2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试重点考察试题专家甄选含答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试重点考察试题专家甄选含答案（图片大小可自由调整）第1卷一.综合考核题库(共90题)1.连接酶通常使用的连接反应温度是A、37℃B、20℃C、16℃D、50℃2.最早建立成功的转基因哺乳动物是A、转基因猴B、转基因小鼠C、转基因绵羊D、转基因猪3.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子Lac又叫A、色氨酸启动子B、乳糖启动子C、乳糖和色氨酸的杂合启动子D、噬菌体的左向启动子4.商品化的限制性核酸内切酶均加多少浓度甘油作为保护剂A、10%B、20%C、50%D、30%5._________决定PCR扩增产物的特异性与长度。6.用同一种酶切割载体和外源DNA得到黏性末端后，为防止它们自身环化，要用CIP将它们脱磷酸。7.westernblot杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体8.试述分子杂交技术的原理？9.什么是生物制药？10._________是指以精子为载体，通过动物受精过程将外源基因导入胚胎，产生转基因动物。11.转录水平的鉴定是指_________。12.______________是所有已知DNA聚合酶中持续合成能力最强的一个，它的3’-5’核酸外切酶活性约为Klenow片段的1000倍。13.波莉绵羊的诞生是通过体细胞核移植法制备的。14.双链DNA中一段自我互补的序列被称为回文序列，这种序列一般具有哪些特征。A、有对称轴B、两条链的5’→3’方向的序列相同C、是Ⅱ类酶的识别序列D、可增强基因的表达E、是I类酶的识别序列15.利用反义RNA、核酶等反义技术及RNA干扰技术等能特异地封闭基因表达的特性，抑制一些有害基因的表达，以达到治疗疾病的目的。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因修正B、基因增补C、基因激活D、基因失活16.构建GST蛋白表达系统的载体是为了使目标蛋白以哪种方式表达?A、融合表达B、分泌表达C、独立表达D、包涵体表达17.以mRNA为模板合成CDNA时，所用的工具酶是A、DNA聚合酶IB、DNA连接酶C、逆转录酶D、核酸内切酶18.“基因表达”是指该基因在大肠杆菌内A、能进行自我复制B、能进行转录C、能控制合成生长抑制素释放因子D、能合成人的生长激素19.II类限制酶反应中必须添加的阳离子是A、Na+B、Ca2+C、Mg2+D、Mn2+20.基因工程以_________为基本材料。21.试述基因组文库的构建流程。22.______________是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。23.构建基因组文库的关键一步是A、制备高分子质量的基因组DNAB、载体的选择C、DNA片段与载体的连接D、重组体转化宿主细胞24.在______技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分离后，被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上，然后与放射性的DNA探针杂交。25.质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A、①③⑤⑦B、②④⑥C、①③⑥⑦D、②③⑥⑦26.T4DNA连接酶和E．coli连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为辅助因子。27.催生基因工程技术诞生的关键技术是DNA转化技术的突破。28.写出动物基因工程的常用方法？29.组成型启动子30.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫做A、基因文库B、基因库C、基因组文库D、cDNA文库31.非接合质粒32.具有EcoRII末端的外源片段只能以一个方向插入到EcoRII末端的载体中。33.下列哪项是表达载体特有的而克隆载体没有的元件A、复制点B、筛选标记C、多克隆位点D、启动子34.基因工程中有三种主要类型的载体：_________、病毒DNA质粒和病毒DNA杂合体。35.写出分子克隆的载体应具备的条件？36.怎样制备目的基因？37.除了常规PCR外，还有一些特殊的PCR，常见的有反向PCR、反转录PCR、______________、多重PCR、巢式PCR。38.pUC质粒包括哪些组成部分A、复制起点B、氨苄青霉素抗性基因C、lacZ的启动子D、多克隆位点E、潮霉素抗性基因39.基因工程中常作为基因的运载体的一组结构是A、质粒、线粒体、噬菌体B、染色体、叶绿体、线粒体C、质粒、噬菌体、动植物病毒D、细菌、噬菌体、动植物病毒40.下面关于松弛型质粒(relaxedplasmid)性质的描述不正确的是A、质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数B、可以在氯霉素作用下进行扩增C、通常具有较少的拷贝数D、同严紧型质粒整合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子

41.为了保证引物有较高的退火温度，要求引物的G+C含量尽量控制在40%-60%之间。42.Cosmid的特点元件是43.如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成，可以通过何种方法克隆该基因？44.基因工程的两个基本特点是：分子水平上的操作和_________。45.说明SangerDNA测序法的原理。46.下列是构建基因组文库的常用载体，哪一种载体需要用的受体细胞和其余三种不一样A、柯斯质粒B、YACC、BACD、噬菌体47.何谓星活性？48.基因工程的两个基本特点是分子水平上的操作和_________。49.下列用于Southern印迹转移的是：A、首先用限制性内切酶处理DNAB、酶切片段经琼脂糖电泳C、将DNA进行碱变性D、将DNA转移至硝酸纤维素膜E、硝酸纤维素膜经80℃真空干燥2-3小时50.基因克隆中低拷贝数的质粒载体是不起作用的。51.请叙述反转录PCR的含义。52.基因敲除的应用有哪些前景和展望A、基因功能研究B、建立人类疾病模型C、疾病的基因治疗培育新的生物品种53.有关基因工程的叙述正确的是A、限制性内切酶只在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可以作为运载体D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料54.常用的固相杂交类型有A、Southern杂交B、Northern杂交C、组织原位杂交D、菌落原位杂交E、斑点杂交55._________质粒是目前使用较为广泛的载体。56._________的使用，使基因操作技术有了突破性的飞跃，成为2011年的Nature年度技术。57.将携带有外源基因并能持久传递给子代的动物称为_________。58.基因重组的载体必须具备下列哪些特点：A、本身是一个复制单位，能在受体细胞中复制B、插入外源DNA后也不影响自身的复制C、易于进入受体细胞D、通过自身的酶系在受体细胞中复制E、通常带有抗性基因，易于筛选和鉴定59.Klenow大片段酶具有几种酶活性A、1种B、2种C、3种D、4种60.基因工程又叫遗传工程、____________、分子克隆。61.连接反应中，那种组分是为连接体系提供合适的pHA、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP62.从E.coli中分离的连接酶A、需要NAD作辅助因子B、可以进行平末端和黏性末端连接C、作用时不需要模板D、需要ATP

作辅助因子63.对Ti质粒描述正确的是：A、可从农杆菌转到植物细胞中B、作为双链DNA被转移C、在植物中导致肿瘤D、介导冠瘿碱的合成，作为细菌的营养物和植物的生长激素E、需要细菌的vir 基因帮助转移64.扩增外源基因时需要DNA载体中的（）性质A、青霉素抗性B、卡那霉素抗性C、自我复制能力D、自我转录能力65.只有完整的复制子才能进行独立复制，一个失去了复制起点的复制子不能进行独立复制。66.核酸序列测定技术的发展经历了哪几个重要阶段？67.常规PCR反应程序中，高温变性一般设置多高的温度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃68.下列哪一项不属于cDNA的第二条链的合成的方法A、自身引导合成法B、置换合成法C、引导合成法D、随机引物合成法69.目前，严重危害人类健康和生命，其死亡率居各类疾病之首的是A、艾滋病B、心血管疾病C、恶性肿瘤D、血友病70.Muller的PCR反应同大肠杆菌体内的DNA复制有哪些不同？你认为根本的差别在哪里？71.用来鉴定DNA的技术是：A、Northern杂交B、Western杂交C、亲和层析D、Southern杂交72.基因表达载体中启动子的本质是_________。73._________是一种借助显微镜将外源DNA直接注入受体细胞的方法。74.个体之间DNA限制性片段长度的差异叫_________。75.切口平移法标记DNA探针时应用的酶是_____。76.可识别并切割特异DNA序列的称A、限制性核酸外切酶B、限制性核酸内切酶C、非限制性核酸外切酶D、非限制性核酸内切酶77.下列哪一种疾病是获得性免疫缺陷综合症A、血友病BB、心血管疾病C、艾滋病D、囊性纤维化78.什么是S1核酸酶作图(S1nucleasemapping)？79.黏粒（Cosmid)是一种人工构建的载体，A、它具有cos位点，因而可进行体外包装B、它具有质粒DNA的复制特性C、进入受体细胞后，可引起裂解反应D、进入受体细胞后，可引起溶原化反应E、能承载大于自身大小的DNA片段80.第一个被分离的Ⅱ类限制性核酸内切酶是：A、EcoKB、HindⅢC、HindⅡD、EcoB81._________是指编码产物能够被快速测定，常用来判断外源基因是否已经成功导入寄主细胞并检测其表达活性的一类特殊用途的基因。82.免疫共沉淀技术是检测（)的技术A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用83.试述cos质粒载体的特点？84.pBR322质粒克隆载体含有的抗性标记为A、四环素和氨苄青霉素B、氨苄青霉素和庆大霉素C、四环素和庆大霉素D、潮霉素和四环素85.黏性末端连接法是最常用的连接方法，具有许多优点，但是也有一些不足，请指出这些不足之处。86.重组DNA技术中常用的限制性内切酶为A、I类限制性内切酶B、II类限制性内切酶C、III类限制性内切酶D、IV类限制性内切酶87.利用噬菌体或动物病毒作为载体转化细胞的过程称为转移。88.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段。89.不同的限制性核酸内切酶都盐离子强度有不同的要求，一般按离子强度不同分为低盐、_________、高盐三类。90.用EcoRI和HindⅢ分别切割同一来源的染色体DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到A基因，但在后者的克隆中未筛选到A基因，请说明原因。第1卷参考答案一.综合考核题库1.正确答案:C2.正确答案:B3.正确答案:B4.正确答案:C5.正确答案:引物6.正确答案:错误7.正确答案:C8.正确答案:将标记的核酸探针以碱基互补配对原则与组织细胞中的待测核酸进行特异性的杂交组合，形成探针标记与待测核酸的杂交体，然后利用各种标记物的显色技术，在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下探察待测目标核酸的存在及位置。9.正确答案:指通过基因工程、抗体工程、细胞工程技术等制备生物药品用于疾病诊断、预防和治疗的行业，核心是通过重组DNA技术生产具有药用功能的生物制品。10.正确答案:精子载体法11.正确答案:mRNA检测12.正确答案:T7DNA聚合酶13.正确答案:正确14.正确答案:A,B,C15.正确答案:D16.正确答案:A17.正确答案:C18.正确答案:C19.正确答案:C20.正确答案:DNA21.正确答案:生物供体DNA片段的制备；载体的选择与制备；DNA片段与载体的连接；重组体转化宿主细胞；基因文库质量的评价。22.正确答案:基因23.正确答案:A24.正确答案:Southern杂交25.正确答案:C26.正确答案:错误27.正确答案:错误28.正确答案:显微注射技术构建转基因小鼠；基因打靶策略；病毒载体法；精子载体法；ZFN介导转基因；TALEN技术。29.正确答案:指该启动子指导的基因表达于各个组织。30.正确答案:A31.正确答案:指不含nic/born基因，不能自我转移的质粒。32.正确答案:正确33.正确答案:D34.正确答案:质粒DNA35.正确答案:自主复制，即具有复制原点；易于扩增分离纯化；有适宜的限制酶切位点；具备对重组体易于检测的选择性遗传标记；表达载体还应有表达调控元件。36.正确答案:直接分离法、构建基因文库分离法、PCR扩增法、人工合成法等。37.正确答案:实时荧光定量PCR38.正确答案:A,B,C,D39.正确答案:C40.正确答案:C41.正确答案:正确42.正确答案:cos位点43.正确答案:可以通过合成核苷酸探针或设计简并PCR引物从cDNA文库或基因组文库中筛选。或者利用相应的抗体从cDNA表达文库中筛选相应的克隆。44.正确答案:细胞水平上的表达45.正确答案:(1)核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5'端向3'端聚合(DNA聚合酶参与了细菌修复DNA合成过程)；(2)可延伸的引物必须能提供游离的3'羟基末端，双脱氧核苷酸由于缺少游离的3'羟基末端，因此会终止聚合反应的进行。如果分别用4种双脱氧核苷酸终止反应，则会获得4组长度不同的DNA片段。通过比较所有DNA片段的长度可以得知核苷酸的序列。46.正确答案:B47.正确答案:在非最适反应条件下，有些限制性核酸内切酶能切割和识别与特定识别序列相似的序列，这种改变的特殊活性叫做星活性。48.正确答案:细胞水平上的表达49.正确答案:A,B,C,D,E50.正确答案:错误51.正确答案:是一种利用逆转录酶将组织和细胞中的RNA反转录成cDNA，并以此为模板通过PCR进行DNA扩增来间接检测RNA的链式聚合酶反应。52.正确答案:A,B,C,D53.正确答案:D54.正确答案:A,B,C,D,E55.正确答案:pUC系列56.正确答案:ZFN技术57.正确答案:转基因动物5