小孢子淀粉测定

/中文文献：1、花蕾中淀粉及可溶性糖含量的测定：3,5-二硝基水杨酸法——用体积分数80%乙醇提取可溶性糖，酸水解法将淀粉水解为还原糖。提取或水解的产物与3,5-二硝基水杨酸试剂供热后在520nm波长下测定光密度值，通过计算还原性糖含量来算出可溶性糖及淀粉含量。乙醇提取硫酸蒽酮法：称取50～100mg粉碎过100目筛的烘干样品，置于15mL刻度试管中，加入6～7mL80％乙醇，在80℃水浴中提取30min，取出离心（3000rpm）5min，收集上清液。重复提取两次（各10min）同样离心，收集三次上清液合并于烧杯，置于85℃恒温水浴，使乙醇蒸发至2～3mL，向沉淀中加蒸馏水3mL，搅拌均匀，放入沸水浴中糊化15min。冷却后，加入2mL冷的9.2mol/L高氯酸，不时搅拌，提取15min后加蒸馏水至10mL，混匀，离心10min，上清液倾入50mL容量瓶。再向沉淀中加入2mL4.6mol/L高氯酸，搅拌提取15min后加水至10mL，混匀后离心10min，收集上清于容量瓶。然后用水洗沉淀1～2次，离心，合并离心液于50mL容量瓶用蒸馏水定容供测淀粉用。英文文献：1、SucroseandstarchcatabolismintheantherofLiliumduringitsdevelopmentacomparativestudyamongtheantherwall,locularfluidandmicrosporepollenfractions分别在花粉的不同发育阶段的不同部分测定淀粉含量。除Xuid室外，用研钵将不同组分在氮气预冷液研磨均匀。对于每个样品，取0.1g粉末放入1.5ml离心管中，并加入1mL的0.1M（？）的磷酸钠盐缓冲液（pH约为7.5），4℃、1000转离心15min。吸取上清液用于测定可溶性糖（见下）；沉淀物用1mL的二甲基亚砜：8N（？）盐酸（4:1）再次悬浮，然后60℃水浴加热30min，并不断搅拌。离心（1200转）15min后，吸取100微升上清液，加入100微升Lugol酸性碘溶液（0.06%（w/v）的钾化碘和0.003%（w/v）碘的005N的盐酸溶液）和1mL的重水。将样品放置室温下约15min后在600nm的吸光度下检测。另一方面，在花粉发育的各个时期葡萄糖、果糖和蔗糖通过德国造的ScilDiagnosticsGmbH,Viernheim装置检测。这样，上清液和Xuid室中所含的可溶性糖便可检测出。淀粉和可溶性糖的单位均为mg/g（花粉鲜重）。2、AntherstarchvariationsinLiliumduringpollendevelopment新鲜花粉和同花的花芽在室温下用Fontainebleau砂和二甲基亚砜：8N盐酸（8:2）的混合物研磨2分钟，然后60℃加热30分钟并不断搅拌使花粉完全溶解。用30ml蒸馏水冷却后，过滤并将滤液稀释至100ml。吸取100微升的样品用于淀粉含量的检测。在淀粉葡萄糖苷酶的作用下，淀粉水解为葡萄糖。葡萄糖被己糖激酶磷酸化葡糖-6-磷酸，接着在NADP的作用下氧化为葡糖-6-磷酸盐，同时通过葡糖-