生化检验实验室基本知识

生化检验实验室基本知识邓益斌内容简介一、生化检验标本二、生化试剂盒三、检验项目四、生化仪器五、室内质量控制六、实验室信息系统（LIS）七、常用生化分析技术一、生化检验标本生化检验最常用的标本为血液标本，其他有尿液、脑脊液和胸腹水等不恰当的标本收集与保存，不注意影响标本成分变化的各种因素，往往是导致实验结果不可靠的主要原因（一）标本采集1.血标本采集方法采血部位：静脉、动脉、毛细血管2.血标本类型与选择血标本可分为全血、血浆与血清血清与血浆有何区别？血清与血浆有何区别？1.血浆是抗凝血释出，而血清是非抗凝血释出2.血浆中含有纤维蛋白原，而血清中不含有纤维蛋白原3.血清与血浆中：ALT、AST、GLU、CK、TBIL、BUN、Ca2+等无统计学意义;Alb、TG、ALP、UA、钠磷等有统计学意义无临床意义（二）影响血标本成分变化因素1.生理因素：年龄、性别、体型、情绪、运动2.饮食因素：3.药物因素：4.溶血因素：5.储存因素：Cho/UA/ALP性激素TG皮质醇、催乳素、生长素、GLU下降：Alb、铁、钾、总胆增高：ALT/AST/ACP/ALP/TP/BUN/CR/UA/GLU/AMY受饮食影响的项目项目：GLU、TG、ALP、血酯、丙酮酸、乳酸、BUN、UA、转氨酶等原则：空腹6-12h后采血受药物影响的项目药物影响检验结果途径：1.药物本身对检验方法的影响2.药物代谢产物对检验方法的影响3.药物对代谢器官功能的影响原则：检验受某种药物影响的项目之前3天，停止该药物的使用受溶血因素影响的项目当待测物在红细胞内的浓度高于血清时，溶血可使该待测物结果偏高，如LDH，AST，ALT，ACP，K+等红细胞溶解所释放出来的大量血红素，可干扰某些项目的检测，如CHO的酶法测定，BIL的重氮反应，光谱分析等防止溶血的几个环节：一是采血过程;一是血清分离过程防止溶血的办法：？1.采血器要洁净;2.扎脉时间要短;3.抽血后，排血动作要轻、慢;4.血清分离动作轻受储存条件影响的项目原则：采血后，2h内尽快将血清与细胞分离，并检测完毕。为什么受放置时间影响最大的项目有：增高：TP、ALB、CHO、K+、Na+、AST、ALP、GGT降低：GLU、TBIL、CL-、ALT因为细胞仍然活着，仍进行代谢活动，消耗能量，并产生代谢产物，影响血清成分变化3h:GLU、CO28h：GLU、CO2、TP、K+、AST24h:GLU、CO2、TP、K+、AST、ALB、TBIL、CHO、Na+、CL-、ALT、ALP、GGT二、生化试剂盒商品化试剂盒的广泛应用，对检验医学的发展产生了深远的影响，它不仅使检验操作更简便，而且使试剂生产和检验操作更易标准化和规范化，尤其是有利于提高检验质量二、生化试剂盒化学法酶法方法学免疫法物理性状液体型试剂（自配）冻干型试剂片剂或冻干粉剂液体型试剂（商品）组合方式多剂型试剂单剂型试剂双剂（多剂）试剂操作方式手工多步骤操作离心式自动分析仪分列式多功能分析仪二、生化试剂盒（一）液体型试剂与粉剂型试剂优点缺点液体1.组分均一、瓶间差异小、重复性好;2.无外源水质影响，试剂性能稳定，准确性好保存时间短，不便运输粉剂保存时间较长，便于运输1.重复性差2.准确性差二、生化试剂盒（二）单试剂与双试剂优点缺点单操作简单、快速1.抗干扰能力差2.分析误差较大双1.简便、快速;2.抗干扰能力强，稳定性好;3.分析误差小，准确性高试剂Ⅰ：消耗或清除干扰物试剂Ⅱ：与待测物起反应比如：TG测定，试剂1（含甘油激酶、3-磷酸甘油氧化酶、辣根过氧化物酶、坏血酸氧化酶，但不含脂蛋白脂肪酶），消耗游离甘油。试剂2（含脂蛋白脂肪酶）起动TG反应。比如酶法测定GLU、CHO、UA、HDL等，试剂1含维生素C氧化本科酶，清除维C对Trinder反应的干扰二、生化试剂盒（三）试剂盒质量评价1.线性范围2.酶促反应时间曲线或化学反应速度时间曲线（1）终点法：空白值、反应时间（2）连续监测法：空白、斜率、反应曲线3.稳定性试验三、生化检验项目(一)常规检验项目1.单检验项目实用性：经济、快速可靠性：针对性强2.组合检验项目全面性：提供全面的检验信息高效性：提高检验和诊断效率三、生化检验项目（二）急诊生化检验项目急诊项目：指对临床危急、重症病人的诊断、抢救和治疗有重要指导意义的检验项目。一般要求从“标本采取”到“检验报告”发出控制在2h内。如血气分析、肾功、电解质、心功等常规项目急诊项目危急值检验项目三、生化检验项目（三）特殊项目指标本采集技术高，或标本数量少，或含有传染性病毒或细菌的标本，这些标本中的项目不管是急诊还是常规项目均属于特殊项目四、生化仪器(一)离心机(二)电解质分析仪(三)血气分析仪(四)生化分析仪（一）离心机离心机：利用离心力分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械（一）离心机利用离心机转子高速旋转产生的强大离心力，加快液体中颗粒的沉降速度，把样品不同沉降系数和浮力物质的密度分离开来。微粒移动速度与其大小、形态和密度有关，又与重力场的强度及液体的粘度有关1.按分离因素：常速、高速和超速2.按操作方式：间隙式、连续式（一）离心机注意事项1.离心前要平衡2.离心机套管底部要垫棉花或试管垫3.离心管必须对称放入套管中，防止机身振动4.电动离心机如有噪音或机身振动时，应立即切断电源，即时排除故障5.启动离心机时，应盖上离心机顶盖后6.分离结束后，先关闭离心机，在离心机停止转动后，方可打开离心机盖，取出样品(二)电解质分析仪溶液中被测离子接触电极时，在离子选择电极基质的含水层内发生离子迁移，迁移离子的电荷改变存在电势，使膜面间的电位发生变化，在测量电极与参比电极间产生一个电位差，测量电位差大小可求得待测离子浓度(三)血气分析仪血气分析仪不仅能在几分钟内检测出病人血液中的氧气、二氧化碳等气体的含量和血液酸碱度及相关指标的变化，还能快速反映血液中钾、钠、钙的含量，为危重病人抢救中快速、准确的检测提供了有利的保障。(四)生化分析仪日立7060v:400T/h日立7600v:3200T/h五、室内质量控制1.标本质量控制2.试剂质量控制3.仪器质量控制4.操作过程质量控制（标准化与规范化）5.质量控制标准的建立6.失控原因分析与处理六、实验室信息系统LIS:laboratoryinformationsystem,实验室信息系统，是通过计算机对实验室日常工作、科研管理、学科建设等多个方面所需信息，进行收集、处理、存储和应用的系统HIS：hospitalinformationsystem,医院信息系统六、实验室信息系统七、常用生化分析技术（一）光谱分析技术（二）电泳技术（三）离心技术（四）层析技术（五）电化学分析技术（六）生物芯片技术（一）光谱分析技术定义：利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射光谱谱系的特征，来确定其性质、结构或含量的技术，称之为光谱分析技术。根据光谱谱系特征，可分为发射光谱分析、吸收光谱分析和散射光谱分析三大类（一）光谱分析技术类型优点缺点种类吸收光谱分析1.灵敏度高，达10-5mol/L;2.操作简单、快速，选择性好和应用广泛;1.比色法需有标准品;2.紫外法的吸收池需用石英杯;3.原子吸收法需特定元素的空心阴极灯1.可见光及紫外光分光度法2.原子吸收分光光度法发射光谱分析1.荧光分析法灵敏度高，取样量少，检测范围广，临床应用广泛;1.火焰光度法操作繁杂、干扰因素多，被离子选择性电极法取代;1.火焰光度法2.荧光分析法散射光谱分析操作简单、快速，主要用于免疫球蛋白、载脂蛋白和补体等项目检测1.易受混悬液中微粒的分散度影响;2.混悬液的稳定性较差常用法为免疫比浊法（一）光谱分析技术影响光谱分析的主要因素：1.化学因素：浓度、pH、时间、杂质2.主观因素：操作不当有关3.光学因素：仪器性能有关（二）电泳技术定义：在电场中，带电粒子向所带电荷相反的电板移动的现象称为电泳。根据电泳原理可分为移动界面电泳、区带电泳和稳态电泳等（二）电泳技术类型优点缺点种类