2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试历年高频考点参考题库专家版答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试历年高频考点参考题库专家答案（图片大小可自由调整）第1卷一.综合考核题库(共90题)1.主要用来提高扩增特异性的特殊PCR是A、反转录PCRB、Real-TimePCRC、巢式PCRD、反向PCR2.表达载体和基因工程克隆一般载体在元件构成上有何差别？3.植物基因工程的常用方法有哪些？4.载体5.反向PCR是以mRNA为模板进行的一类特殊PCR。6.试述免疫共沉淀技术的原理？7.基因工程的设计施工是在什么水平上进行的A、细胞B、组织C、分子D、原子8.催生基因工程技术诞生的关键技术是DNA转化技术的突破。9.pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于_______。10.Sanger双脱氧末端终止法胶板上的链就是模板链。11.评估基因文库完备性的数学公式是A、N=lg（P+1）/lg（f+1）B、N=ln（1-P）/ln（1-f）C、N=lg（1-P）/ln（1-f）D、N=lg（1-f）/ln（1-P）12.下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是A、Cosmid;YAC;PlasmidB、YAC;Cosmid;PlasmidC、Plasmid;YAC;CosmidD、Cosmid;Plasmid;YAC13.分离既定组织或者细胞的_____________是构建cDNA文库的首要步骤。14.YAC是至今最大容量的克隆载体。15.试述基因敲除技术的原理？16.经典的DNA测序方法有两种，即Sanger双脱氧末端终止法和_______________。17.向有功能缺陷的细胞补充相应功能基因，以纠正或补偿其基因缺陷，达到治疗的目的。这个过程叫做A、基因治疗B、基因置换C、基因修正D、基因激活18.westernblot杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体19.何谓转基因动物？20.常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是：A、DNA聚合酶B、T4DNA连接酶C、T4RNA连接酶D、RNA聚合酶21.第一个成功地用于基因工程的大肠杆菌质粒是pBR322质粒。22.下列哪种酶的发现是PCR反应能迅速发展和广泛应用的主要原因A、TaqDNA聚合酶B、核酸内切酶C、T4多核苷酸激酶D、S1核酸酶23.为了防止DNA的自身环化，可用_________去双链DNA_5’端的磷酸基团。24.外源基因(或DNA片段)插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。25.T4DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E．coli中分离的，这种连接酶A、催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源B、既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接C、是一种单肽酶，分子质量为74kDaD、既能催化单链DNA

连接又能催化双链DNA

连接

26.在基因工程中，可用碱性磷酸酶A、防止DNA的自身环化B、同多核苷酸激酶一起进行DNA的5’端标记C、制备突出的3’端D、催化DNA连接E、上述说法都正确27.YAC的最大容载能力是_______。28.对松弛型质粒描述正确的是A、在寄主细胞中拷贝数较多B、可用氯霉素扩增C、一般没有选择标记D、上述A、B

两项正确29.目前，严重危害人类健康和生命，其死亡率居各类疾病之首的是A、艾滋病B、心血管疾病C、恶性肿瘤D、血友病30.什么是动物乳腺生物反应器？31.大肠杆菌DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，A、将双链DNA分子中的5’磷酸基团同3’羟基基团末端重新形成磷酸二酯键B、作用时不消耗能量C、需要Mn2+等二价辅助离子D、也可以连接RNA分子32.关于II类限制酶说法正确的是A、具内切核酸酶和甲基化酶活性B、仅有内切核酸酶活性C、识别序列为回文对称结构D、II类限制酶反应条件只需要Mg2+E、II类限制酶反应需要Mg2+,ATP33.对Ti质粒描述正确的是：A、可从农杆菌转到植物细胞中B、作为双链DNA被转移C、在植物中导致肿瘤D、介导冠瘿碱的合成，作为细菌的营养物和植物的生长激素E、需要细菌的vir 基因帮助转移34.核酸杂交探针就是带有放射性标记的DNA分子。35.下面有关限制酶的叙述正确的是（）A、限制酶是外切酶而不是内切酶B、限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割C、同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D、一些限制酶在识别位点内稍有不同的位置切割双链DNA，产生黏末端E、一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端36.大肠杆菌DNA聚合酶I是应用最广也是研究最深入的DNA聚合酶。37.原位杂交是指A、菌落杂交B、液相杂交C、直接对染色体或组织杂交D、转膜杂交38.作为载体需要具备哪些功能？39.标记灵敏度高效果好的探针是A、32PB、地高辛C、生物素D、荧光素40.由于DNA是由四种碱基组成的，所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值应该是_________。41.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA或DNA分子。42.按质粒复制的调控及其拷贝数可分两类：严紧控制型质粒和_____________。43.T4DNA连接酶和E．coli连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为辅助因子。44.进行体外重组时，外源片段和载体分子之间的物质的量比值一般为A、（1-5）:1B、（3-10）:1C、1：（3-10）D、1：（1-5）45.显微注射技术一般是在显微镜下将目的DNA分子注射进入动物受精卵的哪一部位中，从而产生转基因动物A、雌原核B、雄原核C、极体D、核仁46.miRNA的检测方法A、Northern印迹杂交B、基因芯片C、qRT-PCR技D、原位杂交47.在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是A、限制酶和连接酶B、限制酶和水解酶C、限制酶和运载体D、连接酶和运载体48.限制性核酸内切酶切割DNA后产生A、5’磷酸基和3’羟基基团的末端B、3’磷酸基和5’羟基基团的末端C、5’磷酸基和3’磷酸基团的末端D、5’羟基和3’羟基基团的末端49.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫做A、基因文库B、基因库C、基因组文库D、cDNA文库50.用下列方法进行重组体的筛选可以说明外源基因进行了表达。A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、Western印迹D、原位菌落杂交51.基因工程中有三种主要类型的载体：_________、病毒DNA质粒和病毒DNA杂合体。52.基因重组只能通过人工进行。53.核酸分子杂交探针必须满足的条件不包括A、单链结构B、足够长度C、不含互补区D、只能是DNA54.生命科学发展的历史场合中，经历了从描述生物学、_________到创造生物学三个发展阶段。55.启动子56.用人工合成的含有所需碱基变化的寡聚核苷酸，可以将特殊突变引入克隆的基因。57.pSCl01是一种________复制的质粒。58.试述基因组文库的构建流程。59.噬菌体能够克隆多大的DNA片段A、5KbB、20kbC、30kbD、40kb60.常规PCR反应程序中，高温变性一般设置多高的温度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃61.克隆的进行依赖于各种参与DNA新陈代谢的_________的使用。62.下列用于Southern印迹转移的是：A、首先用限制性内切酶处理DNAB、酶切片段经琼脂糖电泳C、将DNA进行碱变性D、将DNA转移至硝酸纤维素膜E、硝酸纤维素膜经80℃真空干燥2-3小时63.用同一种酶切割载体和目的基因后进行连接，连接产物会含大量自身环化载体，采用下列哪种酶处理，可防止自身环化A、核酸外切酶B、核苷酸激酶C、末端转移酶D、碱性磷酸酶64.大肠杆菌作为外源基因表达系统的优点是A、繁殖迅速B、操作方便C、基因克隆机表达系统成熟完善D、全基因组测序完成E、被美FDA批准为安全的基因工程受体生物65.________技术是基于互补的DNA单链分子能够形成稳定双螺旋结构的天然特性而发展起来的。66.cDNA克隆较之基因组克隆最重要的优越性就是它们含有一个基因的完整序列。67.PCR是利用___________的原则，经过高温变性、低温复性、子链延伸的不断循环，选择性的特异扩增目的基因和目的DNA的一种方法。68.下列属于基因工程步骤的是（）A、提取目的基因B、目的基因与运载体结合C、目的基因导入受体细胞D、目的基因的表达69.迄今发现的质粒DNA都是环状的。70.Northern印迹和Southern印迹的基本原理是一样的，都是用于检测结构基因的表达。71.构建cDNA文库的首要步骤是A、分离既定组织或者细胞的DNAB、分离既定组织或者细胞的mRNAC、逆转录合成cDNAD、cDNA的克隆72.在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他的限制酶就不能切割了。73.请写出基因工程的基本操作顺序？74.常规PCR反应所用到的酶是()A、限制性核酸酶B、逆转录酶C、DNA连接酶D、Taq酶75.在利用LacZ失活的显色反应筛选法中，IPTG的作用是A、诱导宿主的ω肽的合成B、作为酶的作用底物C、作为显色反应的指示剂D、诱导宿主的α肽的合成76.T4DNA连接酶和E．coli连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。77.在_________的作用下，含目的基因的DNA片断与克隆载体连接成为重组DNA分子。78.从E.coli中分离的连接酶A、需要NAD作辅助因子B、可以进行平末端和黏性末端连接C、作用时不需要模板D、需要ATP

作辅助因子79.关于限制性内切核酸酶的来源及其天然存在的意义，下列哪种说法是正确的?A、来自噬菌体，具有抗微生物作用B、来自酵母菌，参与DNA复制C、来自细菌，有防御病毒侵染的意义D、来自噬菌体，用于复制病毒DNA80.基因操作的核心部分是_________。81.动脉硬化属于（）类型的疾病A、心血管疾病B、恶性肿瘤C、血友病D、艾滋病82.大肠杆菌表达系统是目前使用最为广泛的原核表达系统。83.下列不是Southern印迹步骤的是（）A、DNA与载体的连接B、用凝胶电泳分离DNA片段C、DNA片段转移至硝酸纤维素膜上D、用限制酶消化DNA84.Westernblot又称为RNA印迹法。85.质粒载体能够克隆多大的DNA片段A、20kbB、30kbC、40kbD、10Kb86.pBR322是一种改造型的质粒，含有两个抗性基因，其中四环素抗性基因来自A、ColElB、Ri质粒C、pSCl01D、pUCl887.同尾酶即识别位点不同但切出的DNA片段具有相同的末端序列。88.DNA重组连接的方法大致分为四种：①________；②平末端连接；③同聚物加尾连接;④接头/连接子连接。89.请叙述反转录PCR的含义。90.什么是S1核酸酶作图(S1nucleasemapping)？第1卷参考答案一.综合考核题库1.正确答案:C2.正确答案:表达载体：启动子、终止子、核糖体结合位点（SD序列）、筛选标记、复制子、多克隆位点；克隆载体：筛选标记、复制子、多克隆位点。3.正确答案:农杆菌介导法；原生质体法；植物病毒DNA介导法；基因枪法；显微注射法；脂质体介导法；电穿孔法；微激光束法；花粉管导入法。4.正确答案:基因工程中，携带外源目的基因或DNA片段进入宿主细胞进行复制和表达的工具。5.正确答案:错误6.正确答案:以抗体和抗原之间的相互作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。7.正确答案:C8.正确答案:错误9.正确答案:pMBl10.正确答案:错误11.正确答案:B12.正确答案:B13.正确答案:mRNA14.正确答案:正确15.正确答案:是一种遗传工程技术，针对某个序列已知但功能未知的序列，改变生物的遗传基因，令特定的基因功能丧失作用，从而使部分功能被屏蔽，并可进一步对生物体造成影响，进而推测出该基因的生物学功能。16.正确答案:化学降解法17.正确答案:A18.正确答案:C19.正确答案:指利用基因工程技术，将人们想要研究的基因在动物体实现表达。20.正确答案:B21.正确答案:错误22.正确答案:A23.正确答案:碱性磷酸酶24.正确答案:错误25.正确答案:B26.正确答案:A,B27.正确答案:1000kb28.正确答案:D29.正确答案:C30.正确答案:能够分泌乳汁的转基因动物生产其他来源的基因产品，并通过乳腺分泌出来。31.正确答案:A32.正确答案:B,C,D33.正确答案:A,C,D,E34.正确答案:错误35.正确答案:B,C,D,E36.正确答案:正确37.正确答案:A38.正确答案:为外源基因提供在受体细胞中的复制和整合能力；为外源基因提供进入受体细胞的转移能力；为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力，外源基因的扩增依赖于载体分子在受体细胞中高拷贝自主复制的能力。39.正确答案:C40.正确答案:4n41.正确答案:正确42.正确答案:松弛控制型质粒43.正确答案:错误44.正确答案:B45.正确答案:B46.正确答案:A,B,C,D47.正确答案:A48.正确答案:A49.正确答案:A50.正确答案:B51.正确答案:质粒DNA52.正确答案:错误53.正确答案:D54.正确