免疫学的室内质量控制课件

血站实验室的室内质控室内质量质控的概念如何进行室内控制如何进行统计学质量控制如何做质控图质控规则的选择血站实验室的室内质控室内质量质控的概念一、室内质量控制的概念由实验室工作人员，采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作的可靠性程度，旨在监测和控制本实验室工作的精密度，提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性，以确定测定结果是否可靠、可否发出报告的一项工作。可概括为:(1)执行者：实验室技术人员；(2)目的：监测实验室测定的重复性；(3)功能：决定了当批测定的有效性，报告可否发出。是对实验室测定的即时性评价。一、室内质量控制的概念由实验室工作人员，采取一定的方法和步骤二、分析前的质量控制2.1人员培训

免疫学实验的基本原理临床意义易出差错的环节及难点熟悉检测试剂性能（包括试剂盒组成，包被片段及其组成）熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数据处理的能力和质量控制知识二、分析前的质量控制2.1人员培训

2.2试剂盒选择有生产批准文号、批批检报告，并贴有防伪标签。从灵敏度，特异性，精密度，稳定性，简便性，安全性及经济性作出全面的评价使用血清考核盘进行检测参考室间质评评价报告中对试剂的评价结果注意高值钩状效应（HOOK）2.2试剂盒选择2.3仪器校验移液器（加样枪）水浴箱（温箱）洗板机酶标仪

全自动加样仪全自动酶免分析系统

2.3仪器校验2.4标本的采集、处理、保存

标本避免溶血。抗凝不完全可造成假阳性。血清置4℃冰箱不应超过5天。如需保存一周以上则要-20℃冰冻保存，融解时应充分混匀，避免产生气泡。避免标本间的污染2.4标本的采集、处理、保存

三、ELISA实验的室内质量控制3.1最佳条件下的变异（OCV）在本实验室最佳条件下（包括操作者、试剂、仪器等）检测质控血清20-30次，测得结果计算，求出该组数据的均值、标准差（SD）和变异系数（CV），表示实验室的最佳工作质量。三、ELISA实验的室内质量控制3.1最佳条件下的变异（O3.2常规条件下已知值质控血清的变异（RCVK）

做常规检验的技术人员，在常规检验的条件下，将质控血清作为常规检测样本，进行20次检验，结果计算同OCV法。

3.2常规条件下已知值质控血清的变异（RCVK）3.3常规条件下未知值质控血清变异(RCVU)的测定测定步骤同RCVK，但检测的操作者不知质控血清的定值，或在操作者不知哪份是质控血清的条件下进行常规检验，以排除操作者的主观性。3.3常规条件下未知值质控血清变异(RCVU)的测定3.4

绘制质控图根据质控品的靶值和控制限绘制Levey-Jennings控制图（每张图一个浓度水平），将选择的质控规则应用于质控数据，判断每一分析批是在控还是失控。3.4绘制质控图

3.5质控规则的功能

简单地说就是用于判断测定批的失控还是在控。失控信号的出现受多种因素的影响，包括操作上的失误、试剂、校准物、质控品的失效，仪器维护不良以及采用的质控规则、控制限范围、一次测定的质控标本数等等。排除假失控。3.5质控规则的功能3.6质控规则的表达方式通常质控规则以符号AL来表示，其中A为质控测定中超出质量控制限的测定值的个数，L为控制限，通常用均值或均值±1～3SD来表示。当质控测定值超出控制限L时，即可将该批测定判为失控。常用的13S质控规则，其中1为原式中的A，3s为原式中的L，表示均值±3s，其确切的含义为：在质控测定值中，如果有一个测定值超出均值±3s范围，即可将该批测定判为失控。

3.6质控规则的表达方式常用质控规则的符号及定义符号定义12S

一个质控测定值超出±2s控制限。13S

一个质控测定值超出±3s控制限。22S

两个连续的质控测定值同时超出+2s或-2s控制限。R4S

同一批测定中，两个不同浓度质控物的测定值之间的差值超出4s控制限。41S

四个连续的质控测定值同时超出+1s或－1s控制限。7T

七个连续的质控测定值呈现一个向上或向下的趋势变化。10X

十个连续的质控测定值同时处于均值的同一侧。常用质控规则的符号及定义四、“即刻法”质控“即刻法”质控方法是在对同一批外部质控血清连续测定3次后，即可对第3次检验结果进行质控。具体计算方法如下：四、“即刻法”质控“即刻法”质控方法是在对同一批外部质控血清4.1将质控血清的测定值从小到大排列：x1，x2，x3……xn(x1为最小值，xn为最大值)4.2计算

X

和

S。4.1将质控血清的测定值从小到大排列：x1，x2，x3……4.3计算SI上限值和SI下限值SI下限=

X

-X最小值

SSI上限=

X最大值-

X4.3计算SI上限值和SI下限值SI下限=X-4.4将SI上限、SI下限与SI值表中的数字比较SI值表nn3sn2snn3sn2s31.161.15122.552.2941.491.46132.612.3351.751.67142.662.3761.941.82152.712.4172.101.94162.752.4482.222.03172.792.4792.322.11182.822.50102.412.18192.852.53112.482.23202.882.564.4将SI上限、SI下限与SI值表中的数字比（1）当SI上限和SI下限<n2s时表示处于控制范围内，可以继续测定。继续重复以上各项计算。（2）当SI上限和SI下限有一值处于n2s~n3s值之间时说明该值在2s3s范围，处于“告警”状态。（3）当SI上限和SI下限有一值>n3s值时说明该值已在3s范围之外，属“失控”。数值处于“告警”和“失控”状态应舍去，需重新测定该质控血清和病人样品。舍去的只是失控的这次数值，其它测定值仍可继续使用。

（1）当SI上限和SI下限<n2s时表示处于控制范围内，可以4.5当检测的数值超过20次以后，可以转入常规的质控图的质控。将前20次的数值求出的和SD作质控框架图，第21次的数值，依次点入即可。4.6室内质控数据的管理每月室内质控数据统计处理每月室内质控数据的保存室内质控数据的周期性评价

4.5当检测的数值超过20次以后，可以转入常规的质控图的质五、影响ELISA实验的常见原因5.1试剂准备操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。5.2加样:血清或血浆标本分离不好即进行加样手工操作中，加样过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)；加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。样品、稀释液、酶结合物、显色剂应加在微孔底部。五、影响ELISA实验的常见原因5.1试剂准备操作前将5.3孵育温度过高或过低，孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底；孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底5.4洗板采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差。反应板过多造成洗板等待时间长5.3孵育5.5显色显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；加显色剂时溅出孔外造成液体回流。

A、B液应避免接触金属器械。5.6读板读板时板底不清洁。

5.5