《药理学》药理学实验与设计-课件

药理学实验与设计1ppt课件是科学研究的计划；是研究方法与步骤的一项非常重要的内容；是实验研究所涉及各项基本问题的合理安排；是研究工作顺利进行的保证，也就最大限度地减少实验误差，以获得精确可靠实验结论的保证。

实验设计的重要性和必要性2ppt课件一、实验设计的基本要素二、实验设计的基本原则三、实验设计的步骤与内容3ppt课件

一、实验设计的基本要素处理因素实验对象实验效应无论是新药的研制，还是药物的药效学研究或毒理学研究，其药理学实验设计都包括最基本的三大要素。4ppt课件

实验中根据研究目的确而定的，由实验者人为施加给受试对象的因素称处理因素，如给病用药物、给病人实行某种手术等。

处理因素5ppt课件(1)处理因素的强度强度亦称水平，对药物来说是指药物的剂量大小。

处理因素及其水平可以是一个或多个，它们的组合包括：单因素单水平单因素多水平多因素单水平多因素多水平在设置处理因素时应注意以下几个问题6ppt课件①单因素单水平设计是指给予一种处理因素，观察一种药物处理前后的变化。如一种药物，一个剂量对血压的作用。单因素：普萘洛尔或硝苯地平单水平：一个剂量或一个指标单因素设计实验简单，效率低。7ppt课件②单因素多水平设计单因素：一种药物多水平：多个剂量或多个指标如一种药物，三个剂量对庆大霉素肾毒性的影响，指标包括尿蛋白、Cr、BUN、肾组织形态的影响。

单因素多水平设计效率高，使用广泛。8ppt课件③多因素单水平设计多因素：几种药物单水平：一种模型

几种药物对四氯化碳肝毒性的影响包括GPT、GOT、肝组织形态的影响。多因素单水平设计效率高，但复杂，主要用药物筛选。9ppt课件④多因素多水平设计观察几种药物对几个指标的影响；或几种药物对几种模型的作用比较。

多因素：普萘洛尔、硝苯地平、卡托普利多水平：血压、心率、心收缩力的影响或者

多因素：普萘洛尔、硝苯地平、卡托普利多水平：肝、肾、脑损伤的影响多因素多水平设计效率高，复杂。10ppt课件(2)明确非处理因素非处理因素虽然不是我们的研究因素，是干扰实验结果的因素，产生混杂效应，所以这些非处理因素又称混杂因素。如年龄、休重、性别的影响若两组年龄、休重、性别构成不同，则可能影响结果比较。11ppt课件(3)处理因素的标准化

处理因素在整个实验过程中应做到标准化，即保持不变，否则会影响实验结果的评价。如实验设计中处理因素是药物，则药物的剂型、给药途径、质量(成分、出厂批号等)必须保持不变。12ppt课件

实验对象实验对象的选择十分重要，对实验结果有着极为重要的影响。实验对象包括：整体动物：正常动物，麻醉动物，病理模型；离体器官：子宫、心脏、小肠、血管条、气管条、肛尾肌等；组织及细胞：肝细胞、心肌细胞、系膜细胞、肿瘤细胞等。13ppt课件动物种属的选择在药理实验中，选用的动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猫、狗和猴等哺乳动物。其中小鼠和大鼠应用广泛，它们具有种系清楚，容易获得，易于管理，大量供应等优点。这些动物除可整体应用外，也可取其离体器官、组织或细胞进行不同实验水平的研究。

14ppt课件在药理研究中，实验动物的种属、品系及性别的不同时，其对药物的反应性就有质和量的差别。因此，动物的种属、品系、性别、体重、生长、发育和内分泌等状况对药理学研究起重要作用。在实验中，应选择合格的并符合实验要求的动物对药理学研究具有的重意义。

15ppt课件⑴所选的动物必须健康，要求SPF级动物。⑵对呕吐敏感的动物：鸽子、猫、狗；

小鼠、大鼠、豚鼠、家兔对呕吐反应不敏感。⑶抗高血压的药物：应选择家兔。心肌缺血药：宜选用狗、猫、兔和大鼠。⑷抗凝血药：选择家兔和大鼠，雄性为好，避免动物发情周期性的影响。

16ppt课件⑸呼吸系统药物

镇咳药：首选豚鼠，因为豚鼠对化学剌激和机械剌激都敏感，易引起咳嗽；

祛痰药：宜选用雄性小鼠、兔、猫，易于观察呼吸道分泌及纤毛运动。⑹泌尿系统药：选用雄性大鼠或狗，因尿量较多，易于收集。⑺消化系统药：宜用大鼠或狗。17ppt课件所选动物的体重、年龄和性别应该是合适的，一般实验常用成年动物小鼠18-25g

大鼠180-280g

兔2-3kg

观察药物对生长、发育、内分泌等系统的用，应选择幼年动物。18ppt课件观察药物的抗衰老作用，应选择老年动物或衰老过快的专用模型动物。对性别不作要求的实验，常采用雌雄各半或雄性动物。19ppt课件

实验效应（指标）

指标分类及统计方法

计数指标（定性指标）如惊厥或不惊厥、死亡或存活等。用2方检验。计量指标（定量指标）如血压值、酶活性单位、时间等。用t-检验、配对检验等。20ppt课件指标的选定需符合以下原则(1)特异性能反映某一特定现象且不与其他现象相混。肝功能的金指标：AST、ALT

肾功能的金指标：BUN、Cr

高血压病的特异指标：血压(尤其是舒张压)21ppt课件(2)客观性易于量化、经仪器测量而获得的指标如心电图、血常规分析、生化检测等化验室的检查结果；病理学的诊断意见；菌学培养结果等。22ppt课件(3)重复性即在相同条件下，指标应可以重复，并重复的差异应很小。GPT

98单位，100单位。

影响重复性的因素

①动物：品种、体重、年令、性别、饲养条件②药物：批号、纯度、剂量、注射容量、速度③仪器：灵敏度、精确度、电压稳定性④其它：室温、气压、季节、上、下午时间

条件控制越严格，重复性越高23ppt课件(4)灵敏性根据实验要可相应显示出微小的变化。如肝功能指标：GPT98单位，100单位它是由实验方法和仪器的灵敏度共同决定的。如果灵敏性差，对已经发生的变化不能及时检测出来，或常常得到假阴性结果，这种指标应该放弃。24ppt课件(5)可行性

指标既有文献依据符合本实验室条件符合研究者实际水平

25ppt课件选择指标时，还应注意以下关系及特点

①计量指标优于计数指标②动态指标优于静态指标，把静态指标变为动态指标如体温、疗效、体内激素水平变化等，可按时、日、年龄等作动态观察③所选指标要便于统计分析。

26ppt课件二、实验设计的基本原则

对照原则随机原则重复原则为了提高研究效率，控制误差，药理学实验设计必须遵循三大基本原则。

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对照原则对照是比较的前提。为消除无关因素对实验结果的影响，实验中必须设立对照组。对照应符合齐同可比原则①实验动物要求种属、性别、年龄相同，体重相近；②实验的季节、时间和实验室的温度、湿度也要一致；③操作的手法前后要相同。28ppt课件根据实验研究的目的和要求不同，可选用不同的对照形式，常用的对照形式有(1)空白对照(正常对照)是指在不加任何处理条件下进行观察的对照。29ppt课件(2)阴性对照

(假手术对照或假处理对照)常用于脏器再灌注损伤实验与实验组同样麻醉、注射、切口、暴露、分离等但不用药或不进行关键性处理。阴性对照不做任何处理模型组切断迷走神经对胃酸分泌的影响，阴性对照只是分离迷走神经，不做切断。30ppt课件(3)标准对照(阳性对照)如用已知的经典的药物在标准条件下与实验药物进行的对照。目的：验证实验方法是否可靠；受试药与经典药进行效价强度的比较，提高可比标准，比较了解新药的疗效、特点及副作用。31ppt课件(4)自身对照是指用同体实验实验前后的结果的比较例如血压用药前、后的对比这种对照可减少个体差异32ppt课件(5)组间对照(相互对照)是指实验中设立若干实验组，进行组间对照。例如受试药设立若干剂量组进行组间比较，以研究受试药的量效关系。一般至少3个(小、中、大)剂量组。

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常见动物分组(1)正常对照组(2)模型对照组(3)受试药小剂量组(4)受试药中剂量组(5)受试药大剂量组(6)阳性药对照组34ppt课件

随机原则随机分组的目的：使各组间不受主观因素的影响方法：编号抽签或随机数字表法。目前主张“均衡下的随机”即先将主要因素（体重，性别等）均衡归类分档，再将难控制的因素（活泼程度、饥饱程度、疲劳程度、性周期……）随机安排。

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重复原则重复是指实验中受试对象的例数或实验次数要达到一定的数量。一般而言，计量资料的样本数每组不少于5例，以10–20例为好。计数资料的样本数则需每组不少于10例，以30例为好。动物实验每组所需的样本数动物计量资料计数资料小(小鼠、大鼠、蛙)≥10≥30中(兔、豚鼠)≥6≥20大(犬、猫)≥5≥1036ppt课件三、实验设计的步骤与内容37ppt课件

实验设计内容应包括以下几项：

(1)选择实验对象；

(2)确定样本例数及分组方法；

(3)确定给药途径、给药剂量和观察时间；

(4)确定观察指标及测定方法；

(5)拟定数据统计分析方法。

确定选题和提出立题依据查阅文献

明确实验目的，设计实验方法和实验步骤包括科学意义和前景，国内外研究慨况、水平和发展趋势，学术思想，立论依据，特色或创新之处。38ppt课件实验的目的在于检查各项准备工作是否完备，实验方法和步骤是否切实可行，测试指标是否稳定可靠。根据预试结果，调整或修改设计方案，并确定正式进行实验的条件。进行预实验收集、整理实验资料并进行统计分析，最后总结和完成论文。正式实验

论文答辩

开题报告39ppt课件本科生药理实验设计报告(查新)1.实验题目

2.实验目的及意义

3.药品与试剂

4.仪器

5.实验动物

6.实验方法(分组及处理)

7.统计学处理40ppt课件研究生药理实验设计一、文献检索与选题⊙文献检索研究课题的主要来源之一，从文献检索中确定研究的课题。⊙有研究目标的思路再进行文献检索，从文献检索中确定研究的课题。41ppt课件▲寻找科学领域的空白点在查阅文献时如发现了空白点，应立即对这方面的历史和现状作全面了解，证明确实是空白点，即可作为选题。▲通过文献启发选题在文献基础上提出新见解、新论点，这种选题来源是文献研究的重要方法之一，也是文献综述、文献阅读的价值所在。▲文献矛盾中选题在科研选题上，可根据学术上争鸣的焦点进行选题，通过论证提出自己的观点与看法。查阅文献时应注意问题42ppt课件二、选题的基本原则▲科学性：是指选题应建立在前人的科学理论和实验研究基础之上，应符合科学规律，而不是毫无根据的胡思乱想。▲创新性：是指选题具有自己的独到之处，或提出新规律、新见解、新技术、新方法，或是对旧的规律、技术、方法有所修改、补充。▲可行性：是指选题切合研究者的学术水平、技术水平和实验室条件，使实验能够顺利实施。43ppt课件三、选题的基本程序1.初始意念发现问题并提出问题，形成一个初始的意念。2.查阅文献使意念更系统、更深刻，形成科学假说。3.立出题目将科学假说加以概括，即可形成科研题目。4.陈述问题包括立题依据、选题意义、实验方法和技术路线以及预期结果。44ppt课件

X药对急性肾功能衰竭作用的影响一、目的及意义通过制备急性肾功能衰竭的实验动物模型，以及选择有效的观察指标，证实A药在急性肾功能衰竭的治疗作用。二、药品与试剂

X药，庆大霉素注射液，尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)试剂盒。三、仪器低速离心机，分光光度计。四、动物雄性Wistar大鼠。

范例45ppt课件五、动物分组取健康雄性Wistar大鼠60只，体重250~300g，随机分成6组，每组10只。对照组，模型组

X药小剂量组中剂量组大剂量组维拉帕米阳性对照组。46ppt课件六、给药方法及处理各组大鼠腹腔注射庆大霉素140mg/kg，连续7日。于注射庆大霉素的同时，分别经口灌胃(ig)给予小、中、大剂量组X药和维拉帕米组ig15mg/kg，模型对照组ig等容量生理盐水。于末次注射庆大霉素后断头处死动物，取血制备血清，测定血清BUN和Cr；剖腹取肾，经10%甲醛固定后，常规制片，进行组织学检查。七、数据处理血清BUN、Cr采用组间t检验。47ppt课件

学生：宁乐平杨娜梁纯子宋贵波武汉大学基础医学院2003级14班指导老师：黎七雄

槟榔水提取液对小鼠抑郁模型的影响48ppt课件一、立题依据二、研究内容三、实验材料四、实验方法五、统计学处理六、可行性分析49ppt课件一、立题依据

抑郁症属于情感障碍性疾病,其发病率逐年增加,自杀率逐年升高，对人类的健康和生命已构成威胁,并引起了人们广泛的重视。

目前临床对抑郁的治疗主要靠西药,虽然有一定效果,但均有不同程度的副作用和依赖性,有的甚至还很严重,反而使病人加重抑郁状态。因此，寻找和开发无毒副作用和无依赖性的天然中草药是当前一项重要课题。最理想的方法是食疗。50ppt课件槟榔51ppt课件槟榔为棕榈科植物槟榔(ArecaCatechuL.)的干燥成熟种子,含生物碱0.3%～0.6%,以槟榔碱为主(0.1%～0.5%)

。52ppt课件槟榔嚼块(betelquid)是目前仅次于烟草、酒精和咖啡因，世界上第四位广泛使用的嗜好品。据估计,全世界约有600万名嗜嚼槟榔者。在东南亚、非洲东部、我国的台湾、海南、湖南等地区非常流行。

53ppt课件二、研究内容观察槟榔对悬尾应激、小鼠强迫游泳以及利血平引起小鼠抑郁模型的影响→→→探索槟榔的抗抑郁作用54ppt课件三、实验材料一.药品1.槟榔（由中南医院中药房提供），先用3倍的蒸馏水泡30min,在恒温电炉上煎2次,每次30min,然后将煎液过滤,制成100%(含生药1g/ml)的水煎液,4℃保存备用。2.米帕明3.利血平55ppt课件二.实验动物雄性昆明种小鼠80只，体重20-25克，由武汉大学医学院实验动物中心提供三.实验材料连有二导记录仪的张力换能器和电脑2000ml烧杯（高20cm,直径14cm），灌胃注射器。56ppt课件四、研究方法1.小鼠悬尾应激不动时间的模型实验动物分组及给药方法对照组、米帕明50mg/kg组、槟榔5g/kg、槟榔10g/kg。槟榔5、10g/kg两给药组及米帕明50mg/kg组每日ig一次，连续给药5d，给药体积10ml/kg,对照组给予等体积蒸馏水。57ppt课件58ppt课件小鼠悬尾应激模型末次给药后30min,将其尾部2cm处用橡皮膏贴于丝线一端，另一端与连有二导记录仪的张力换能器相连，倒挂于铁架台上，小鼠头部离台面约5cm，室温保持恒定(25±1)℃。悬挂时间为6min，在二道生理记录仪上记录小鼠后4min的累计不动时间。59ppt课件小鼠行为挣扎→→绝望(抑郁)→→不动(间断性)

不动时间∝小鼠抑郁程度60ppt课件2.小鼠强迫游泳不动时间模型的影响对照组,给药组(小、中、大剂量组）末次给药30min后,放入水缸(2000ml烧杯,高20cm,直径14cm,水深10cm,置于水浴锅内)中,调节水温23～25℃,每缸一只,置水中观察6min,记录小鼠后4min内累计不动时间。

61ppt课件62ppt课件3.利血平引起小鼠的眼睑下垂度模型对照组,利血平模型组利血平+给药组(小、中、大剂量组）末次给药30min后,每只小鼠按2.5mg/kg利血平(0.1ml/10g)ip,观察小鼠眼睑下垂情况,准确记录1h时的眼睑下垂度

63ppt课件按Rubin分级标准,判断下垂度0度:正常开目；1度:眼睑下垂1/4；2度:眼睑下垂1/2；3度:眼睑下垂3/4；4度:眼睑完全闭合下垂度∝抑郁程度64ppt课件五.统计学处理

所有指标以均数±标准差（x±s）表示，以SPSS11.5统计软件包分析，各组间差异比较用方差分析，两组之间用SNK-q检验，以P<0.05差异有显著性。65ppt课件六、可行性分析

工作基础：以前工作基础及预试验；技术、人员均具备；实验条件：所用仪器科室均具备条件。66ppt课件七、经费预算槟榔：1公斤37.8元中南医院药房利血平：1.2元每支米帕明：75mg小白鼠：80只280元饲料：每天每只0.5元共计240元总计：1000元以内

67ppt课件参考文献1.ChuNS.Effectsofbetelchewingonthecentralandautonomicnervoussystems.JBiomedSci.2001,8(3):229–236.2.韩蓉槟榔嚼块对神经系统的影响及其依赖性天坛药讯.2005,17(2):50-55.3.张均田主编.现代药理实验方法,北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社,1998,1062～1064.68ppt课件

学生：刘镕、李丽、谢吉广指导老师：黎七雄学科：药理学

白藜芦醇对CCL4致小鼠急性肝损伤的保护作用69ppt课件一、立题依据二、研究内容三、实验材料四、实验方法五、统计学处理六、可行性分析70ppt课件一、立题依据

白藜芦醇(Resveratrol，简称Res)，又称芪三酚，化学名称为3，4’，5—三羟基二苯乙烯。起初在葡萄中发现，被认为是:它的产生与葡萄植株对真菌感染或非生物刺激(如紫外辐射)有关，是一种植物抗毒素，在植物受到病原性进攻和环境恶化时产生的。它含有芪类结构非黄酮类多酚化合物，具有显著的药理及生物学作用。71ppt课件白藜芦醇的功能作用有抗氧化、抗自由基作用。它不仅可抑制人体低密度脂蛋白（LDL），还能减少H2O2的产生等，起到抗氧化、抗自由基的作用。白藜芦醇甙（在糖苷酶的作用下可释放出白藜芦醇）能抑制类脂质过氧化物在肝脏的推积，具有保护肝脏作用。72ppt课件鉴于前人研究过的都是白藜芦醇对体外培养肝细胞氧损伤的保护作用，而没有做过白藜芦醇对在体肝脏损伤的保护作用的研究，因此，本实验就从这点出发，探讨白藜芦醇对CCL4致小鼠急性