医用化学实验-医用化学课件

医用化学实验2020年10月2日1实验课注意事项：不迟到，不早退，做好课前预习工作穿好白大褂使用煤气时注意安全试剂用后及时归位保持严肃认真的实验态度及时记录实验结果，按时完成实验报告2020年10月2日2实验报告格式：1、实验目的2、实验原理3、实验操作4、实验结果（真实、客观）5、讨论（实验报告的核心）6、意见与建议（可选择）2020年10月2日3实验一医化实验基本操作玻璃仪器的洗涤吸量管的使用

注意：右手食指按住吸量管口溶液的混匀指弹混匀、搅拌混匀、倒转混匀、旋涡混合器混匀等2020年10月2日4实验二电离平衡与缓冲溶液实验目的1、掌握同离子效应的原理2、学习通过韩-哈方程式配制缓冲溶液3、观察稀释对缓冲溶液pH值的影响4、学习吸量管及pH计的使用

2020年10月2日51、同离子效应实验原理HAcH++Ac-NaAcNa++

Ac-例：同离子效应使得HAc的电离度降低，溶液的pH升高2020年10月2日6酸碱指示剂：红橙黄红淡红黄无色绿蓝3.14.481067.6甲基橙酚酞溴麝香草酚蓝2020年10月2日7pH=pKa+lg[盐][酸]韩-哈方程式也可表示为：（盐的摩尔数）（酸的摩尔数）n盐/V溶液n酸/V溶液当酸与盐混合前的浓度相等时：=pKa+lg

V盐

V酸pH=pKa+lg

n盐

n酸pH2、缓冲溶液2020年10月2日8缓冲溶液加水稀释时，盐浓度与酸浓度作相同比例稀释，因此，缓冲溶液的pH几乎不因稀释而改变。缓冲溶液的缓冲能力有一定限度，超过该限度缓冲溶液的pH也会发生较大改变2020年10月2日9实验操作1、同离子效应（1）各1支+NH3.H2O

2ml+

1滴酚酞1滴NH4Cl1滴H2O摇匀观察结果1ml=15滴（2）

各1支+醋酸

2ml+

1滴甲基橙1滴NaAc1滴H2O摇匀观察结果2020年10月2日102、缓冲溶液（1）0.1mol/LKH2PO40.1mol/LNa2HPO48ml2ml5ml5ml2ml8ml精密pH试纸检测pH计检测韩-哈方程式计算测完pH值后2管保留用吸量管进行操作大试管3支2020年10月2日11另取2支小试管，以上面试管2里的缓冲液进行实验2号缓冲液2ml1ml蒸馏水0ml1ml溴麝香草酚蓝各1滴（2）2020年10月2日12（3）另取3支小试管，以上面试管2里的缓冲液进行实验2号缓冲液2ml2ml2ml溴麝香草酚蓝各2滴，混匀NaOH3滴，摇匀，观察结果继续滴加，记录变色时所加NaOH滴数HCl3滴，摇匀，观察结果继续滴加，记录变色时所加HCl滴数2020年10月2日132号管缓冲液测好pH后切勿立即倒去吸量管的使用pH计的使用注意事项：2020年10月2日141、看清刻度，选择适当容量的吸量管2、左手洗耳球，右手吸量管；食指按住管口，稳住液面3、拿吸量管的时候，刻度面向自己4、读刻度时，眼睛与刻度线同一水平，以下凹面为准5、吸取另外一种试剂时，要润洗

吸量管的使用2020年10月2日15实验三功能基反应实验目的1、掌握几功能基的主要化学性质2、了解乙酰乙酸乙酯的酮-烯醇互变异构现象2020年10月2日161、双键与卤素的加成反应实验原理C=C+Br2-CH-CH-

BrBr红棕色的溴褪色，可用于鉴定有机物中是否存在不饱和键2020年10月2日172、酚性羟基的反应（1）苯酚的弱酸性（2）酚性羟基与FeCl3的显色反应苯酚FeCl3紫色络合物可用于鉴别酚和醇2020年10月2日183、醛基的反应

O||R-C-H+2Cu（OH）2

O||R-C-OH+Cu2O↓+2H2O砖红色沉淀（班氏试剂）酮无此反应，故可用于鉴别醛和酮2020年10月2日192020年10月2日204、乙酰乙酸乙酯的酮-烯醇互变异构现象使三氯化铁溶液呈紫红色反应——具有烯醇式结构与苯肼反应生成苯腙，颜色？使红棕色溴的四氯化碳溶液褪色——具有双键结构

OO||||CH3-C-CH2-C-O-C2H52020年10月2日21说明乙酰乙酸乙酯是酮式和烯醇式两种异构体的混合物，两者之间相互转变，处于动态平衡。

OO

||||CH3-C-CH2-C-O-C2H5

OHO

|||CH3-C=CH-C-O-C2H5室温时酮型（93%）烯醇型（7%）凡两种或两种以上的异构体能互相转变，并以动态平衡存在的现象——互变异构现象2020年10月2日225、尿素的化学性质OH-紫红色物质缩二脲反应：缩二脲+CuSO4（少量）2020年10月2日231、烯基的反应实验操作+硬脂酸10滴+油酸10滴+植物油10滴逐滴加入5%Br2的CCl4溶液，不断振荡试管，记录结果

不是溴水2020年10月2日242、酚性羟基的反应（1）+液体苯酚2滴水5滴，摇匀+10%NaOH2滴摇匀，观察（2）+0.5%苯酚溶液10滴+0.5%水杨酸溶液10滴+苯甲醇10滴各加入1%FeCl31滴，观察结果2020年10月2日253、醛基反应（大试管6支）试剂（滴）12345640%乙醛液5—————10%NaOH5—————丙酮液—4

————1%葡萄糖—

—4———1%果糖———4——1%蔗糖————442mol/L盐酸—————10班氏试剂1010101010—1-5管于沸水中加热3分钟，观察结果；6号管加蒸馏水10滴，于沸水中加热10分钟，不时振荡，再加10%NaOH10滴，班氏试剂10滴混匀，于沸水中再加热3分钟，与5号管比较，记录结果2020年10月2日264、乙酰乙酸乙酯的酮-烯醇互变异构现象（1）+10%乙酰乙酸乙酯2滴+2，4-二硝基苯肼10滴，振荡，观察结果，写出反应式（2）+10%乙酰乙酸乙酯10滴+1%FeCl31滴，观察结果再加溴水1滴，观察变化，并加以解释2020年10月2日275、尿素的化学性质+尿素1匙小火加热，待尿素熔化红色石蕊试纸放置管口，观察变化继续加热待管内物质凝固后冷却试管，加水2ml玻棒搅动促溶，吸取上层溶液于另一试管中再加入10%NaOH、1%CuSO4各1滴，观察变化2020年10月2日28注意事项1、注意区分以下试剂：液体苯酚——5%苯酚溶液5%Br2的CCl4溶液——溴水2、液体苯酚预先加热，盛放其的试管也要预热3、缩二脲反应中试管冷却后再加水，并用玻棒轻轻搅动

4、挥发性试剂全部摆放在边台上，用后及时归位2020年10月2日29实验三动物组织中核酸的提取与鉴定实验目的：1、掌握组织中的核酸的提取与鉴定2、掌握离心机的使用3、熟悉加样器的使用2020年10月2日30实验原理

1、提取原理：a:DNA和RNA大部分与Pro结合成核蛋白。

b:核蛋白可被三氯醋酸沉淀下来。c:10%NaCl溶液从沉淀中提取核酸，生成核酸的钠盐d:乙醇把核酸钠沉淀下来2020年10月2日31

核苷→（B-R）磷酸（P）2、鉴定原理核酸→核苷酸→

基碱（B）戊糖（R）核酸的基本组成单位嘌呤（AG）嘧啶核糖（CU）脱氧核糖（CT）2020年10月2日32a:磷酸+钼酸铵磷钼酸钼蓝b:嘌呤+AgNO3

絮状嘌呤银c:核糖糠醛绿色化合物d:脱氧核糖ω-羟基-γ-酮基戊醛

蓝色化合物氨基萘酚磺酸H+3，5-二羟基甲苯H+二苯铵2020年10月2日33操作步骤1、提取步骤制备肝组织匀浆：脱臼处死或断头处死剖腹取全部肝组织生理盐水冲洗血污，吸干净三氯醋酸2ml

分散匀浆机匀浆2020年10月2日34分离提取于全部匀浆内加入生理盐水2ml，玻棒混匀静置3min，3000rpm3min,弃上清沉淀加入10%NaCl2ml，沸水浴3min,玻棒搅拌取出冷却，3000rpm3min取上清，逐滴95%酒精2管，混匀静置5min，3000rpm5min弃上清，得白色核酸钠2020年10月2日35核酸的水解：短试管内加入5%H2SO43.5ml玻棒搅匀

沸水浴中10min2020年10月2日36成分的鉴定管号水解液5%H2SO4浓氨水5%AgNO3测定管20d—2~3d10d对照管—20d2~3d10d沸水浴3~5min，观察结果，静置15min,观察结果嘌呤的鉴定2020年10月2日37磷酸的鉴定管号水解液5%H2SO4钼酸铵试剂氨基萘酚磺酸测定管10d—5d20d对照管—10d5d20d放置3min，沸水浴3~5min，观察颜色差异2020年10月2日38核糖的鉴定管号水解液5%H2SO43，5-二羟基甲苯测定管4d—6d对照管—4d6d沸水浴5~10min，观察颜色差异2020年10月2日39脱氧核糖的鉴定管号水解液5%H2SO4二苯胺试剂测定管20d—30d对照管—20d30d沸水浴5~10min，观察颜色差异2020年10月2日40注意事项1、做鉴定部分时尽量用大试管，所有标号朝试管上方2、玻璃棒搅拌要轻柔3、胶头滴管使用要注意顺序，避免污染2020年10月2日41移液枪的使用1、看清最大刻度，选择适当容量的移液枪（最大刻度和读数的关系）2、先调好刻度3、打至第一档吸入试剂4、打出试剂时要按至第二档5、使用加样器时要慢、稳，不要有气泡出现2020年10月2日42离心机的使用

台秤平衡对称插入定时定速2020年10月2日43实验四蛋白质呈色反应、沉淀反应及等电点的测定实验目的：1、掌握双缩脲法、茚三酮法、Folin法定性检查蛋白质的方法2、验证几种蛋白质沉淀反应的现象及酸碱性环境的影响3、了解蛋白质等电点测定2020年10月2日44一、蛋白质的呈色反应实验原理：

双缩脲反应：含有—CO—NH—、—CS—NH—、—CH2—NH—等基团的化合物在浓碱液中与硫酸铜生成紫红色复合物。茚三酮反应：含有自由氨基的化合物与茚三酮共热，生成紫色化合物。Folin法：酚性羟基在碱性环境中，与酚试剂生成钼蓝2020年10月2日45操作步骤（1）+1：10鸡蛋白2滴1%CuSO41滴

+10%NaOH5滴混匀，观察颜色（2）+1：10鸡蛋白4滴+蒸馏水10滴+0.1%茚三酮乙醇8滴，混匀，观察颜色

蒸馏水6滴+10%NaOH3滴，酚试剂1滴，混匀，观察颜色+1：