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文档简介

细胞凋亡检测技巧（AnnexinV-PI染色整理实验万事屋还是只讲要点，不讲段子，这个系列还包括（即可查看1、原理：在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，在细胞外环境中。Annexin-与PS高亲和力结合，可通过细胞外侧的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞。PI是一种核酸，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将AnnexinV与PI联合使用时，PI则被排除在活细胞（AnnexinV-/PI-）和早期凋亡细胞（AnnexinV+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被AnnexinV和PI结合染色呈现双阳性（AnnexinV+/PI+）5、由于凋亡检测的为活细胞，因此整个收集细胞的操作过程尽量保持细胞活性，避免人为的损伤细胞，如：避免用力吹打细胞，避免胰酶消化时间过长，用冰浴的PBS细胞，缩短上机检测的时间。6、Annexin-Ⅴ上面带有FITC光，从染始注光操孵育般尽在染色后半个小时内上机检测。7、如果处理的细胞中含有GFP等绿光，可能会干扰FITC光标记的Annexin-V。9、在消化液中尽量不用E

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