食品中铁的测定实验报告

食品中铁的测定（邻菲罗啉比色法）1目的熟练掌握直接灰化法的原理，操作及注意事项。以铁的测定为代表，掌握灰化法作为矿物质测定的前处理方法的应用；掌握消化法的原理，操作及注意事项。以铁的测定为代表，掌握消化法作为矿物质测定的前处理方法的应用；掌握邻菲罗啉比色法测铁的原理、操作及注意事项。2原理2.1灰化食品经高温灼烧至恒重，残留物称重称为灰分；2.2消化样品与浓硫酸和催化剂一同加热，可使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化成二氧化碳和水逸出，食品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵；2.3比色法测铁样品经灰化（或消化），用抗坏血酸将三价铁还原为二价铁，二价铁与邻菲罗啉反应生成红色络合物，在520nm下测其光吸收强度A，根据A值在标准曲线上查对应二价铁浓度得C标准曲线上查对应二价铁浓度得C试剂再计算样品中铁的含量。硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸、邻菲罗啉、铁标准溶液（C=10ug/mL）。4仪器4.1灰化：瓷坩埚、灰化炉、干燥器、精密天平；4.2消化：定氮瓶、铁架台、电炉；4.3比色法测铁：水浴锅、可见光分光光度计、25mL比色管。5样品学生营养奶粉6操作方法6.1样品的灰化处理及样品中灰分的测定6.1.1恒重处理取大小适宜的两个瓷坩蜗（标号1、2）置于高温炉中，在600°C下灼烧0.5h，冷却至200C以下后，取出，放入干燥器中冷却置室温，精密称量，并重复灼烧至恒重。6.1.2样品称量分别向1、2号瓷坩蜗中加入奶粉5.0001g和5.0000g后，精密称量。6.1.3预灰化把两个坩蜗置于电炉上，半盖坩蜗盖，以小火加热至样品充分炭化无黑烟产生，取下坩蜗，各加入两滴hno3溶液。6.1.4正式灰化炭化后，把两个坩蜗放置在600°C高温炉中灼烧至无炭粒，打开炉门，将坩蜗移至炉口处冷却至200C左右，放入干燥器中冷却至室温，称量。重复灼烧至前后两次称量之差不超过0.5mg为恒重。6.1.5制备灰化液分别向1、2号坩蜗中加入盐酸2mL溶解，并移入100mL容量瓶中，用少量水洗坩蜗，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀，制成1、2号灰化液备用。6.1.6制备空白液向100mL容量瓶中加入2mL盐酸，以水定容至刻度。6.2样品的消化处理6.2.1制备消化液称取5.1300g奶粉移入干燥的100mL定氮瓶中，加入0.2g硫酸铜，2g硫酸钾及20mL浓硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜放于加有石棉网的电炉上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全消失后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，在继续加热0.5h.取下放冷，慢慢加入20mL水。放冷后，移入100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀，制成消化液备用。6.2.2制备空白液向100mL容量瓶中加入20mL蒸馏水，以水定容至刻度。6.3比色法测铁6.3.1铁标准曲线的绘制分别吸取铁标准溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml放入比色管中，加入1ml抗坏血酸和2ml邻菲罗啉，并定容至25mL，混匀，然后60C水浴下加热15min后，冷却。以“0管溶液为参比溶液，在520nm下测各管A值并绘制曲线。6.3.2灰化液中铁含量的测定分别从1、2号各吸取3个10.00mL灰化液和1个10.00mL空白液于比色管中，加入1mL抗坏血酸和2mL邻菲罗啉，并定容至25mL，混匀，然后60C水浴下加热15min后，冷却。参比溶液：吸取10.00mL灰化液于比色管中，加入1mL抗坏血酸，不加邻菲罗啉，并定容至25mL，混匀，然后60C水浴下加热15min后，冷

却。2'灰3'将比色管中的有色溶液依次注入比色皿中，在520nm下测各管的吸光度。1号记为：A灰1A灰2A灰3A灰空；2号记为A灰1'A灰2'A灰3,2'灰3'。空'6.3.3消化液中铁含量的测定吸取3个10.00mL消化液及1个10.00mL空白液于比色管中，加入1mL抗坏血酸和2mL邻菲罗琳，并定容至25mL，混匀，然后60°C水浴下加热15min后，冷却。参比溶液：吸取10.00mL消化液于比色管中，加入1mL抗坏血酸，不加邻菲罗琳，并定容至25mL，混匀，然后60C水浴下加热15min后，冷却。将各比色管中的有色溶液依次注入比色皿中，在520nm下测各管溶液的吸光度值A]A点AfA。7数据整理消消消消空7.1样品中灰分的测定表1-灰化样品及坩埚质量m样（g）m坩埚恒重前（g）m坩埚恒重后（g）m坩锅七样品愆）5.047992.465193.388198.43607.2比色法测铁7.2.1铁标准曲线的绘制表2-铁标准溶液曲线绘制测定数据表V(ml)0.002.004.006.008.0010.00A0.0000.1530.3230.4750.6550.790铁标准溶液体积（ml）0.900铁标准溶液体积（ml）0.8000.7000.6000.5000.4000.3000.2000.1000.000(0.100)图1-铁标准溶液曲线

表3-灰化液铁的吸光度值A空白A 样品 1组 2组 3组-0.0010.234 0.259 0.2568计算A空白A8计算A空白A样品1组2组3组1组2组3组0.0080.0030.0090.0300.0480.036表4-消化液铁的吸光度值8.1消化计算X=X10-3X=X10-3X100m样/V定XV测式中：X----样品中铁的含量，mg/100g；C样----测定用液中铁的浓度（由标准曲线中查出），四g/mL；m样 样品的质量，g;V测——测定用液的体积，mL。消除试剂误差得三个吸光度值为0.0233、0.0414、0.0293代入铁的标准曲线方程y=0.0801x-0.0012中，得X]=0.306、x2=0.531、x3=0.381。xx100=3.06X消mg/100g0.306x10x10-31.0005/100x10xx100=5.31X消2mg/100g0.531x10x10-31.0005/100x10X消3mg/100g0.381x10x10-31.0005/100x10x100=3.81X铁平均(消化)mg/I00g=l/3(3.06+5.31+3.81)=4.068.2灰分含量计算X100X%=X100式中：X----样品中灰分的含量，%；m埚 坩蜗的质量，g;m总-----坩蜗和样品的质量，g；m：--坩蜗和灰分的质量，g。98.4360-96.4168X灰分=98.4360-93.3881 仙诙.00%8.3中铁含量计算X1%=58.96x10-35/100X1%=58.96x10-35/100x10x100=7.79X2%=65.22x10-35/100x10x100=9.04X3%=64.46x10-35/100x10x100=8.47X铁平均(灰化=(7.79+9.04+8.79)/3=8.549结果’样品中铁含量为4.64mg/100g。铁中灰分含量为40.00%，灰化的样品中铁含量为8.54%10结果可靠性分析10.1准确度从营养奶粉包装上查得真值在6-10mg/100g,灰化处理的准确度高，消化处理的准确度低。10.2精密度消化的相对标准偏差为28.2%，灰化的相对标准偏差为7.5%。灰化精确度较高，消化精确度过低。10.2.3误差分析灰化处理的样品准确度、精密度高，主要属于随机误差；消化处理的样品误差大，是负误差，也是系统误差。样品中铁含量为4.64mg/100g。铁中灰分含量为40.00%，灰化的样品中铁含量为8.54%灰化处理的准确度、精密度较消化处理高。消化处理误差为负的系统误差。12思考题12.1灰化的目的？防止因温度高试样中的水分急剧蒸发，使试样飞扬；防止糖蛋白质等发泡膨胀的物质在高温下膨胀而溢出坩蜗，不经碳化而直接灰化，碳粒易被包住灰化不完全。12.2本试验用于提高灰化速度的方法？除此之外还有那些方法？本试验中是通过加过氧化剂或强氧化剂的方法，加的是浓硝酸，利用他们的氧化作用来加速碳化。还可以通过，加去离子水，加硫酸灰化，加入砂分散样品，还