2022-2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）高频考点题库带答案

（图片大小可自由调整）2022-2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）高频考点题库（含答案）第1卷一.综合考核题库(共30题)1.说明SangerDNA测序法的原理。正确答案:(1)核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5'端向3'端聚合(DNA聚合酶参与了细菌修复DNA合成过程)；(2)可延伸的引物必须能提供游离的3'羟基末端，双脱氧核苷酸由于缺少游离的3'羟基末端，因此会终止聚合反应的进行。如果分别用4种双脱氧核苷酸终止反应，则会获得4组长度不同的DNA片段。通过比较所有DNA片段的长度可以得知核苷酸的序列。2.如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成，可以通过何种方法克隆该基因？正确答案:可以通过合成核苷酸探针或设计简并PCR引物从cDNA文库或基因组文库中筛选。或者利用相应的抗体从cDNA表达文库中筛选相应的克隆。3.pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体,pUC系列的载体是通过________和M13两种质粒改造而来。正确答案:pBR3224.大部分限制性核酸内切酶最适反应温度是A、4℃B、37℃C、56℃D、72℃正确答案:B5._________是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术，始于20世纪60年代。正确答案:原位杂交技术6.__________通常是指通过基因工程、抗体工程、细胞工程技术等制备生物药品用于疾病诊断、预防和治疗的行业。正确答案:生物制药7.M13噬菌体属于A、双链噬菌体B、单链噬菌体C、质粒D、亚病毒正确答案:B8.Klenow大片段酶具有几种酶活性A、1种B、2种C、3种D、4种正确答案:B9.巴斯德毕赤氏酵母表达系统较酿酒酵母表达系统具有哪些优势？正确答案:生长迅速，外源蛋白表达水平高，产物可翻译后修饰，产物可正确折叠和高效分泌，可利用简单无机盐培养基，高密度发酵，生物量大，实验室和工业操作简单。10.LacZ基因通常用于构建质粒载体的目的是A、编码蓝色色素产物，可用于示踪转化的细胞B、编码一种酶，将RNA转化为DNAC、编码一种抗生素抗性的酶D、编码一种可检测的酶,当基因内部的位点插入任何外源片段，ORF遭到破坏时，产物即不能表达正确答案:D11.对pBR322描述正确的是()A、经人工改造的酵母质粒B、天然的大肠杆菌质粒C、经人工改造的大肠杆菌质粒D、天然的酵母质粒正确答案:C12.基因工程的两个基本特点是分子水平上的操作和_________。正确答案:细胞水平上的表达13.基因工程所用的克隆载体不需要具备下列哪一个元件A、复制原点B、SD序列C、较高的拷贝数D、选择标记正确答案:B14.下列哪种酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义A、PwoDNA聚合酶B、Taq聚合酶C、PfuDNA聚合酶D、VentDNA聚合酶正确答案:B15.外源基因经pET载体的表达，其表达量往往超过总蛋白的A、40%B、20%C、30%D、50%正确答案:D16.基因工程中的工具酶有哪些A、限制性核酸内切酶B、DNA连接酶C、DNA聚合酶D、碱性磷酸酶E、末端核苷酸转移酶正确答案:A,B,C,D,E17.在微生物遗传学和分子遗传学研究领域中的技术上的三大发明对基因工程的诞生起到了决定性的作用，这三大发明是下列哪些A、利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶体外切割和连接DNA片段B、遗传密码子的破译C、质粒改造成载体以携带DNA片段克隆D、逆转录酶的使用E、明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制正确答案:A,C,D18._________是利用同源重组去改变内源性基因，通过基因打靶可以成功剔除一个基因外显子，增加一个基因和引起点突变。正确答案:基因打靶技术19.pSCl01是一种________复制的质粒。正确答案:严紧型20.下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是A、Cosmid;YAC;PlasmidB、YAC;Cosmid;PlasmidC、Plasmid;YAC;CosmidD、Cosmid;Plasmid;YAC正确答案:B21.根据外源DNA片段的来源不同，可将基因文库分为：基因组DNA文库和cDNA文库。正确答案:正确22.PCR的衍生技术包括A、反转录PCRB、实时荧光定量PCRC、反向PCRD、巢式PCRE、RACE-PCR正确答案:A,B,C,D,E23.PCR循环时按什么方式扩增A、n2B、2nC、2n-1D、2n+1正确答案:B24.试述理想质粒载体的构建原理？正确答案:选择合适的原始质粒；减少限制性内切酶切点；适当增加筛选标记；选择或用强复制起始子代替，提高拷贝数；灭活或去除nic/born基因及毒性蛋白编码区域，提高质粒的安全；进行性状表达的改造。25.个体之间DNA限制性片段长度的差异叫_________。正确答案:限制性片段长度多态性26.在基因工程中，可用碱性磷酸酶A、防止DNA的自身环化B、同多核苷酸激酶一起进行DNA的5’端标记C、制备突出的3’端D、催化DNA连接E、上述说法都正确正确答案:A,B27.“基因表达”是指该基因在大肠杆菌内A、能进行自我复制B、能进行转录C、能控制合成生长抑制素释放因子D、能合成人的生长激素正确答案:C28.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的_________。正确答案:限制性酶切图谱29.染色质免疫沉淀技术是检测（)的技术A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用正确答案:D30.反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板，在引物的引发下合成一条互补的DNA链。正确答案:正确第2卷一.综合考核题库(共30题)1.蛋白质的融合表达式指外源基因与载体已有的担体蛋白的编码基因拼接在一起，并作为一个新的____________进行表达。正确答案:开放阅读框2.PCR反应中DNA模板量一般为A、100-10000拷贝B、100-100000拷贝C、1000-10000拷贝D、10-100拷贝正确答案:B3.BAC载体的最大容载能力是_______。正确答案:300kb4.YAC是至今最大容量的克隆载体。正确答案:正确5.限制与修饰现象是宿主的一种保护体系，它是通过对外源DNA的修饰和对自身DNA的限制实现的。正确答案:错误6._________利用激光微束脉冲引起细胞膜可逆性穿孔，从而将外源DNA导入受体细胞。正确答案:微激光束法7.主要用来提高扩增特异性的特殊PCR是A、反转录PCRB、Real-TimePCRC、巢式PCRD、反向PCR正确答案:C8.westernblot是属于下列哪一种检测方法A、表型检测法B、蛋白质杂交检测法C、序列鉴定法D、物理特性检测法正确答案:B9.显性质粒正确答案:指宿主细胞由于含有某种质粒而呈现出新的性状。10.目前已知持续合成能力最强的酶是A、大肠杆菌聚合酶IB、Klenow片段C、T4DNA聚合酶D、T7DNA聚合酶正确答案:D11._________是指转录因子用于识别靶DNA的蛋白结构域。正确答案:锌指结构域12.YAC载体基本组成元件有_________，着丝粒，端粒，MCS，筛选标记。正确答案:复制起点13.目的蛋白与担体蛋白GST的分离是用哪一种酶进行水解的？A、肠激酶酶解B、溴化氢裂解C、凝乳酶酶解D、凝血酶酶解正确答案:D14.基因工程的操作程序可简单地概括为A、载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B、分、切、接、转、筛C、将重组体导人宿主细胞，筛出含目的基因的阳性株D、将载体和目的基因接合成重组体正确答案:B15.常规Sanger双脱氧链终止法标记的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP正确答案:B16.目的基因通常是指A、拟进行研究或利用的基因B、人工合成的基因C、载体DNA分子D、具有编码序列的DNA分子正确答案:A17.转基因植物技术在农业领域主要有哪些应用？就其中一方面应用进行举例说明。正确答案:抗虫转基因作物；抗病毒转基因作物；抗菌转基因植物；抗逆转基因植物；抗除草剂转基因植物；改良作物品质。具体实例可以从这几个方面挑一项进行说明，比如：抗除草剂转基因植物，这类植物转入了抗除草剂基因，表现出抗不同类型除草剂的性状，目前已获得了一些抗除草剂作物，如抗草丁膦转基因作物冬油菜，抗草甘膦转基因作物大豆、玉米、棉花、油菜、向日葵、甜菜，抗磺酰脲类除草剂转基因作物大豆，棉花。18.下面哪一项不是产生星号活性的主要原因A、甘油含量过高B、反应体系中含有有机溶剂C、含有非Mg2+的二价阳离子D、酶切反应时酶浓度过低正确答案:D19.具有EcoRII末端的外源片段只能以一个方向插入到EcoRII末端的载体中。正确答案:正确20.对柯斯质粒(cosmid)描述正确的是A、它具有COS位点，因而可进行体外包装B、它具有质粒DNA的复制特性C、进入受体细胞后，可引起裂解反应D、进入受体细胞后，可引起溶源化反应E、能与有同源序列的质粒进行重组正确答案:A,B,D,E21.T4DNA连接酶和E．coli连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。正确答案:错误22.基因工程中所用的大肠杆菌菌株是__________的菌株，这样可以避免从中分离出来的DNA，不被限制性核酸内切酶完全消化或完全不被消化。正确答案:甲基化酶失活突变23.下列哪一型限制性核酸内切酶占比例最大A、I型B、II型C、III型D、IV型正确答案:B24.原核表达系统中表达效率最高的是A、色氨酸启动子B、乳糖启动子C、乳糖和色氨酸的杂合启动子D、T7噬菌体启动子正确答案:D25.构建基因组文库的关键一步是A、制备高分子质量的基因组DNAB、载体的选择C、DNA片段与载体的连接D、重组体转化宿主细胞正确答案:A26.真核生物基因组上有些DNA序列能将基因及基因簇隔开，阻止邻近基因之间的相互作用，这些功能序列被称为_________。正确答案:绝缘子27._________---阿尔茨海默病神经系统疾病模型。正确答案:小鼠28.在DNA分离过程中，通常要进行透析，其目的是_________。正确答案:除去小分子的无机离子29.商品化的限制性核酸内切酶均加多少浓度甘油作为保护剂A、10%B、20%C、50%D、30%正确答案:C30.关于多克隆位点，下列叙述正确的是A、是外源基因的插入部位B、由许多酶切位点组成C、是宿主细胞上的一段特殊序列D、是人工合成的一段DNA序列E、含有药物抗性基因正确答案:A,B,D第3卷一.综合考核题库(共30题)1.隐性质粒正确答案:指宿主细胞含有某种质粒，但无异样性状表现，目前的检测手段还未能检测出因含该基因而导致性状、宿主代谢物等的改变。2.用限制性内切核酸酶HaeIII分别切割载体DNA和供体DNA后，可用E.coliDNA连接酶进行连接。正确答案:错误3.把那些没有可检测表型的质粒称为_________。正确答案:隐性质粒4.限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是A、修复自身的遗传缺陷B、促进自身的基因重组C、强化自身的核酸代谢D、提高自身的防御能力正确答案:D5.在cDNA的合成中要用到_________，其作用是切除在第二链合成时形成的发夹环。正确答案:S1核酸酶6.下列哪一种疾病是获得性免疫缺陷综合症A、血友病BB、心血管疾病C、艾滋病D、囊性纤维化正确答案:C7.ES细胞是_________。正确答案:胚胎干细胞8.在实验室研究中，重组大肠杆菌的培养基常使用牛肉膏蛋白胨培养基。正确答案:错误9.包涵体型蛋白具有生物活性。正确答案:错误10.YAC载体具有什么样的功能性DNA序列？为什么在克隆大片段时，YAC具有优越性？正确答案:YAC带有天然染色体所有的功能元件，包括一个着丝粒，一个DNA复制起点，两个端粒。YAC能够容纳长达几百kb的外源DNA，这是质粒和黏粒办不到的。大片段的插入更有可能包含完整的基因，在染色体步移中每次允许更大的步移距离，同时能够减少完整基因组文库所需的克隆数目。11.在利用LacZ失活的显色反应筛选法中，IPTG的作用是A、诱导宿主的ω肽的合成B、作为酶的作用底物C、作为显色反应的指示剂D、诱导宿主的α肽的合成正确答案:D12.Cre-loxP系统两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上，Cre重组酶诱导loxP间的序列互换。正确答案:错误13.单个细胞中所含有的质粒DNA分子数目即为质粒的_________。正确答案:拷贝数14.pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于_______。正确答案:pMBl15.在非最适反应条件下，有些限制性核酸内切酶能切割和识别与特定识别序列相似的序列，这种改变的特殊活性叫做______。正确答案:星活性16.II型限制性核酸内切酶的切割位点是A、识别序列1000bp以外B、识别位点下游24－26bp处C、DNA分子任一位点D、识别序列内正确答案:D17.为了保证引物有较高的退火温度，要求引物的G+C含量尽量控制在40%-60%之间。正确答案:正确18.以mRNA为模板合成CDNA时，所用的工具酶是A、DNA聚合酶IB、DNA连接酶C、逆转录酶D、核酸内切酶正确答案:C19.II型限制性核酸内切酶在发挥作用时需要ATP和Mg2+。正确答案:错误20.限制性内切核酸酶可以特异性地识别：A、双链DNA的特定碱基对B、双链DNA的特定碱基序列C