对氨基苯甲酸酯类药物分析

对氨基苯甲酸酯类药物分析第1页，课件共58页，创作于2023年2月分类与典型药物理化特征鉴别试验杂质检查含量测定本章内容第2页，课件共58页，创作于2023年2月化学结构：1.亲脂性芳香环2.中间连接功能基3.亲水性胺基对氨基苯甲酸酯类酰苯胺类第3页，课件共58页，创作于2023年2月第一节对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的结构与性质一、对氨基苯甲酸酯类基本结构与典型药物第4页，课件共58页，创作于2023年2月苯佐卡因（benzocaine）盐酸丁卡因（tetracainehydrochloride）第5页，课件共58页，创作于2023年2月盐酸普鲁卡因胺（procainamidehydrochloride）盐酸普鲁卡因（procainehydrochloride）第6页，课件共58页，创作于2023年2月二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物基本结构第7页，课件共58页，创作于2023年2月盐酸利多卡因（lidocainehydrochloride）盐酸布比卡因（bupivacainehydrochloride）第8页，课件共58页，创作于2023年2月盐酸罗哌卡因第9页，课件共58页，创作于2023年2月

1.芳伯氨基特性：对氨基苯甲酸酯类结构中有芳伯氨基，发生重氮化-偶合；与芳醛缩合；易氧化变色。盐酸丁卡因无此特性。酰苯胺类分子结构中含有芳酰氨基，酸水解后显芳伯氨基的特性反应。注意空间位阻的影响。

三、主要理化性质第10页，课件共58页，创作于2023年2月2.水解特性：对氨基苯甲酸酯类分子结构中的酯键易水解，除盐酸丁卡因水解产物为对丁基苯甲酸外，其余均为对氨基苯甲酸(PABA)。3.弱碱性：该类药物分子结构中含有脂烃胺侧链为叔胺氮原子，具有一定碱性，可成盐；可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可相互区别。4.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因分子结构中酰氨基上氮可与Cu2+或Co2+络合，生成有色配位化合物沉淀。第11页，课件共58页，创作于2023年2月5.吸收光谱特性：含有苯环及取代基，具有特征的紫外光谱与红外光谱行为。6.其它特性：因结构中有芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。第12页，课件共58页，创作于2023年2月第二节鉴别试验

一、重氮化—偶合反应

分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生此反应。第13页，课件共58页，创作于2023年2月

直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺。丁卡因虽无芳伯氨基，但可与NaNO2反应生成N－亚硝基化合物的乳白色沉淀。

第14页，课件共58页，创作于2023年2月苯佐卡因、盐酸普鲁卡因鉴别方法：本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录III）

取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。第15页，课件共58页，创作于2023年2月第16页，课件共58页，创作于2023年2月二、与金属离子反应1.盐酸利多卡因的鉴别方法

（与铜离子反应）蓝紫色转入氯仿中显黄色第17页，课件共58页，创作于2023年2月方法（ChP2010）

[鉴别]取本品0.2g，加水20ml溶解取溶液2ml，加硫酸铜试液0.2ml与碳酸钠试液1ml，即显蓝紫色；加三氯甲烷2ml，振摇后放置，三氯甲烷层显黄色。第18页，课件共58页，创作于2023年2月亮绿色细小钴盐沉淀（与钴离子反应）第19页，课件共58页，创作于2023年2月盐酸利多可因加硝酸酸化，加硝酸汞，加热，显黄色。对氨基苯甲酸酯类显红色或橙黄色。第20页，课件共58页，创作于2023年2月2.盐酸普鲁卡因胺的鉴别方法基于普鲁卡因胺分子中的芳酰胺结构。紫红色暗棕色棕黑色第21页，课件共58页，创作于2023年2月三、水解产物反应1.盐酸普鲁卡因的鉴别盐酸普鲁卡因+NaOH→白色↓（普鲁卡因）第22页，课件共58页，创作于2023年2月普鲁卡因油状物蒸气湿润红色石蕊试纸变蓝对氨基苯甲酸钠+HCl白色↓+过量HCl溶解第23页，课件共58页，创作于2023年2月方法（ChP2010）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。第24页，课件共58页，创作于2023年2月2.苯佐卡因的鉴别方法（ChP2010）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。第25页，课件共58页，创作于2023年2月四、制备衍生物测熔点

盐酸丁卡因：取本品0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤后，在80℃干燥，熔点为131℃。第26页，课件共58页，创作于2023年2月五、吸收光谱特征

1.紫外吸收光谱：分子结构中含有苯环2.红外吸收光谱：利用化合物结构中特殊基团的振动和转动等红外活性振动产生的红外吸收峰对药物进行鉴别的方法。第27页，课件共58页，创作于2023年2月第28页，课件共58页，创作于2023年2月第三节特殊杂质与检查一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查杂质来源：分子结构中含有酯键，可发生水解。注射液制备过程中受灭菌温度、时间、溶液pH、贮藏时间以及光线和金属离子影响，易水解。第29页，课件共58页，创作于2023年2月（为什么要检查？）ChP2010规定盐酸普鲁卡因及其注射液以及注射用盐酸普鲁卡因均需要检查对氨基苯甲酸。第30页，课件共58页，创作于2023年2月检查方法（ChP2010）：HPLC限量:盐酸普鲁卡因原料药以及注射用灭菌粉末中对氨基苯甲酸不得超过0.5%。盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸不得超过1.2%。第31页，课件共58页，创作于2023年2月Agillent安捷伦Waters沃特斯Bruker布鲁克Varian瓦里安AB美国应用生物系统Shimadzu岛津Finnigan菲尼根第32页，课件共58页，创作于2023年2月二、盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查杂质来源：在生产和贮藏过程中，其注射液在一定的灭菌时间、温度和pH条件下，更易发生水解反应，生成4-氨基-2-氯苯甲酸降解产物。检查方法（USP34-NF29）：HPLC限量：4-氨基-2-氯苯甲酸≦0.625%4-氨基-2-氯苯甲酸注射液≦3.0%第33页，课件共58页，创作于2023年2月三、盐酸利多卡因注射液中2，6-二甲基苯胺及其他杂质的检查杂质来源：生产和贮藏过程中水解。第34页，课件共58页，创作于2023年2月检查方法（ChP2010）：HPLC限量：2，6-二甲基苯胺≦0.04%

其他各杂质≦1.0%第35页，课件共58页，创作于2023年2月第四节含量测定亚硝酸钠滴定法非水溶液滴定法紫外分光光度法高效液相色谱法第36页，课件共58页，创作于2023年2月一、亚硝酸钠滴定法本类药物分子结构中具有芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中可与亚硝酸钠反应，可用亚硝酸钠滴定法测定含量。

第37页，课件共58页，创作于2023年2月ChP2010中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和注射用盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺及其片剂与注射剂，可直接采用本法测定含量。第38页，课件共58页，创作于2023年2月1.基本原理：芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示反应终点。第39页，课件共58页，创作于2023年2月2.滴定法（ChP2010）：取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（1→2）15ml，置电磁搅拌器上，搅拌使溶液，再加溴化钾2g，插入铂-铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。第40页，课件共58页，创作于2023年2月3.测定的主要条件(1)加入适量的溴化钾加快反应速度：重氮化反应机制：反应速度取决于：溶液中芳伯氨基的浓度和NO+的浓度（第一步）第41页，课件共58页，创作于2023年2月KBr+HClHBr+KClHNO2+HBrNOBr+H2OKHBr∵KHBr比KHCl大300倍

∴生成NOBr量大得多∴加快重氮化反应速度加入溴化钾（ChP2010规定加入2g）HNO2+HClNOCl+H2OKHCl第42页，课件共58页，创作于2023年2月(2)加过量盐酸加速反应：因胺类药物盐酸盐溶解度﹥硫酸盐①重氮化反应速度加快②重氮盐在酸性溶液中稳定③防止生成偶氮氨基化合物芳胺与盐酸摩尔比1：2.5～6偶氮氨基化合物第43页，课件共58页，创作于2023年2月(3)反应温度：温度过高，可使亚硝酸逸失，并可使重氮盐分解：

Ar—N2+Cl-+H2O→Ar—OH+N2↑+HCl

滴定应在室温（10－30℃）条件下滴定，其中15℃以下结果准确。第44页，课件共58页，创作于2023年2月(4)滴定速度：滴定速度不宜太快。为了避免滴定过程中亚硝酸挥发和分解，滴定时宜将滴定管尖端插入液面下约2/3处滴定，一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入，后将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗，再缓缓滴定。“先快后慢”第45页，课件共58页，创作于2023年2月4.指示终点的方法(1)永停滴定法：ChP2010全部采用该法。永停滴定仪第46页，课件共58页，创作于2023年2月外指示剂法

用KI-淀粉指示剂指示终点的原理：

2NaNO2+2KI+4HCl

2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

第47页，课件共58页，创作于2023年2月(3)电位法：Pt-饱和甘汞电极(4)内指示剂法：中性红，蓝紫色→纯蓝色第48页，课件共58页，创作于2023年2月例：盐酸普鲁卡因含量测定方法（ChP2010）

取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法，在15－25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HCl。第49页，课件共58页，创作于2023年2月计算：精密称取盐酸普鲁卡因0.5207g，按永停滴定法,在15～25℃用亚硝酸钠滴定液（0.1022mol/L）滴定到终点，用去亚硝酸钠滴定液18.52ml.已知,每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的盐酸普鲁卡因。求盐酸普鲁卡因的百分含量？第50页，课件共58页，创作于2023年2月二、非水溶液滴定法ChP2010采用本法测定盐酸布比卡因含量。原理：盐酸布比卡因侧链哌啶环上的叔氮原子具有弱碱性，可采用非水溶液滴定法测定含量。第51页，课件共58页，创作于2023年2月溶剂：冰醋酸-醋酐溶液因其在冰醋酸中碱性弱，加醋酐可增加其碱性。醋酐解离生成的醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的酸性强，利于碱性增强，滴定突跃敏锐。滴定液：高氯酸（0.1mol/L）第52页，课件共58页，创作于2023年2月第53页，课件共58页，创作于2023年2月三、紫外分光光度法ChP2010采用紫外分光光度法测定注射用盐酸丁卡因的含量第54页，课件共58页，创作于2023年2月四、高效液相色谱法ChP2010采用该法测定盐酸利多卡因注射液的含量。第55页，课件共58页，创作于2023年2月练习1.亚硝酸钠滴定法指示终点的方法有若干，ChP2010采用的方法为A.电位法B.外指示剂法