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生态学实验》表实验项目清单序号项目名称项目类型课时说明1植物种群空间分布格局的调查验证性5野外实验2植物多样性的测定验证性5野外实验3植物化感作用的研究设计性6室内实验实验一植物种群空间分布格局的调查[5课时]一、实验目的通过各检验方法的实际训练,使学生认识群落中不同种群个体空间分布表现出的不同类型(随机分布型、集聚分布型、均匀分布型),并掌握检验植物空间分布类型的方法。二、实验材料皮尺、样方框(20X20,50X50,l00X100cm2)、铅笔、野外记录表格、计算器。二、实验原理群落中种群个体空间分布类型的检验方法研究得比较深入。从1922年Svedberg提出群落中植物分布的非随机性,以与给出检验植物非随机性的标准方法以来,到现在已经相继提出10多个非随机性检验的估计量。本实验选用€2检验法和C分布系数法检验。x€2检验法:如果一个种群的个体分布是随机的,那么各样方包含0、1、2、3、……、n个个体的概率分布都是符合泊松(Poisson)级数的,级数可写成下列形式:TOC\o"1-5"\h\zm2 m3 mne-m,me-m, e-m, e-m, , e-m2! 3! n!其中m是样方中的平均个体数目,即均值X。检验是用€2值检验实测值(即含0、1、2、3、……、n个个体样方的分布频次)与理论期望值(即泊松理论的期望频次)是否吻合,有无显著差异。其统计量为:y(实测值-理论期望值)€2=y理论期望值查€2分布百分比表,比较€2的计算值与查表值,通常可做出如下判断:若€2三€20.0i(f…,可认为偏离或很不适合泊松分布,即属于非随机分布;若Z2VZ2005„f…,可认为适合泊松分布,即属于随机分布;若€20.05(f…W€2V€2o.oi(f…,可认为可能不适合泊松分布。检验时每一级的理论值必须大于5,若小于5,可将相邻区间合并直至满足要求。分布系数法(扩散系数法):该方法根据Poisson分布具有方差与均值相等的性质,来统计和检验野外调查数据。分布系数C的统计量为:xs2C=-x式中:X—均值;S2—方差若C=0,种群属于均匀分布;0VCV1,属于规则分布;C=l,属于泊松分布(随机分布);xxxC>1属于集群分布。在统计学上,采用t检验来确定C的实测值与理论预测值1差异的显著xx程度。T检验的公式为:实测值-1s2/X-1t= = 标准误 s_,'2式中:S—标准误,s=「N一1N—样方总数。查表比较,差异不显著时,可认为符合泊松分布(随机分布)。四、 实验步骤学生分组,选择所需研究的植物种群,并确定合适的样地面积。根据最小面积法确定样地面积,一般草本植物可用lmXlm,灌木可用5mX5m样地,乔木则根据具体情况,可适当可大尺度,如可用20mX20m样地。采用邻接格子法在所选样地在划分小样方,一般草本可用0.2mX0.2m,灌木可用lmXlm,乔木可用5mX5m。也可根据具体情况采用其它方法确定合适的样方大小。计数:将每一样方中待测植物的株数,记录在野外记录表格中,整理调查数据,并计算有关统计特征数。计算,2值,C值。x说明,2值检验与C值法检验的结果,指出所测定种群的分布类型。x五、 思考题种群空间格局分布类型的特点与可能形成原因的分析。各种数据处理和检验方法的优缺点有哪些。讨论样方大小对实验结果的影响。表1种群空间格局样方表日期: 物种:一年蓬 样地位置:样地面积:_lmXlm 观测人XX:样方号12345678910111213个体数2611161265107841310样方号141516171819202122232425个体数7645101310101115913数据初步整理:总样方数N 总个体数n每样方平均数x方差S225 2238.9213.41表2 ,2法数据处理表个体数理论值实测值差值,200.003302.64601.307710.0298020.1330130.3953040.8816251.5728262.3382372.979623.30181.730083.3222193.292710.22980.0085102.93715112.38172112.38172121.77041131.21483140.77400150.46031160.25661>160.256600.8856 0.11443.1606表3C法数据处理表x指数计算结果指数计算结果检验结论1.5034t=1.7438t =2.0640.05(24)t =2.7970.01(24)随机分布实验二植物多样性的测定[5课时]一、 实验目的学习群落物种多样性的调查方法,比较各地区物种多样性的差异;了解各类指数的特点和生态学意义;熟悉和掌握最常用的物种多样性指数的计算方法。二、 实验材料皮尺、样方框(20X20,50X50,l00X100cm2)、铅笔、野外记录表格、计算器。三、实验原理物种多样性代表了群落组织水平和功能的基本特征,它通常包涵两种涵义:(1)种的数目或丰富度(speciesrichness),即一个群落或生境中物种数目的多寡;(2)种的均匀度(speciesevennessorequitability),即一个群落或生境中全部物种个体数目的分配状况,它反映的是各物种个体数目分配的均匀程度。多样性指数是反映丰富度和均匀度的综合指标,生态学考察中较多使用的多样性指数有辛普森指数(Simpson'sindex)、香农-威纳(Shannon—Wiener)指数与均衡度指数。辛普森多样性指数(Simpson'sdiversityindex):该指数指数假设,对无限大的群落随机取样,样本中两个不同种个体相遇的几率可认为是一种多样性的测度。用公式表示为:辛普森多样性指数=随机取样的两个个体属于不同种的概率=1-随机取样的两个个体属于同种的概率设种i的个体数占群落中总个体数的比例为Pi,那么,随机取种i两个个体的联合概率就为P;,如果我们将群落中全部种的概率合起来,就可得到辛普森指数D,即1)=1—土用式中,S为物种数目。香农-威纳指数(Shannon-Weinerindex)与均衡度:该指数假设在无限大的群落中对个体随机取样,而且样本包含了群落中所有的物种,个体出现的机会即为多样性指数。种信息量越大,不确定性也越大,因而多样性也就越高。其计算公式为:E二H/InS式中:H为香农指数;E为香纳均衡度指数;P为第i个种在全体物种中的重要性比例,如以个体数量而言,n为第i个种的个体数量,N为总个体数量,则有P=n/N;S为物种数目。i ii四、 实验步骤选择样方(1) 在校园草地和种植区划出同样面积样方块,面积视植物密度而定,从I平方米到10平方米,密度高的样方可小些。(2) 在附近小山的阳坡和阴坡,也可以在教学楼的南面和北面选择同样面积的样方各一块。统计记录按选择的样方统计样方内的动、植物种类数和每一种的个体数。对不认识的植物应该采样带回实验室检索。并把有关数据记入下页表。物种多样性指数计算比较同一地区不同的耕作条件或不同的自然环境中群落的差异五、 思考题不同环境中物种多样性的差异程度与其形成原因分析。各类多样性指数计算结果的差异与分析。样方面积的大小对多样性指数的影响。表1 野外群落观察记录日期: 样地位置: 样地面积: 1mX1m 观测人XX:种名群落1群落2群落3群落4群落5实验三植物化感作用的研究(综合设计实验,历时4周)[6课时]一、实验目的认识植物的化感作用与其对生态系统结构和功能的重要影响,并从中了解从分子水平研究生物与环境相互作用机理的重要性;初步学习怎样通过实验方法来研究植物化感作用的存在;培养独立进行实验设计和科学研究的能力、特别是创造能力,受到一次比较综合的科学训练;同时,通过实验过程中小组同学的密切合作,加强团队精神;初步了解化感作用的研究现状和发展动态。二、实验原理什么是化感作用在植物群落中,常有一些植物能产生并向环境中释放一些化学物质,影响(抑制或刺激)邻近异种或同种植物的生长和发育,这就是植物间的化感作用(allelopathy)o1937年,奥地利科学家H.Molisch在文章中首次用两个希腊字“allelon”(相互)和“pathos”(不利,忍受痛苦)创造了一个新词“allelopathy”。Molisch对该词的定义为:在所有植物(包括微生物)之间的有害(抑制)和有利的(刺激)生物化学相互关系。化感作用的基本定义明确了化感作用的3个基本特征:1)相互作用的主客体均是植物,不包括植物与动物与其他有机体的相互作用;2)相互作用的化学物质是植物的释放到环境中的次生代谢物质,不包括在植物体内变化运转的次生物质;3)化感物质主要用于影响自身或邻近植物的生长发育,植物释放的化学通讯(如报警)物质和环境污染物等不属于化感作用基本定义的X围。植物化感作用是生态系统中种间相互作用的重要途径,在植物群落的组成和分布、生态系统演替过程和物种替代机制、外来种的生态入侵等方面起着重要作用。在森林更新、建造人工林、作物重茬退化、作物间作与混作、枯落物覆盖等生产实践中,化感作用也具有重要应用。我国植物化感作用研究起步较晚,20世纪80年代仅有零星报道,但自20世纪90年代初开始迅速发展。中国生态学会于1990年12月成立了化学生态学专业委员会,1998年召开了第二届化学生态学学术报告会。目前国内已有数十个化感作用研究课题组,中国科学院应用生态研究所、XX植物研究所、华南农业大学、中国农业大学、XX大学农学院等单位植物化感作用的研究十分活跃。化感物质(allelochemicals,allelopathicagents)化感物质大多是植物的次生代谢物质,不参与有机体的主要代谢过程。植物的各种器官都可能产生和释放化感物质。种子、果实、芽和花粉中的化感物质能保护植物不受损害,尤其是微生物的进攻。茎、叶组织是大量化感物质的来源。根部的化感物质能够有效地保证根系的生长,尤其在不利的土壤条件下。植物化感物质主要通过茎叶淋溶、茎叶挥发、根系分泌和植物残体降解4种途径释放到环境中,同时,种子萌发和花粉传播也是化感物质释放的有效途径。在干旱少降水的沙漠地区,植物主要是以挥发的方式释放化感物质,而在高湿度多降水地区,植物主要是以淋溶方式释放化感物质。Whittaker和Feeny(1971)将这些化感物质分为5类:苯丙烷类、已酰配基类(acetogenins,指所有从乙酸衍生来的各种化合物)、萜类、甾类和生物碱。Rice(1984)将其划分为15类,即:(1)简单的水溶性有机酸、直链醇、脂肪醇、脂肪醛和酮;(2)简单的不饱和内酯;(3)长链脂肪酸和聚乙炔;(4)醌类;(5)简单酚类、苯甲酸与其衍生物;(6)肉桂酸与其衍生物;(7)香豆素类;(8)黄酮类;(9)单宁;(10)萜类和甾类化合物;(11)氨基酸和多肽;(12)生物碱和氰醇;(13)糖甙硫氰酸酯;(14)嘌吟和核苷;(15)其他化合物。李绍文(2001)将化感物质分为酚类,萜类、炔类、生物碱和其他化合物等5类加以描述。孔垂华等(2001)指出,高等植物的化感物质主要是酚类、类萜和含氮化合物以与聚乙炔和香豆素等。从目前的研究结果来看,上述各类物质中,酚类和类萜是高等植物的主要化感物质。(4)植物化感物质的作用机制:许多研究结果表明,大多数化感物质具有广谱性的作用机制,能够影响植物的许多生理生化过程,但主要机制是引起膜透性的改变,影响气孔机能和呼吸作用、干扰金属离子的摄取和水分吸收,进而影响酶功能和活性、影响光合作用和生物合成、影响植物细胞分裂、伸长和亚显微结构,并能与植物激素产生相互作用等。需要注意的是,化感物质的作用机制不仅取决于化感物质的种类和浓度,而且取决于不同化感物质彼此之间的相互作用,同时还受环境因子的影响。因此,一种植物对另一种植物的化感作用机制应当随着环境、释放化感物质的种类和数量的不同而发生变化。感兴趣的同学可进一步参看李绍文(2001)编著的《生态生物化学》一书第57-61页、孔垂华等(2001)编著的《植物化感(相生相克)作用与其应用》一书第152-167页的详细论述和研究实例,以与李寿田等(2001)的综述。植物化感作用研究的基本思路孔垂华等(2001)将植物化感作用研究的主要内容和目的归纳为下图。(1)主体植物释放化感物质使得受体植物的生长发育受到连续和定量的影响;(2)能从主体植物中分离鉴定得到化感物质,而且这些化感物质无论是在室内还是在田间都能对受体植物确实产生效应;(3)主体植物产生和释放的化感物质在自然条件下能以足够的生物活性浓度到达邻近受体植物;(4)以足够生物活性到达受体植物的化感物质能够被吸收并能够影响受体植物的生理生化过程;(5)排除受体植物的生长发育受植物竞争、动物侵害、病菌感染以与物理环境等非化感物质因素产生的影响。4.化感作用的生物测定生物测定是化感作用研究中非常重要的一个环节。选择适当的生物测定方法是化感作用研究的关键之一。为此,曾任森(1999)对国内外化感作用研究中的常用生物测定方法进行了综合评述。(1)种子萌发测定:种子萌发实验是最广泛采用的生测方法。它简单,快速,仅需较少的化感物质。实验器皿通常采用培养皿,有时也用三角瓶或小烧杯。三角瓶和小烧杯优于培养皿之处在于其保湿性能良好,允许植株长得较高;缺点是截面较小,对实验种子数限制较大。实验基质可选用滤纸、海绵、毛毡布、琼脂、砂培、无菌浮石等。进行实验时,将经挑选的种子放入已被测试液饱和的基质上,在合适温度下进行培养。萌发实验所需测试溶液的多少取决于所用容器的大小、种子的大小和萌发床所用的基质,一般为3-10ml,特别需要注意保持种子的透气性,不能淹没种子。若将供体种子和受体种子以不同的比例在同一培养皿中进行萌发试验,则有助于测定供体种子萌发对受体种子萌发是否具有化感作用。种子发芽的标准是胚根突破种皮l-2mm以上,发芽的时间根据植物的不同一般为l-7d。计算指标常用种子萌发率和萌发速度指数来表示。其中Leather等(1986)等提出的种子萌发速度指数(I)可定量衡量化感物质对种子萌发的延缓作用。具体方法是:连续5天记录种子萌发情况,用如下方法计算I值:I=2X(5X+4X+3X+2X+1X)l 2 3 4 5这里Xi是指每隔24h发芽的种子数,*为24h记录的发芽数,X2为4紡记录的发芽数,依次类推。受体植物应根据研究目的和在野外可能的作用对象来选择。但一般性地研究某种植物是否具有化感作用,则宜选用对化感物质敏感、生长快而整齐的受体植物。通常采用作物(常用莴苣、萝卜、油菜、黄瓜、小麦和高粱等)的比较多,这是由于作物种子发芽比较整齐、发芽时间较短、发芽率高、实验结果重现性比较好。作物发芽率高适合测定对种子萌发的抑制作用,而促进作用很难检测出来。杂草种子发芽率低,发芽时间长,发芽不整齐(如不进行种子预处理往往较难得到理想的实验结果),结果的重现性也差。用杂草种子研究化感作用对种子萌发的促进作用很有用处,但是解释实验结果时要特别慎重。例如,对于休眠种子,化感物质可能因解除种子休眠而表现出“促进作用”,但这却使种子在不适合生长和繁殖的环境条件下萌发,反而对受体植物不利。(2)生长和发育测定很多研究者用胚根、胚轴或胚芽鞘的伸长结合种子萌发率来检测化感活性。幼苗生长测定的敏感性一般比种子萌发要高,幼苗根生长的敏感性又大于苗生长的敏感性。根伸长的生测特别适合于研究化感物质对影响细胞生长的植物激素的影响,以与对细胞分裂的影响。幼苗生长测定的缺点是需要较多数量的化感物质,生长测定工作量较大,而且根经常产生卷曲和形态上的改变,测量其长度比较麻烦。对于根长的测定,Haugland(1996)设计出一种快速简易的办法,即在长24cm、宽llcm、高7cm的透明方盒的底部垫上2层滤纸,加入30m1提取液或蒸馏水(对照),将刚发芽的受体幼苗沿盒的一边水平排成一排,将方盒斜放成450。这样根能直着生长,易于测量。也可在盒上标记好尺寸,每24h观测记录根的长度。该方法也可用于测量苗高。对幼苗生长的影响也常用干物质重量来表示oLeather等(1986)指出,将幼苗培养7-10d,测定幼苗干重是表示化感作用全面影响的一个敏感指标,干重分地上苗和地下根两部分,也可计算苗/根的比例。也有不少研究用幼苗的鲜重作为衡量指标。当化感物质数量有限时,可将预先发芽好的种子置于含一定浓度化感物质的培养基上进行实验。例如,将催过芽的种子放在含有一定浓度化感物质或抽提物的琼脂试管中,胚根和幼苗生长可在未受损伤情况下进行测量,幼苗也很容易被移出来进一步分析(Leatheretal,1986)o曹坳程(1992)介绍的一种快速灵敏的除草剂生物测定方法可以借鉴。即用1%的琼脂水作为基质,用刚萌发的稗草作为受体材料,在光照和27oC条件下培养72h,测量芽长和叶绿素在660nm处的消光度。用循环培养液法测定根分泌物对受体植物生长发育的影响也很有效。用水培或砂培法将供体植物种植在高处,将受体植物种植在低处,然后将供体植物的根分泌物连同营养液不断渗滴到受体植物根部。最后将最下面的受体培养中水培液用气泵打到最高的供体植物培养瓶中。不断循环,培养一段时间,测定供体根分泌物对受体生长发育的影响。(3)组织培养的生测:例如,对于大型乔木的化感作用,研究起来有一定难度,但用组织培养法可以在较短时间内取得良好效果。(4)化感作用机理的生物测定:化感作用机理方面的研究相对比较薄弱。化感物质种类繁多,同一种物质常对植物的多种生理生化过程产生影响。例如,阿魏酸几乎影响植物所有的主要生理生化过程。因此生物测定方法非常复杂多样,许多涉与植物生理学实验的内容。感兴趣的同学可进一步参看聂呈荣等(2002)关于三裂叶蟛蜞菊对花生化感作用的生理生化机理的研究论文与其所附参考文献。近年来,一些作者还利用放射同位素示踪法研究化感物质对受体植物养分吸收的影响。(5)化感物质的收集方法:化感物质的潜力是通过测定挥发物、淋溶物、根部渗出物以与组织抽提物等的生物活性来评价的,所用溶剂有水、醇、醚、酯等。淋溶物和浸提物:以植物或其残体为生测材料,采用水淋洗或浸提,收集淋溶液或浸提液,进行过滤、浓缩或稀释,配成所需浓度,进行生测。证实化感作用最好是用水作为抽提溶剂并在常温条件下提取,避免用有机溶剂或热水。很多研究将植物材料进行粉碎后再进行提取和化感物质的分离。在粉碎研磨过程中很多在自然条件下不释放的酶、氨基酸、无机盐和含氮物质也释放出来,这并不代表化感作用的真实情况。挥发物:对挥发性化感物质的取样和分析可采用常温吸附法。在实验室中,也可将整株植物材料或鲜叶片放在密闭容器(常用大的干燥器)中直接挥发生测,将受体植物种子或幼苗置入容器中进行实验。对照可以不放供体植物材料或放不产生挥发性化感物质的植物材料。注意容器必须每天通气以保证足够的氧气供应。但此方法可能会因挥发物的量在短时间内太少而现象不明显。根分泌物:根分泌物是活体根产生化感作用的主要途径,用浸提方法所获得的结果并不代表通过活根产生的化感作用。通常,将供体植物在培养液或固体介质中生长一定时间后,将培养液或培养基作生物测定或化学分析。唐崇实等(TangC.S.etal,1982)设计的CRETS循环水培装置在水培或砂培系统中用XAD-4树脂收集未受干扰的根所产生的疏水性分泌物,再用甲醇洗脱树脂中吸附的物质,进而测定根分泌物对受体的生物活性和对根分泌物进行分离和鉴定,该方法目前在国际上已得到较广泛应用。此外,也可用绒纸吸附和用琼脂收集根分泌物。(6)影响生物测定的因素:生物测定除受受体植物种类、发芽种子的数量、实验所用基质、溶液的体积、化感物质的收集方法等的影响外,还受很多其他因素如溶液的渗透压和pH值、实验温度和光照、微生物、以与供体植物材料等的影响。一般来讲,渗透压大于150毫渗摩时就对很多植物的种子萌发产生显著影响(Leatheretal,1986)。因此在研究中需要考虑植物材料与溶剂的比例,并调节好对照渗透压。同时,研究中所使用的浓度不能超过自然界中可能存在的最大浓度。土壤微生物不仅影响化感物质产生的数量,也影响化感物质的种类。有的植物体内含有化感抑制物质,但并不表现出化感作用,可能是由于土壤中微生物活动或土壤胶粒吸附作用的结果;而有的植物残体只有在适合微生物生长的条件下才表现出化感作用。有时,到底是植物残体还是微生物的化感作用很难区分。因此,有人建议化感作用研究应用未经灭菌的土壤进行实验。此外,植物材料的选择也有重要影响。有的植物如狗尾草、野燕麦、银胶菊等只在一定的生长时期才表现出化感作用。苹果只有种植一定年份后才发生自毒作用。有的植物化感作用因季节变化而异。而且,化感物质在植物体内的产生以与向环境的释放是受环境调控的。一般来讲,在环境胁迫条件下,植物的化感作用增强,体内化感物质增加,释放到环境中的化感物质也增多。(7)化感作用的衡量指标通常用:G.B.Williamson等(1988)提出的化感作用效应指数RI作为衡量指标:其中,T为处理值,C为对照值。RI>0表示存在促进作用,RIV0表示存在抑制作用,RI的绝对值代表作用强度的大小。由于化感作用研究是一个新型的研究领域,加上化感物质产生的数量少,往往与其它物质具有协同效应,因此,急需研究探索一些更加灵敏有效的生物测定方法。三、研究实例1.关于桃(Prunuspersica)在同一土地上再植障碍问题的研究(资料来源:李绍文,2001)Proebsting等(1941)设计了很多实验。(1)他们从桃园和非桃园选取土壤样品做盆栽实验,发现两者并没有显著差异。(2)若把桃树根加到非桃园的土中,实验桃苗就受到了严重伤害,植株变矮,重量减轻。(3)将桃根分为根皮和木质部两部分分别实验,发现化感物质存在于根皮中,并确定为苦杏仁苷(amygdalin)。(4)把1g苦杏仁苷加到25OmL营养液里,每周向桃苗浇1~2次,发现并没有伤害作用产生。(5)当把同样量的苦杏仁苷和苦杏仁酶(苦杏仁酶能水解苦杏仁苷成苯甲醛和氢氰酸)一起施用时,伤害就发生了而且很严重。(6)对这两种化合物分别进行实验,发现1g苯甲醛对桃苗影响很小,而0.1g的氢氰酸却对桃苗产生了严重伤害。Patrick(1955)进一步研究了桃树的这些化感作用产生的机制,发现桃树根提取物能极大地抑制桃树苗根的呼吸,这种抑制作用随着桃根残体的增加而加大。进一步实验表明,苦杏仁苷本身对呼吸并没有影响,而其降解产物苯甲醛和氢氰酸却能强烈抑制桃树根的呼吸。在高压灭菌的土壤里,苦杏仁苷并不能产生氢氰酸,说明在苦杏仁苷的水解过程中土壤微生物的作用是不可缺少的。Patrick等(1964)还指出,任何能破坏或侵入根细胞的因子,如线虫、病原菌、昆虫或物理因素,都能使桃根释放出苦杏仁苷来,其进一步的降解产物造成了根的伤害。2蟛骐菊根分泌物化感作用的研究(资料来源:曾任森等,1994)蟛骐菊(Wedeliachinensis(Osb.)Merr.)是华南常见的草本绿化植物,往往趋于形成纯植丛。曾任森等(1994)通过砂培水洗方法获得蟛骐菊的亲水性根分泌物,通过水培用XAD-4树脂吸附收集疏水性根分泌物,来研究蟛骐菊根是否具有异种克生作用,并确定它的作用浓度并试图对根分泌物的化感活性物质进行分离。下面仅就其研究方法作一简单介绍。(1)亲水性根分泌物的收集与活性测定在长X宽X高为50cmX30cmX20cm、底部开有水孔的白色瓷盆中,底部铺5cm厚的干净砾石,上面铺12cm厚用0.8%福尔马林杀菌的细砂作培养床。盆底下水孔用带一段玻璃管的胶塞塞紧,玻璃管下接一段胶管。将蟛骐菊植株扦插于盆中,在温室培养一段时间后,开始收集根分泌物。用10000ml自来水循环淋洗盆中蟛骐菊根部,每天2次,由于蒸发,7天后得淋出液2000ml,用水稀释成6000ml,再加回盆中浸泡根,24小时后放出浸泡液,间隔24h后,再用上述淋出液浸泡根24h。最后收集得到根淋出浸泡液5440ml。取其中的1000ml减压浓缩(温度〈50C)至80ml(此浓缩液pH=5.5,渗透压=1.05l05Pa),供生物测定。盆中茎叶鲜重为755g,根鲜重为128g。浓缩液折合起来的

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