2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试重点考察试题专家甄选带答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试重点考察试题专家甄选含答案（图片大小可自由调整）第1卷一.综合考核题库(共90题)1.PCR反应中常用的酶是______。2.黏性末端连接法是最常用的连接方法，具有许多优点，但是也有一些不足，请指出这些不足之处。3.下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？为什么？4.利用DNA自动测序时通常进行标记的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP5.切口平移法标记DNA探针时，需用的酶是：A、DNaseIB、RnaseC、DNA连接酶D、限制酶6.同尾酶即识别位点不同但切出的DNA片段具有相同的末端序列。7._________成为国际国内人体健康战略的重中之重。8.对柯斯质粒(cosmid)描述正确的是A、它具有COS位点，因而可进行体外包装B、它具有质粒DNA的复制特性C、进入受体细胞后，可引起裂解反应D、进入受体细胞后，可引起溶源化反应E、能与有同源序列的质粒进行重组9.不是基因工程载体中的报告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori10.基因克隆中三个基本要点是：克隆基因的类型、受体的选择和_________。11.一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，克隆载体的选择与改造，____________的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出转化子。12.基因工程的两个基本特点是：分子水平上的操作和_________。13.基因工程药物的特点是高技术，短周期，高投入，高风险，高收益。14.T4DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E．coli中分离的，这种连接酶A、催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源B、既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接C、是一种单肽酶，分子质量为74kDaD、既能催化单链DNA

连接又能催化双链DNA

连接

15.在______技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分离后，被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上，然后与放射性的DNA探针杂交。16.表达载体和基因工程克隆一般载体在元件构成上有何差别？17.下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大A、黏粒B、酵母人工染色体(YAC)C、λ噬菌体D、质粒18.PCR反应中引物长度一般是A、5bpB、10bpC、16bpD、20bp19.Ptrp表示（）A、噬菌体启动子B、色氨酸启动子C、乳糖和色氨酸复合启动子D、乳糖启动子20._________是指真核生物基因组中能特异与核基质结合并富含AT的DNA序列。21.写出动物基因工程的常用方法？22.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫做A、基因文库B、基因库C、基因组文库D、cDNA文库23.DNA片段之间的连接方式有哪些？24.印迹是如何形成的？25.下面关于松弛型质粒(relaxedplasmid)性质的描述不正确的是A、质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数B、可以在氯霉素作用下进行扩增C、通常具有较少的拷贝数D、同严紧型质粒整合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子

26.关于黏粒载体的描述错误的是A、是由λ噬菌体与质粒DNA重组的载体B、既有质粒的特性，又有噬菌体DNA的特性(如可体外包装)C、可插入大片段的外源DNA片段D、可像YAC载体那样构建大片段的基因组文库

27.Ⅱ型限制性内切核酸酶：A、有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列B、仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供C、限制性识别非甲基化的核苷酸序列D、有外切核酸酶和甲基化酶活性28.在引物存在的情况下才能发挥作用的酶是A、限制性核酸内切酶B、末端转移酶C、逆转录酶D、DNA连接酶29.Cre-loxP系统两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相同，Cre重组酶敲除loxP间的序列30.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫基因库。31.请写出基因工程的基本操作顺序？32.Ti质粒33.转基因技术导致的生物安全威胁属于生态环境破坏。34.催生基因工程技术诞生的关键技术是DNA转化技术的突破。35.如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成，可以通过何种方法克隆该基因？36.________主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计一组混合引物来合成相应的基因。37.蓝白斑筛选是A、表型检测法B、核酸杂交检测法C、序列鉴定法D、物理特性检测法38.大部分限制性核酸内切酶最适反应温度是A、4℃B、37℃C、56℃D、72℃39.启动子从转录模式上可分为哪两种？表达系统常选用哪一种？其机理是什么？40.核酸杂交探针可分为两大类：DNA探针和_______。41._________决定PCR扩增产物的特异性与长度。42.Watson和Crick两位科学家于1953年提出来的DNA是以一种_______________形式存在。43.______________是所有已知DNA聚合酶中持续合成能力最强的一个，它的3’-5’核酸外切酶活性约为Klenow片段的1000倍。44._________是利用同源重组去改变内源性基因，通过基因打靶可以成功剔除一个基因外显子，增加一个基因和引起点突变。45.基因工程上常用的限制性内切酶是III型酶。46.基因表达载体中启动子的本质是_________。47.何谓基因工程？48.______________是应用最广也是研究最深入的DNA聚合酶。49.对外源基因进行百万倍的扩增可采用________技术50.质粒具有下列哪几项生物学特性A、质粒的复制B、拷贝数C、不相容性D、转移性E、表达性51.分子杂交的化学原理是形成()A、疏水键B、配位键C、氢键D、共价键52.抗性基因（Resistant？gene）是目前使用的最广泛的选择标记，常用的抗生素抗性有哪几种？53.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子Trp又称为A、乳糖启动子B、乳糖和色氨酸的杂合启动子C、噬菌体的左向启动子D、色氨酸启动子54.用Sanger双脱氧法进行DNA测序时，凝胶上读出的序列是A、模板链的互补链B、mRNA的C、cDNA的D、模板链的55._________的编码产物可用简单的生物化学反应或借助特殊的仪器直接观察。56.核酸分子杂交的探针只能是标记的小片段DNA分子57.不同的表达载体需要不同的受体系统进行基因表达，受体系统根据宿主细胞的性质可以分为两大类：________________和真核表达系统。58.试述基因组文库的构建流程。59.基因组文库的构建一般包括下列基本步骤A、细胞染色体大分子DNA的提取和大片段DNA的制备B、载体DNA的准备C、载体与外源大片段DNA的连接D、体外包装机基因组DNA文库的扩增E、重组DNA的筛选和鉴定60.Northern杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体61.下面关于多克隆位点MultipleCloneSite（MCS)的描述错误的一项是A、仅位于质粒载体中B、具有多种酶的识别序列C、不同酶的识别序列可以有重叠D、一般是人工合成后添加到载体中62.EcoRI的识别序列是A、5-GATTC-3B、5-CTGGCAG-3C、5-CCCGGG-3;D、5-GGATCC-363.YAC载体基本组成元件有_________，着丝粒，端粒，MCS，筛选标记。64.如果PCR的每一次循环都把上一次循环中合成的DNA增加了1倍，那么10个循环就扩增了1000 倍，20个循环就扩增了100万倍，30个循环就扩增了10亿倍。65.进行体外重组时，外源片段和载体分子之间的物质的量比值一般为A、（1-5）:1B、（3-10）:1C、1：（3-10）D、1：（1-5）66.细菌抗药性基因一般存在于A、核酸DNAB、质粒C、RNAD、小的直线型DNA67.Cohen等在_________年构建了第一个有功能的重组DNA分子。68.一个质粒含有四环素抗性基因(tetr)和LacZ基因，tetr内有一HindIII位点，LacZ中有一EcoRI

位点。如用这两种切割载体一并连接入相应的外源片段，则带有该重组质粒的细胞将A、对四环素敏感，在X-gal平板上呈现蓝色B、有四环素抗陛，在X-gal平板上呈现白色C、对四环素敏感，在X-gal平板上呈现白色D、有四环素抗性，在X-gal平板上呈现蓝色69.下列测序方法哪个是属于经典的DNA测序方法A、ABISOLID测序B、Illumina测序C、Roche454D、双脱氧终止法70.基因治疗通常采用哪种载体比较合适A、逆转录病毒B、Ti质粒C、噬菌体D、质粒pBR32271.基因工程的三大基本元件是供体基因、受体细胞、_____________。72.下列哪一项不属于cDNA的第二条链的合成的方法A、自身引导合成法B、置换合成法C、引导合成法D、随机引物合成法73.扩增外源基因时需要DNA载体中的（）性质A、青霉素抗性B、卡那霉素抗性C、自我复制能力D、自我转录能力74.按照人们的意愿，改变基因中碱基的组成，以达到基因突变的技术称为________。75.迄今所发现的限制性内切核酸酶既能作用于双链DNA，又能作用于单链DNA。76.下列哪一项不具有吸附DNA的功能A、经特殊处理的滤纸B、尼龙膜C、玻璃膜D、硝酸纤维素膜77.________技术是基于互补的DNA单链分子能够形成稳定双螺旋结构的天然特性而发展起来的。78.下列哪一项不属于遗传表型检测法A、抗药性标记基因B、LacZ基因蓝白斑筛选C、GFPD、核酸分子杂交79._________是由磷脂组成的膜状结构，用它包装外源DNA分子，然后与植物原生质体共保温。80.M1载体在多克隆位点的两侧引入了T7和T3两个噬菌体的启动子，这样增加了该载体的功能，下述四种功能中哪一种是不正确的?A、可以对插入到多克隆位点的外源片段进行转录分析B、利用这两个启动子的通用引物进行PCR扩增C、利用通用引物进行序列分析D、利用这两个启动子进行定点突变81.按质粒复制的调控及其拷贝数可分两类：严紧控制型质粒和_____________。82.通过基因敲除技术使生物体缺失一个或更多基因，从而判断这些被敲掉基因的功能，常称之为_______________。83.在基因工程中，碱性磷酸酶多与下列那种工具酶一起标记DNA分子的5‘-末端A、末端脱氧核苷酸转移酶B、核酸外切酶C、T4多核苷酸激酶D、S1核酸酶84.基因操作的两大关键技术是A、工具酶与载体B、转化细胞和供体细胞C、基因克隆和基因重组D、克隆载体和表达载体85.基因治疗研究的基本程序不包括A、目的基因的选择与制备B、靶细胞的选择和培养C、基因的导入和表达D、大肠杆菌的培养86.Klenow大片段酶具有几种酶活性A、1种B、2种C、3种D、4种87.质粒作为载体使用时必须具备如下条件A、拷贝数较高B、分子量较小C、具有选择标记D、具有较多的限制性酶切位点E、具有复制起始点88.连接反应中，下列哪项物质是T4DNA连接酶所必须的辅助因子A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP89.cDNA克隆与基因组克隆有何不同？90.下列哪一种限制性核酸内切酶的酶蛋白分子组成只有一单一亚基A、II型B、III型C、IV型D、I型第1卷参考答案一.综合考核题库1.正确答案:TaqDNA聚合酶2.正确答案:(1)载体易自身环化；(2)若是用同一种限制性内切核酸酶产生的黏性末端连接又不易定向克隆；(3)难插入特定的基因；(4)再者就是大片段DNA的重组率较低，即使用碱性磷酸酶处理了载体，防止了载体的自身环化，载体也有成环的倾向；(5)用这种方法产生的重组体往往含有不止一个外源片段或不止一个载体连接起来的串联重组体，增加筛选工作的困难。3.正确答案:GATATC；AAATTT；因为它们是回文序列。4.正确答案:A5.正确答案:A6.正确答案:正确7.正确答案:转化医学8.正确答案:A,B,D,E9.正确答案:D10.正确答案:载体的选择11.正确答案:目的基因与克隆载体12.正确答案:细胞水平上的表达13.正确答案:错误14.正确答案:B15.正确答案:Southern杂交16.正确答案:表达载体：启动子、终止子、核糖体结合位点（SD序列）、筛选标记、复制子、多克隆位点；克隆载体：筛选标记、复制子、多克隆位点。17.正确答案:B18.正确答案:D19.正确答案:B20.正确答案:核基质附着区21.正确答案:显微注射技术构建转基因小鼠；基因打靶策略；病毒载体法；精子载体法；ZFN介导转基因；TALEN技术。22.正确答案:A23.正确答案:具黏性末端的DNA片段之间的连接、具平末端DNA片段之间的连接、DNA片段末端修饰后进行连接、DNA片段加连杆（linker）后的连接。24.正确答案:DNA沿凝胶平面垂直方向移出并转移到膜上，转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与凝胶中的相对位置一样。25.正确答案:C26.正确答案:D27.正确答案:B28.正确答案:C29.正确答案:正确30.正确答案:错误31.正确答案:目的基因的制备；目的基因与载体连接；目的基因导入受体细胞；目的基因的表达与检测。32.正确答案:是根癌农杆菌染色体外的遗传物质，为共价闭合双链环状DNA分子。33.正确答案:错误34.正确答案:错误35.正确答案:可以通过合成核苷酸探针或设计简并PCR引物从cDNA文库或基因组文库中筛选。或者利用相应的抗体从cDNA表达文库中筛选相应的克隆。36.正确答案:简并引物PCR37.正确答案:A38.正确答案:B39.正确答案:启动子从转录模式上分为：组成型启动子和诱导型启动子，表达系统常选用诱导型启动子，机理：指在某些特定的物理或化学信号的刺激下，该种类型的启动子可以大幅度的提高基因的转录水平。40.正确答案:RNA探针41.正确答案:引物42.正确答案:DNA双螺旋结构43.正确答案:T7DNA聚合酶44.正确答案:基因打靶技术45.正确答案:错误46.正确答案:一段DNA片段47.正