维生素类药物的分析课件2

第六章维生素类药物的分析第一节概述第二节维生素A的分析第三节维生素C的分析第四节维生素E的分析1医学ppt＊维生素是维持人体正常生理机能所必需的生物活性物质；主要用于机体的能量转移和代谢调节；大多数维生素人体不能合成。＊化学结构：

醇、酯、酸、胺、醛、酚＊如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。

例如:VA缺乏—夜盲症VB1缺乏—脚气病第一节概述

这类药物的分析方法很多，有生物法、微生物法、化学法和物理化学法，但目前常用的分析方法是化学法或物理化学法。2医学ppt

公元前3500年:古埃及人发现能防治夜盲症的物质，也就是后来的维A;

1600年:医生鼓励以多吃动物肝脏来治夜盲症;

1747年:苏格兰医生林德发现柠檬能治坏血病，也就是后来的维C。

1831年:胡萝卜素被发现;

1905年:甲状腺肿大被碘治愈;

1912年:波兰化学家冯克为维生素命名（Vitamin);

1915年:科学家认为糙皮病是由于缺乏某种维生素而造成的;1916年:维生素B被分离出来;

1917年:英国医生发现鱼肝油可治愈佝偻病，随后断定这种病是缺乏维D引起的。

维生素发展史3医学ppt1920年-发现人体可将胡萝卜转化为维生素A;

1922年-维E被发现;

1928年-科学家发现维B至少有两种类型;

1933年-维E首次用于治疗;

1948年-大剂量维C用于治疗炎症;

1949年-维B3与维C用于治疗精神分裂症;

1954年-自由基与人体老化的关系被揭开;

1957年-Q10多酶被发现;

1969年-体内超级抗氧化酶被发现;

1970年-维C被用于治疗感冒;

1993年-哈佛大学发表维生素E与心脏病关系的研究结果。

现被列为维生素的有60余种，对维持人体健康和促进发育至关重要的有20余种,其中的14种及其制剂可作为药物使用！4医学ppt

VitA、D2、D3、E、K1

等＊脂溶性:＊水溶性:

VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。分类按溶解度分:5医学ppt

第二节维生素A的分析一．结构与性质

1.化学结构R=HVA醇VA1R=—COCH3VA醋酸酯R=—COC15H31

VA棕榈酸酯结构特点：

（1）环己烯+共轭多烯侧链；（2）天然VA侧链为全反式；（3）天然来源主要是鱼肝油，为醋酸酯，棕榈酸酯等,目前多由人工合成。6医学ppt

维生素A具有多种生理功能，对视力、生长、上皮组织及骨骼的发育、生育都是必需的。效用：☆

防止夜盲症和视力减退，有助于对多种眼疾的治疗（维生素A可促进眼内感光色素的形成）；☆

有抗呼吸系统感染作用；☆

有助于免疫系统功能正常；生病时能早日康复；能保持组织或器官表层的健康；☆有助于祛除老年斑；☆

促进发育，强壮骨骼，维护皮肤、头发、牙齿、牙床的健康；☆外用有助于对粉刺、脓包、疖疮，皮肤表面溃疡等症的治疗；☆

有助于对肺气肿、甲状腺机能亢进症的治疗。7医学ppt

2.性质

a.

紫外吸收＊具有共轭多烯侧链—紫外吸收；＊最大吸收波长在325-328nm，随VA存在状态以及所用的溶剂，最大吸收波长的位置有所不同。b.溶解性：＊不溶于水＊溶于乙醚，氯仿，异丙醇，环己烷，脂肪和油。c.不稳定性（易发生脱氢、脱水、聚合反应）＊共轭多烯侧链—性质非常活泼.鲸醇8医学ppt◆维生素A的氧化产物：▲ⅰ.环氧化物▲ⅱ.维生素A醛▲ⅲ.维生素A酸or9医学pptO2H+重排[O][O]VA酸VA醛呋喃型氧化物（无生物活性）10医学ppt+H+++-H+去水VA（VA3）烯丙型醇遇酸易发生脱水反应11医学pptd.与SbCl3作用—卡尔-普赖斯（Carr-Price）反应

应用：

★鉴别★含量测定CHCl3条件:无水无醇水可使SbCl3水解成SbOCl乙醇可与正碳离子作用，使正电荷消失12医学ppt二.鉴别试验1.

三氯化锑反应

蓝色紫红VA与三氯化锑(SbCl3)中存在的亲电试剂氯化高锑（SbCl5）作用形成不稳定的蓝色正碳离子。13医学ppt

2.

紫外吸收光谱

VA的无水乙醇溶液在326nm有最大吸收。λmax为326nm一个吸收峰λmax为350～390nm三个吸收峰（VitA3）14医学ppt3.TLC

确认醇或酯，是醋酸酯或其他酸酯.▲例：VA和其标准品用环己烷溶解展开剂：环己烷—乙醚（80：20）板：硅胶G显色：SbCl3T.S.（蓝色斑点）Rf：VA醇0.08VA醋酸酯0.41VA棕榈酸酯0.7515医学ppt

三.含量测定1.概述＊共轭多烯的结构—具有特征的紫外吸收。＊相关物质—结构相似,维生素A最大吸收,波长附近也有吸收，对测定有影响。＊Morton和Stubbs等人提出了三点校正法。紫外分光光度法－三点校正法2.原理（根据、假定）ⅰ.物质对光的吸收具有加和性，即ⅱ．维生素A中的不相关吸收在310~340nm范围内近似一条直线。16医学ppt效价为维生素A1的40%，max345~350nm3.相关物质的吸收＊a.

维生素A的衍生物ⅰ.维生素A2（去氢维生素A）ⅱ．维生素A3（去水维生素A）效价低于维生素A1，max385~390nm＊b.维生素A的氧化产物(已介绍)＊c.合成时的中间体＊d.

鲸醇维生素A醇的二聚体，没有生物活性.17医学ppt侧连有4个双键—应有种异构体。目前，包括维生素A在内，共发现有6种异构体。它们是：＊e.维生素A异构体新维生素Aa新维生素Ab新维生素Ac异维生素Aa异维生素Ab维生素A18医学ppt名称顺反异构max(nm)相对效价ⅰ．新维生素Aa2-顺式32875%ⅱ．新维生素Ab4-顺31924%ⅲ．新维生素Ac2,4-二顺31115%ⅳ．异维生素Aa6-顺32321%ⅴ．异维生素Ab2,6-二顺32424%ⅵ．维生素A全反式325~328100%19医学ppt

4.三个波长的选择方法

1：维生素A的max;2、3：分别在1两侧

ⅰ.等波长差法：这两个波长分别在1两侧12nm处，即1=328nm;2=314nm;3=340nmⅱ.等吸光度法：VA在这两个波长下的吸光度应该等于1下的吸光度的6/7，即:

1=325nm;2=310nm;3=334nm20医学ppt5.方法Ch.P收载有2种方法。第一法（适用于酯式维生素A的测定）a.

操作方法b.

计算方法

ⅰ.最大吸收波长确认max在326-329nm，第一法测定;max不在326-329nm，第二法测定。ⅱ．计算吸收度比（如300，316，328，340，360nm处)及比值差首先要计算吸收度比值;然后计算吸收度的比值差◘

max在326-329nm间；◘

差值不超过正负0.02时；则直接带入式子计算！21医学ppt最大吸收波长是否在326-329之间是否计算吸收度比值之差是否超过±0.02第二法（皂化）是否计算A328（校正）A32822医学ppt

ⅲ．计算校正吸收度（最大吸收峰在326-329nm间，差值有些超过正负0.02时）吸收度校正公式：ⅳ.换算因数定义：每一个数值所相当的效价（维生素A含量）。(1IU=0.344g全反式维生素A醋酸酯)维生素A醋酸酯换算因数：标示量为作品标签上注明的每胶丸含有的VA醋酸酯的国际单位数。判断选用吸光度：23医学ppt

例：维生素AD胶丸中维生素A的含量测定。已知：平均胶丸重为0.0815g；维生素A的标示量为10000IU/丸；取样：；测定数据如下表：波长吸收度比值规定值比值差3000.3740.5740.5550.0193160.5840.8960.907-0.013280.6521103400.5340.8190.8110.0083600.2110.3390.2990.04求：维生素A的标示百分含量。24医学ppt首先要求样品的：根据比尔定律：A为测得吸收度or校正吸收度。所以：

这样所以，维生素A的标示含量25医学ppt第二法（皂化法）：

消除植物油干扰：适合VA醇。26医学ppt

练习：已知某药物结构式为：1.简述该药物结构和性质之间的关系。2.根据其结构特点，设计合理的鉴别方法。3.试设计一条从简单化合物合成该药物的路线，并分析可能引入的杂质及其定量分析方法。27医学ppt第三节维生素C的分析一.化学结构结构特点：①

维生素C分子中具有2个手性C原子，具有4种光学异构体。其中生理活性最强的是L（+）-抗坏血酸.L(+)-抗坏血酸D(-)-抗坏血酸D(-)-异抗坏血酸L(+)-异抗坏血酸②具有内酯结构。碱性下可水解。③

具有烯二醇基。还原性，能够被氧化成去氢抗坏血酸。酸性,能与碱成盐。28医学ppt二.性质与鉴别试验

1.酸性烯二醇结构—酸性。▲C3-OH，pKa=4.17(共轭效应)▲C2-OH，pKa=11.57(邻位羰基)一元酸:能与NaHCO3作用生成钠盐。

2.还原性烯二醇基—还原性。如：（无色）29医学ppt3.水解反应

L-二酮古罗糖酸(无生物活性)4.荧光反应5.糖的性质

VC的结构很象糖结构，具有糖的性质。50℃30医学ppt这个反应的摩尔比是1∶2。三.含量测定

1.碘量法

a.原理b.操作

终点颜色：无色→蓝色1ml0.1mol/L碘液1ml8.806mgC6H8O6.31医学pptc.

讨论

ⅰ.反应条件＊酸性:使VC在空气中氧化速度减慢。ⅱ.溶剂＊新沸放冷的水。减少水中溶解氧的影响。

ⅲ．还原性物质的影响及排除＊VC注射液中常加有亚硫酸盐如NaHSO3作为抗氧剂.排除：加入丙酮或甲醛。+→32医学ppt

2.2,6-二氯吲哚酚滴定法

原理：

在酸性下,氧化型是红色的;还原型是无色的;酸性下直接用2,6-二氯吲哚酚滴定，用滴定剂自身的颜色变化指示终点，不需要另外的指示剂。氧化型（红色）还原型(无色)++所以，终点的颜色是溶液由无色变为红色。33医学ppt3.快速酶电极法原理：VC溶液与酶作用时用氧电极测定氧的消耗量，就可求出溶液中VC的含量。特点：准确度高、所需时间短、操作简便、试剂消耗低，并具有良好的线性关系，是工业测试的一种新手段。34医学ppt4.快速比色法原理：维生素C与Fe(III)一邻菲罗啉复合物反应生成Fe(Ⅱ)一邻菲罗啉复合物，后者在510nm波长处有最大吸收。用比色法直接测定维生索C注射液的含量。特点：与碘量法比较，本法操作简便、快速、灵敏，可作为医院、药厂对维生素C注射液及其中间品质量监测的参考。35医学ppt第四节维生素E的分析一．化学结构与性质名称：消旋-α-生育酚醋酸酯母核：苯骈二氢吡喃衍生物苯环上有一乙酰化的酚羟基侧链：脂肪烷烃36医学ppt

1、硝酸反应：本品，无水乙醇溶解，加硝酸，75℃加热约15分钟，显橙红色。2、水解后氧化反应：本品，在碱性条件下水解，得α-生育酚，在联吡啶和三氯化铁试液的作用下，反应产生血红色配离子。3、UV吸收：VE的0.01%无水乙醇液：λmax=284nm,λmin=254nm.二.鉴别试验37医学ppt三、杂质检查检查游离生育酚:Ch.P取0.1g样品，按铈量法用Ce(SO4)2(0.01mol/L)滴定，以二苯胺为指示剂，消耗Ce(SO4)2液不得超过1.0ml。38医学ppt（一）铈量法

1、原理：VE用硫酸加热回流，水解成生育酚，用硫酸铈定量地氧化为对一生育醌，过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点。终点：亮黄→灰紫;空白试验.

2、反应条件（1）VE在H2SO4酸性条件下水解为宜。碱性溶液中游离生育酚易被氧化。Ce(SO4)2液滴定在酸性溶液中进行,如在碱性中会生成碱式盐而影响测定。（2）Ce(SO4)2溶于酸水溶液，不溶于醇,α-生育酚溶于酸而不溶于水,滴定过程中应有一定浓度的乙醇。（3）本法适用于纯度高的VE供试品。四.含量测定3