物）的特殊反应,并以药典附录项下的一般鉴别试验为依据；有机药物:多采用典型的官能团反应（芳香第一胺、水杨酸盐）.一.药品检验工作的基本内容（程序）3鉴

别一般鉴别试验通过一般鉴别试验只能证实是某一类药物,而不能证实是哪一种药物.例如:钠盐的焰色试验,不能辨认是氯化钠、苯钾酸钠或者是其它某一种钠盐药物.

必须在一般鉴别试验的基础上,再进行专属鉴别试验,方可确认.一.药品检验工作的基本内容（程序）3鉴

别专属鉴别试验(specificidentificationtest）

证实某一种药物的依据它根据每一种药物化学结构的差异及其引起的物理化学性质不同,选用某些灵敏的定性反应,来鉴别药物真伪.一.药品检验工作的基本内容（程序）3鉴

别苯巴比妥司可巴比妥钠巴比妥一.药品检验工作的基本内容（程序）

化学鉴别法

色谱鉴别法

光谱鉴别法一.药品检验工作的基本内容（程序）3鉴

别化学鉴别法干法将供试品直接加热或加适当试剂在规定的温度下进行实验,观测此时所发生的特异现象.一.药品检验工作的基本内容（程序）类型：(1)呈色反应鉴别法(2)沉淀生成反应鉴别法(3)荧光反应鉴别法(4)气体生成鉴别法例1钠的焰色实验铂丝用盐酸湿润后,蘸取供试品,在无色火焰中燃烧,使火焰显出特殊的颜色.例2适当温度下加热供试品,生成特殊气味的气体.舒林酸一.药品检验工作的基本内容（程序）化学鉴别法湿法将供试品和试剂在适当的溶剂中,于一定条件下进行反应,发生易于观测的化学变化.一.药品检验工作的基本内容（程序）化学鉴别法(1)呈色反应鉴别法①三氯化铁呈色反应对乙酰氨基酚②异羟肟酸铁反应氯贝丁酯

Cl一.药品检验工作的基本内容（程序）化学鉴别法(1)呈色反应鉴别法③茚三酮呈色反应④重氮化-偶合呈色反应左旋多巴

对乙酰氨基酚一.药品检验工作的基本内容（程序）化学鉴别法(1)呈色反应鉴别法⑤氧化还原呈色反应盐酸氯丙嗪

一.药品检验工作的基本内容（程序）化学鉴别法

(2)沉淀生成反应鉴别法①与金属离子的沉淀反应②与碘化铋钾的沉淀反应③其它沉淀反应一.药品检验工作的基本内容（程序）化学鉴别法(3)气体生成反应鉴别法①大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某些酰胺类药物,可经强碱处理后加热产生氨气.②化学结构含硫药物,可经强酸处理后加热产生硫化氢气体.硫鸟嘌呤

巴比妥类药物一.药品检验工作的基本内容（程序）化学鉴别法(3)气体生成反应鉴别法③含碘有机药物经直火加热可生成紫色碘蒸气.碘苷④含醋酸酯和乙酰胺类药物经硫酸水解后,加乙醇可产生醋酸乙酯的香味.对乙酰氨基酚一.药品检验工作的基本内容（程序）化学鉴别法

(3)荧光反应鉴别法①药物本身在可见光下发射荧光②药物溶液+硫酸③药物溶液+溴④药物溶液+间苯二酚⑤药物经其它反应后发射荧光一.药品检验工作的基本内容（程序）化学鉴别法1紫外光谱鉴别法①

测定最大吸收波长,或同时测定最小吸收波长.乙胺嘧啶供试品在0.1mol/L盐酸介质中的紫外吸收在272nm处为峰,216nm处为谷.光谱鉴别法一.药品检验工作的基本内容（程序）②规定吸收波长和吸收度比值法

两性霉素在362nm、381nm、405nm波长处有最大吸收.规定362nm与381nm处吸收度比值不大于0.6、381nm与405nm波长比值不大于0.9.一.药品检验工作的基本内容（程序）光谱鉴别法

己稀雌酚注射液用供试品溶液250~450nm波长吸收光谱与对照品是否一致鉴别.③与对照品比较,对比吸收光谱的一致性一.药品检验工作的基本内容（程序）光谱鉴别法⑤经化学处理后,测定其反应产物的吸收光谱特性.④规定一定浓度供试品在最大吸收波长处的吸收度.一.药品检验工作的基本内容（程序）光谱鉴别法

2红外光谱法中国药典采用标准图谱对照法BP采用标准图谱对照法、对照品法USP采用对照品法JP规定条件下测定一定波长处特征吸收峰.一.药品检验工作的基本内容（程序）光谱鉴别法色谱谱鉴别法

适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别,具有分离、分析同时进行的特点.高效液相色谱法(HPLC)——供试品和对照品色谱峰保留时间一致.气相色谱法

(GC)——同HPLC要求薄层扫描法(TLC)——对照品比较法，供试品斑点与对照品的Rf值及斑点的颜色应一致.色谱法（HPLCGCTLC)一.药品检验工作的基本内容（程序）②化学法和仪器法相结合,每种药品一般选用2~4种方法进行鉴别试验,相互取长补短.①方法要有一定的专属性、灵敏性、且便于推广.③尽可能采用药典中收载的方法.一.药品检验工作的基本内容（程序）鉴别法小结（2）在维生素C的分子中具有烯二醇的结构，这个结构具有很强的还原性,可以和一些氧化剂作用.例1.维生素C的鉴别：维生素C分子中具有2个手性C原子,所以具有旋光性,可以通过测定旋光度来进行鉴别.（1）药典中规定：维生素C的比旋度应为+20.5+21.5一.药品检验工作的基本内容（程序）鉴别法小结4检查

药物在不影响疗效及人体健康的原则下,可以允许生产过程和贮藏期间引入的微量杂质的存在.

检查是判断药品纯度是否符合限量规定的要求.一.药品检验工作的基本内容（程序）药典中规定阿斯匹林中：

游离水杨酸不得超过0.1%.阿斯匹林如阿斯匹林中游离水杨酸的检查水杨酸一.药品检验工作的基本内容（程序）4检查5含量测定

含量测定——测定药品的含量是评定药品质量,保证药品疗效的重要手段.

含量测定方法——化学分析法、光谱法、色谱法原料药含量测定方法

——

着眼于方法的准确性制剂的含量测定方法

——

特别重视方法专属性、准确性可稍差一.药品检验工作的基本内容（程序）化学分析法

容量分析法原料药含量测定首选方法

重量分析法一.药品检验工作的基本内容（程序）光谱法

紫外分光光度法

可见分光光度法

5含量测定

紫外分光光度法

优点：灵敏度高、操作简便、样品用量少

缺点：准确度不如重量法、容量法，专属性差主要用于含量低制剂含量测定一.药品检验工作的基本内容（程序）可见分光光度法

优点：灵敏度高、操作简便、样品用量少

缺点：准确度不如重量法、容量法，专属性差有色物质或经显色反应生成颜色物质都可以应用于含量测定5含量测定

色谱法

1HPLC法2GC特点：分离分析功能，对复杂供试品分析有利一.药品检验工作的基本内容（程序）

1

HPLC法

主要用于制剂、复方制剂含量测定用于原料药多组分或杂质干扰含量测定抗菌素、激素类药物优点：分离度高、灵敏度好、样品用量少、重复性好，定量、鉴别同时进行缺点：准确度不如重量法、容量法5含量测定

2GC法

主要用于原料药中残留溶剂和挥发性杂质的检查优点：分离度高、灵敏度好、样品用量少、重复性好

缺点：适用于易气化或能被衍生化法测

定样品的分析一.药品检验工作的基本内容（程序）5含量测定

判断一个药物的质量是否合格要以药品的鉴别、检查、含量测定等各项的检查结果综合评价.一.药品检验工作的基本内容（程序）5含量测定

6记录及检验报告

记录完整、无缺页损脚；内容必须真实、简明、具体；宜用钢笔或特种圆珠笔书写；字迹清晰、色调一致,不得涂抹（写错时,划上单线或双线，再在旁边改正重写,并签名或盖章）

(1)原始记录一.药品检验工作的基本内容（程序）例19.6543-8.12701.52723张杰(2)检验报告内容a供试品的名称、批号、规格、数量、来源；取样方法、取样日期；外观性状、包装情况.b检验目的、项目、方法与依据；检验数据.c结论及处理意见；d检验者签名盖章、复核者签名盖章.一.药品检验工作的基本内容（程序）

6记录及检验报告

品名包装规格批号厂牌来源数量取样日期取样数量报告日期检验依据检验记录结论检验人复核人负责人检验报告书一.药品检验工作的基本内容（程序）检验报告书(省略上半页)例溶液颜色A440≤0.07A440=0.02符合规定负责人罗红复核人罗红检验人张杰结论本品经检验符合(中国药典2000年版)规定[含量]≥99.0％99.8%符合规定炽灼残渣≤0.1%0.03%符合规定[检查][鉴别]应生成黑色↓生成↓黑符合规定[性状]应为白色粉末白色粉末符合规定检验项目标准规定检验结果结论母体结构基团鉴别杂质检查其他检查含量测定理化检验色,臭,味等物理常数性状检查取样上述检验及其结果必须有完整的原始记录，实验数据必须真实，不得涂改。

全部检验完毕后，应写出检验报告，并根据检验结果作出明确的结论。1.1化学原料药检验程序例：苯甲酸

[性状]本品为白色有丝光的鳞片或针状结晶或结晶性粉末；质轻；无臭或微臭；在热空气中微有挥发性；水溶液显酸性反应。本品在乙醇、氯仿或乙醚中易溶，在沸水中溶解，在水中微溶。熔点本品的熔点（附录ⅣC）为121.0～124.5℃。[鉴别]（1）取本品约0.2g，加4%氢氧化钠溶液15ml，振摇，滤过，滤液中加三氯化铁试液2滴，即生成赭色沉淀。（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集233图)一致。1.1化学原料药检验程序1.全面检验均符合质量标准如：本品为“维生素C”，符合中国药典（2000年版）的各项规定。2.全面检验后有个别项目不符合规定本品为“葡萄糖”,乙醇溶液的澄清度项不符合规定，其他各项检验均符合中国药典（2000年版）的规定。可改作“口服葡萄糖”用，但不得供制备注射剂用。1.1化学原料药检验程序检验的几种可能结论3.全面检验后不符合标准规定，或虽未全面检验、但主要项目不符合规定，可作“不得供药用”处理。如：本品为“葡萄糖注射液”，其热原检查不符合中国药典（2000年版）的规定，不得供药用。4.根据送检者要求，仅作个别项目检验者.如：本品（维生素B12注射液）的pH值为5.5，“pH值”项符合中国药典（2000年版）的规定（pH值应为4.0～6.0)1.1化学原料药检验程序检验的几种可能结论药物制剂：1）可以更好的发挥疗效2）降低药物毒副作用3）方便使用、贮存和运输原料制剂加入赋形剂、稀释剂、附加剂（稳定剂、抗氧剂、防腐剂、着色剂等），并经过适当的工艺流程。1.2化学药物制剂检验程序淀粉,糊精蔗糖,乳糖糖类硬脂酸镁滑石粉片剂(固体制剂)亚硫酸钠维生素C等抗氧剂氯化钠等渗溶液水植物油溶剂稳定剂防腐剂其他注射剂(液体制剂)基质软膏剂(半固体制剂)赋形剂药物制剂赋形剂1.2化学药物制剂检验程序1制剂分析的复杂性（阿托品原料—

非水碱量法；片剂、注射剂—酸性染料比色法）2分析项目要求不同（用合格原料投料配制,故原料检验项目在制剂分析中一般不再重复检验，按制剂通则要求检查。考虑杂质）3对分析方法的要求不同（盐酸氟奋乃静原料药-非水滴定法片剂-紫外分光光度法）4结果表示与限度要求不同药物制剂分析的特点1.2化学药物制剂检验程序紫外光谱,色谱鉴别一般检查特殊检查检查剂型与辅料含量测定取样性状1.2化学药物制剂检验程序检查（杂质检查、重量差异、崩解时限、溶出度、释放度、含量均匀度等）片剂1.2化学药物制剂检验程序注射剂1.2化学药物制剂检验程序1.制剂方面：组成极其复杂,有效成分含量较低;2.分析方法：需采用提取、纯化等预处理，采取较高灵敏度的测定方法；3.质量检验程序：与一般的化学药物制剂相同。1.3中药制剂检验中药制剂的分析特点纯化提取供试液的制备色谱鉴别化学鉴别

显微鉴别鉴别农药残留量砷盐重金属总灰分和酸不溶性灰分水分

限量检查高效液相色谱法薄层扫描法分光光度法化学法含量测定中药制剂的分析1.3中药制剂检验中药制剂分析程序中药的鉴别：通过确认所含药味的存在与否达到鉴别的目的。意义：是中药制剂质量控制和检验的重要环节。鉴别原则：遵循处方的原则。首选君药与臣药；贵重药和毒、剧药。中药鉴别1.3中药制剂检验中药鉴别方法1.3中药制剂检验1）显微鉴别——通过动、植物组织细胞或其内含物质的形态来鉴别真伪的方法；2）化学鉴别——通过中药材中的特定成分与试剂发生化学反应来进行的方法。3）色谱鉴别——效能高、灵敏，特别适合中药类物质。橙皮苷薯蓣皂苷元α-香附酮乳腺清胶囊（柴胡、青皮、重楼、瓜蒌皮、香附、当归、夏枯草等13味药组成）薄层色谱1.3中药制剂检验1.3中药制剂检验中药检查项目有：水分、总灰分、酸不溶性灰分、砷盐、重金属和农药残留量等；有毒组分需要检查；农药残留量——采用氧瓶燃烧法测定总有机氯和总有机磷，气相色谱法检查各相关的农药。

1.3中药制剂检验中药有效成分含量测定新中药制剂的质量标准中一般要求建立有效成分或特征成分的含量测定项目。方法首选HPLC。

指纹图谱的含义——指同时记录中药制剂中所含各类化学成分（无论已知与否）的图谱。单方制剂——绘制一张指纹图谱；复方制剂——绘制多张图谱。中药制剂应具有相对稳定的指纹图谱。1.3中药制剂检验指纹图谱建立中药指纹图谱的必要性西青果的指纹图谱

西青果的指纹图谱

西青果的指纹图谱

指从动物、植物、微生物中提取的，亦可用生物-化学半合成或用现代生物技术制得的生命基本物质，如氨基酸、多肽、蛋白质、酶、辅酶、多糖、核苷酸和脂类等，以及它们的衍生物、降解物及大分子的结构修饰物等。

1.4生化药物制剂检验生化药物的概念1）分子量不是定值2）需检查生物活性3）需做安全性检查4）需做效价测定5）结构确证难1.4生化药物制剂检验生化药物的特点生物法电泳法酶法紫外光谱法化学鉴别特殊杂质(蛋白质类)一般杂质杂质检查无菌(微生物污染)降压物质(组胺,类组胺)过敏(异性蛋白)异常毒性(急毒杂质)热原(蛋白大分子)安全性检查理化法生物检定法电泳法酶法鉴别检查常用定量分析方法生化药物的分析1.4生化药物制剂检验

利用化学法、物理法、生物学方法来确证生化药物的真伪。1）化学法：如溶菌酶的鉴别2）酶法：如尿激酶和链激酶3）电泳法：如肝素4）生物法：如胰岛素5）紫外光谱法：如三磷酸腺苷二钠鉴别实验1.4生化药物制剂检验HHHOHOHNNNNHCH2NH2OPOOOOOPOHOO-OHP-

生化药物的含量有两种表示-——一种用百分含量；一种是用生物效价或酶活力单位表示。

含量或效价测定1.4生化药物制剂检验程序酶法测定有两种——酶活力测定法、酶分析法。酶活力测定法：是以酶为测定对象的测定方法，目的是测定样品中某种酶的含量或活性；酶法测定1.4生化药物制剂检验程序酶分析法：是以酶为测定工具或测定试剂的测定方法，目的测定样品中除酶以外的其他物质的含量。共同点：原理和方法相同，以酶的专一高效催化某化学反应为基础，通过测定酶反应的速率或生成物浓度来检测相应物质的含量。1.4生化药物制剂检验程序酶法测定酶反应进程曲线012345605101520t/minc/mg/mL5040302010酶量1.4生化药物制剂检验程序1.4生化药物制剂检验程序酶浓度曲线的关系00.10.20.30.40.50.60102030405060酶量反应速率t=15t=10t=5t/min概念药房制剂分析:根据药房工作的特点和要求，运用化学的、物理的或物理化学的分析方法对药房的制剂和配方进行鉴别和含量测定。1.5医院药房制剂的快速检验医院快速检验的特点1.检验对象:药房的制剂和配方(包括医院自制制剂和库存药品）。2.检验项目：鉴别、含量测定鉴别--12项简单的鉴别试验，或利用制剂间不同的化学特征做几项鉴别试验。含量测定—为限度检查3.特点：速度快，检品消耗量少，效率高。1.5医院药房制剂的快速检验医院快速检验的任务1.对药房自制的一切药剂进行定性和定量分析。2.鉴别发给病人的一切需要做定性试验的处方药剂。3.检验购入或库存的质量可疑的药物。4.定期抽检质量不稳定的库存药物或其他自制药剂。5.抽检药房经常应用的贮备溶液和分装的各种药物剂。1.5医院药房制剂的快速检验快速定性分析1.5医院药房制剂的快速检验和药典的鉴别反应类似,选择1—2个较可靠且简单又具有明显外观变化的化学反应,如颜色改变、沉淀的生成与否、结晶的析出、气体的产生等现象,以鉴别药物的真伪或存在与否。采用滴定分析法，但它与常量分析又有所不同。取样量不同

一般固体药物取0.050.15g;液体药物取0.5

2.0ml；油膏类药物不超过1.0g。快速定量分析1.5医院药房制剂的快速检验1.5医院药房制剂的快速检验快速定量分析（２）滴定液的浓度及用量不同

快速定量分析中,所用的滴定液浓度为基数值,即一般应调整到浓度校正因素为1，如0.5000mol/L，0.1000mol/L或0.01000mol/L等。一般消耗的滴定液体积以1

5ml为好。在剩余滴定时，标准溶液的可用量超过5ml，但一般不超过10ml。1.5医院药房制剂的快速检验快速定量分析（3）含量测定为限度检查在药房调配允许误差内，利用事先计算出滴定的高低限，证明滴定液消耗量是在误差范围之内即可。此即近似值的含量测定法，与“限度检查“相似。设调配该方剂所允许的误差范围为±5%，则：第一法取两份供试品溶液分别置两个大试管（一般规格为2.5cm×10cm）（或小锥形）中，各按相同的操作步骤，一管中加入低限量的滴定液，反应应显明显的阴性，说明未达到化学计量点，另一管中加入高限量的滴定液，则反应应显明显的阳性，说明已超过化学计量点，由两管中的不同反应，便可测出制剂中原药的含量限度。1.5医院药房制剂的快速检验第二法

取一定量的供试品溶液置于小锥形瓶中，加入试剂及指示剂，用标准溶液滴定至终点。读取消耗滴定液的数值，即可计算出供试品的百分含量。或从已制好的百分含量与消耗滴定液毫升数对应值表，查出供试品的百分含量。1.5医院药房制剂的快速检验二生物药物分析2.1常用样品的种类、采集和贮藏2.2生物样品的预处理药物进入体内后——经过吸收、分布、代谢和排泄等动力学过程——化学结构和存在状态都可能发生变化（游离型、缀合物、结合物）——在不同个体中存在差异（个体差异）——进而直接影响到药物在不同个体中的治疗效应和毒副作用。

药物存在“化学上等价而生物学上不等价”

概述生物药物分析也叫体内药物分析——是指对生物样品中的药物及其代谢物的分析。具体检材：生物体的各种器官、组织和体液等。生物药物分析

概述生物药物分析的特点4．药物浓度监测和药物滥用——要求分析方法简便、快速。

概述1．干扰物质多——生物样品中含有大量的内源性物；样品一般均需经过分离、净化后才能进行分析2．样品量少、不能重复取样——生物样品多数在特定条件下采集，无法再次取样，且浓度低、变化幅度大3．被测成分浓度低——在测定前需浓缩、富集以适应分析方法要求；对分析方法的灵敏度及专属性要求较高生物样品的种类生物样本：生物体的任何脏器、组织、体液均可作为生物样本.常用样本:

血液（血浆、血清或全血）、尿液、唾液、毛发2.1常用样品的种类、采集和贮藏血液样品的采集和贮藏包括血浆plasma，血清serum,全血wholeblood,其中，血浆和血清是最常用的生物样品.适用：有机药物药动学研究、生物利用度测定、治疗药物检测等.采集：动物——直接从动脉、心脏取血；人——采取静脉血。2.1常用样品的种类、采集和贮藏2.1常用样品的种类、采集和贮藏血浆制备：血样置于含有抗凝剂（肝素、草酸盐、EDTA等）的试管中，混合后在2500－3000r/min离心5min使与血细胞分离，上清液为血浆.血清制备：血样在室温放置0.5－1h待凝血后，剥离血块，以2000－3000r/min离心分离5－10min，取上清液即为血清.国外一般专用血清来测定药物浓度血液样品的采集和贮藏2.1常用样品的种类、采集和贮藏取样时间间隔随测定目的不同如测定药物动力学c-t曲线0123456051015c药物动力学测定中采样次数示意图t如进行治疗药物浓度监测，则应在血中药物浓度达到稳定态后才有意义。血液样品的采集和贮藏2.1常用样品的种类、采集和贮藏保存:血浆或血清样品，须置硬质玻璃试管中完全密封后保存。短时间可置冰箱中4℃保存；长期需冷冻－20℃或－80℃保存。血液样品的采集和贮藏尿液适用：药物剂量回收、肾清除率和生物利用度测定、药物代谢研究毛发适用：微量元素测定2.1常用样品的种类、采集和贮藏血液样品的采集和贮藏生物样品种类被测药物性质测定方法2.2生物样品的预处理预处理方法考虑目的:使药物释放出来，且防止对仪器的玷污.方法:①加入与水混溶的有机溶剂——蛋白质脱水沉淀.甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃等。

②加入中性盐——“盐析”沉淀蛋白质.饱和硫酸铵、硫酸钠、磷酸盐及枸橼酸盐等.V(盐溶液):V(血浆)=2:1

2.2生物样品的预处理去蛋白质

③

加入强酸——与蛋白质阳离子(铵基)形成不溶性盐沉淀.适用于在酸性下不分解的药物。10%CCl3COOH、6%HClO4、5%HPO3等用量:V（血浆）：V（酸液）=1：0.6。 ④加入重金属盐——与蛋白质阴离子(羧基)形成不溶性盐沉淀.CuSO4-NaWO4,ZnSO4-NaOH等

2.2生物样品的预处理去蛋白质

⑤酶水解法——蛋白分解酶(枯草菌溶素)分解蛋白质优点——对酸不稳定、对热不稳定的药物适宜。⑥超滤法—半透膜滤除可溶性生物大分子⑦加热法——蛋白质变性凝固2.2生物样品的预处理去蛋白质

尿中药物多数呈缀合状态2.2生物样品的预处理缀合物的水解OOHHOHHHHOHCOOＨHOH+ROH、RCOOH、RNH2、RSHOOHHOHHHHOHCOOＨHOR

ＳＳＨＯ

ＯＯＯH+

ROH、PHNH2、PHOHＨＯＯＯＯＲ

为测定尿液中药物总量,需将缀合物中药物释出.①酸水解（HCl）

②酶水解（葡萄糖醛酸苷酶或硫酸酯酶）2.2生物样品的预处理缀合物的水解分离纯化与浓集①液-液萃取法：乙醚或氯仿等有机溶剂提取亲脂性药物。②固-液萃取：亲水性的硅藻土、或疏水性的活性炭、聚苯乙烯、C18等吸附后，用有机溶剂洗脱。③被测组分浓集2.2生物样品的预处理化学衍生化

目的：①使药物变成具有被分离的性②提高检测灵敏度③增强药物的稳定性④提高对光学异构体分离能力2.2生物样品的预处理2.2生物样品的预处理化学衍生化药物分子中活泼的H均可被衍生化。—COOH、-OH、-NH2、-NH-、-SH等官能团。GC：烷基化、酰化、硅烷化等以降低药物的沸点；HLPC：提高药物的检测灵敏度。一般是柱分离后衍生化，试剂有邻苯二醛、荧胺等。1.药品检验程序一般分为＿、＿、＿、＿、＿，并写出＿和＿.2.选择氧瓶燃烧法所必备的实验物品包括：磨口硬质玻璃锥形瓶B.铂丝C.氢气D.无灰滤纸E.凯氏烧瓶3.氧瓶燃烧法常用吸收液

A.水－氢氧化钠B.氢氧化钠

C.水

D.硝酸E.硫酸4.氧瓶燃烧法测定双碘喹啉片的含量时，其燃烧产物是什么？吸收液是什么？加溴-醋酸的目的是什么？又为什么加甲酸？

三药品质量标准的制定

1.药品质量标准的定义：国家对药品质量、规格及检验方法所做的技术规定.

药品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的法定依据.2.目的：加强对药品质量的控制及行政管理。3.1制定药品质量标准的目的和意义3.意义：对我国的医药科学技术、生产管理、经济效益和社会效益产生良好的影响与促进作用。有利于促进药品国际技术交流和推动进出口贸易的发展。

与新药的研制密切相关3.1制定药品质量标准的目的和意义

制定质量标准原则

规范性

针对性

先进性

安全性有效性

经济合理3.2制定药品质量标准的原则3.3研究及制定药品质量标准的基础3.4药品质量标准制定工作的长期性自学！名称性状鉴别检查含量测定贮藏3.4药品质量标准的主要内容1.药品名称应科学、明确、简短名称3.外文名应尽量采用世界卫生组织编订的国际非专利药名（INN）.4.中文名尽量与外文名相对应，一般以音对应为主。2.避免采用可能给患者以暗示有关药理学,治疗学或病理学的药品名称.性状

嗅味指药品本身固有的.

外观性状是对药品的色泽和外表的感观规定.1.外观与嗅味性状——理化常数

通过理化常数的测定可对药品进行鉴别及纯度检查.溶解度、熔点、比旋度、晶型、吸收系数、馏程、凝点、折射率、粘度、相对密度、酸值、羟值、皂化值等。2.理化常数

鉴别法理化常数测定

生物鉴定法

色谱分析法化学法

光谱分析法鉴别—可选用的方法化学法>UV>IR>TLC>HPLC>GC>

生物法鉴别a.专属性,灵敏性,便于推广b.选用药典法c.化学法仪器法相结合鉴别法选取原则检查1.一般杂质检查2.特殊杂质检查检查内容检查—检查方法要求与选取原则要求原则针对性灵敏性专属性合理性含量测定方法

容量分析法

重量分析法

分光光度法

色谱法含量测定-常用的法定方法及其特点含量测定—分析法的认证

实验室应符合GLP要求；所用仪器均应按法定标准校对；所用试剂应符合有关规定；色谱法应进行色谱系统适用性试验试验操作者应有良好的专业素质.一、对实验室等内容的要求含量测定—含量测定中分析法的认证1精密度：

RSD≯0.2%(n=5)2准确度：以回收率表示.回收率一般99.7%~100.3%（n=5）容量分析二、分析方法的效能指标含量测定—含量测定中分析法的认证紫外分光光度法1精密度：RSD≯1%(n=3-5)2准确度：制剂按处方比例配置的辅料中加入高、中、低不同浓度的对照品,回收率在98—102%（n=9）.第七章含量测定—含量测定中分析法的认证3线性关系：对照品系列溶液(n=5-7)A为0.2—0.7，

A=ax+b(r>0.999),b应接近零.4灵敏度：以本法实际的最低检测浓度表示.第七章1精密度：RSD≯2%含量测定—含量测定中分析法的认证高效液相色谱法2准确度：制剂按处方比例配置的辅料中加入高、中、低不同浓度的对照品(n=9),回收率应在98102%范围.第七章含量测定—含量测定中分析法的认证

3线性范围：对照品系列溶液

A=ax+b(r>0.999)高效液相色谱法第七章5专属性：考察除主药之外的辅料、有关物质、降解产物的干扰.4灵敏度：以S/N=3时检测限表示.含量测定—含量限度的确定（1）根据不同的剂型（2）根据生产的实际水平（3）根据主药含量的多少第七章综合考虑含量测定—含量限度的确定

例VB1-原料：≮99.0%

第七章制剂：片剂标示量90.0%-110.0

注射剂标示量93.0%-107.0（1）根据不同的剂型含量测定—含量限度的确定

植物中提取原料药,因干扰成分复杂,药品的纯度要由提取分离水平而定.第七章（2）根据生产的实际水平含量测定—含量限度的确定主药含量最小5g（炔雌片）主药含量最大0.5g（阿司匹林）第七章主药含量较大：95.0%105.0%主药含量居中：93.0%107.0%主药含量小：90.0%110.0%（3）根据主药含量的多少贮藏药品的贮藏条件及有效期的确定，都是通过药品稳定性试验来确定的。

（1）概况（2）生产工艺（3）标准制订的意见或理由（4）对本标准的水平进行评价（5）列出起草单位和复核单位对

本标准的意见（6）主要的参考文献药品质量标准起草说明一原料药

（1） 处方（2） 制法（3） 标准制订的意见或理由§7.3药品质量标准起草说明一制剂重量法滴定法比色法紫外分光光度法高效液相色谱法理化法含量测定-常见的定量方法4.药品质量标准的主要内容原料药(西药)的含量测定应首选容量法(滴定法)制剂的含量测定应首选光谱法或色谱法特殊药品，如：酶类药物应首选酶分析法、放射性药品应首选放射性测定法上述方法不合适的可选重量法、氧瓶燃烧法、氮测定法、旋光度法、计算分光光度法等一类新药的含量测定需同时采用两种方法对照含量测定方法选择的基本原则4.药品质量标准的主要内容含量测定-定量分析方法的选择剂型不同限度不同

如VB1，口服用原料含量≥98.5%

注射用原料≥99.0%

片剂标示量的90.0%～110.0%生产的水平提高，限度提高

如硫酸长春新碱(植物提取),初期为≥92.0%

1990年版修改为95.0%～105.0%主药含量高限度严，含量低限度宽

如炔雌醇片(5μg)80.0%～120.0%

乙酰水杨酸片(0.5g)95.0%～105.0%含量限度的确定4.药品质量标准的主要内容含量测定-含量限度的确定

氯硫铁砷铵重酸溶澄水干炽易有特化酸盐盐盐金碱液清分燥灼碳机殊物盐属度颜度失残化溶杂色重渣物剂质残留量等药物杂质检查的内容

精准检定选线重耐与密确测量择性现用参的度度限限性与性性比相范方关围法程测度得的结比果较3-3药品质量标准的制定含量测定-定量分析方法效能指标的考察加速试验40℃±2℃、RH75%±5%，0、1、2、3、6个月长期试验25℃±2℃、RH60%±10%，0、3、6、9、12个月研究方法3-3药品质量标准的制定贮藏-药品稳定性研究性状、含量、有关物质熔点、吸湿性等原料药性状、含量、有关物质崩解时限、溶出度片剂外观色泽、含量、有关物质pH值、澄明度注射剂性状、含量、有关物质均匀度、粒度软膏剂重点考察项目有关物质(含降解产物或其它变化的生成物)

应说明生成的产物与量的变化；如有可能还应说明有关物质中何者为原料中的中间体，何者为降解产物；稳定性试验中重点考察降解产物。研究内容贮藏-药品稳定性研究第四节药物分析的新技术与新方法在体采样技术分析技术中药分析法微透析技术在体采样技术毛细管电色谱毛细管电泳亲和色谱电喷雾质谱分析技术模式识别法基因分析法中药分析法新技术与新方法活体实验动物微透析探针管子微注射器灌注液微注射泵检测系统一、在体采样技术微透析技术示意图方法：将探针植入透析部位，用透析液慢速灌注探针并导出体外完成采样过程特点：不破坏生物体内环境；动物体内所有器官和组织（如脑）中使用；清醒、自由活动的动物；即时监测药物浓度变化 前景：目前尚不够成熟，主要以大鼠为对象进行药物动力学研究；应用前景良好微透析技术一、在体采样技术方法：根据生命现象中大分子间的高亲和力和高特异性可逆结合的一种独特的色谱分离分析技术特点：利用生物分子间的特异性反应来实现组分的分离和纯化的，具有较高的专属性和灵敏度前景：随着新型配基的发掘和与其它分析技术的接口得以解决，在生物样本分离分析领域，尤其是手性分离中将处于越来越重要的地位。二分析技术——亲和色谱传统的中药鉴定方法：通过人的感官鉴定其外观性状，该法仅适用于较为完整的动植物药材，并在很大程度上是一种经验的总结近代显微鉴别技术和理化分析方法：依靠动植物细胞形态、组织结构和某些特殊内含物来鉴定中药，虽然较传统的方法有了很大的进步，但仍难以有效控制中药质量。近年来，随生物技术及计算机技术的不断发展，为革新法定的中药鉴定和质量控制方法奠定了基础4-3.中药分析技术原理：一种通过对不同生物个体遗传物质DNA的差异来鉴别生物物种的方法特点：DNA作为遗传信息的直接载体，不受环境等因素的影响，方法具有更高的准确度和可靠性。（1）基因分析法方法：随机引物扩增PCR技术——利用一个随机序列的寡核苷酸引物以分析样品基因组DNA作模板，进行无细胞分子克隆(PCR)，通过琼脂糖凝胶电泳技术分析扩增产物的相似度系数前景：该技术由于处于研究阶段，在本世纪有可能成为继色谱技术之后，在中药鉴定和分析领域中又一常规技术。白花蛇舌草RAPD