实验室基本操作课件

实验室的基本操作质保部培训系列讲座（第一讲）主讲人：张玉彦主要内容1.常用玻璃仪器及使用2.常用试液、缓冲液和指示液的配制5.有效数字及其运数规则4.称量3.过滤、加热与干燥6.分析误差一、常用玻璃仪器及使用1、精密玻璃量器的种类滴定管、容量瓶、单标线移液管、微量注射器、温度计等；精密玻璃量器必须经过计量部门或本单位具有计量资质的检验人员校验合格后方可使用。2、精密玻璃量器的使用酸式滴定管的使用使用前先用滴定液将滴定管涮洗三遍，再加滴定液至“0”刻度以上，垂直固定好滴定管约静止2min左右后调零。注意：管尖气泡的排出。左手空握住活塞并使活塞的细端对着掌心，拇指、无名指和小指在滴定管的前面，中指和食指在后面，由拇指、中指和食指控制活塞的旋转，滴定过程中注意控制滴定液的流出速度。碱式滴定管的使用

操作基本同上，不同的是管口气泡的排出，应将尖嘴管的尖端斜向上，用拇指和食指通过对滴定管下端乳胶管内玻璃珠的挤压进行气泡排出，手指挤压的位置一定是玻璃珠的中上部，否则手指松开后易倒吸一小部分空气，影响最终读数的准确度。滴定管的选择：

A级滴定管的容量允差仅为B级的二分之一，在滴定分析要求较高时应选用A级。

同等级滴定管规格越大，容量允许误差也越大，因而选用适当规格的滴定管，可减小量器的误差，提高量器的准确度。例如：50mlB级滴定管允差为±0.10ml，而10mlB级滴定管允差有±0.050ml。假如滴定时耗用5ml溶液，则使用10ml滴定管的相对误差为1%，而50ml的为2%，相差1倍。同时，还因为10ml滴定管的内径比50ml的要小得多，其读数误差相应也小，所以应选10ml滴定管。容量瓶的使用

配制溶液：

通常可将称量的固体置于烧杯中加稀释剂溶解，然后将溶液定量转移至容量瓶中，再用稀释剂定容至刻度。若是固体极易溶解，且溶解热效应较小，也可以通过小漏斗直接把固体转移到容量瓶中溶解。当水加到量瓶容积的1/2～3/4时，旋摇量瓶（注意不要倒置），使溶液混合，再继续加水至距标线约1cm处，静置2分钟，让瓶颈上的液体流下，然后用滴管从标线以上1cm处慢慢加入稀释剂至标线与弯液面相切处，盖上瓶塞，倒置量瓶，摇动数次，然后再倒过来摇动数次，如此反复多次，直至混匀。

配制有色溶液时，因最后加的水至溶液上层，尚未混合，其弯液面依然十分清晰，故液面调定与上述方法相同。

若用量瓶稀释溶液，先用移液管移取一定体积的溶液放入量瓶，再用水稀释到距标线1cm处，静置2分钟，让瓶颈上的液体流下，再按上述方法调定液面。

热溶液须冷却至室温后，才能稀释并调定液面。

使用前必须清洗干净，用滤纸将尖端内外的水除去，然后用待吸溶液洗三次，洗过的溶液应从流液口放出弃之。

吸取溶液时，管尖应深入液面10-20mm，并随液面下降而下降，用洗耳球在移液管另一侧将液体吸入管中，（切忌用嘴吸）吸液时不要让液面升得太高，使管壁沾附过多的液体，以免在调定液面和排液时流下来，影响容量的准确度。单标线移液管的使用调定液面或放液时吸管均应垂直放置，其流液口与容器内壁相接触，接受容器须倾斜30°～45°。为保证液体完全流出，要等待约15秒钟，方可拿开。

吸管内的溶液按规定方法排出后，移液管尖嘴的残留液，如果移液管上没有标明“吹”的字样，不能排到接受容器中。刻度吸管的使用使用前的清洗：刻度吸管在使用前应清洗干净，并用吸水纸将尖端内外的水吸去，然后用待吸溶液洗三次。吸液：吸管取液时，管尖应深入液面10-20mm处，并随液面下降而下降。3、一般玻璃仪器的使用零位在上的吸管，溶液吸到零位上几毫米处，零位在下的吸管，吸至需移取容积所对应的刻度线上面几毫米处，然后将液面调到该刻度线上，使液面与刻度线相切。注意在吸液时，不要让液面吸得太高，使非计量部分的内壁沾附液体过多。调定液面：调定液面时，吸管应垂直，管尖与瓶壁相接触，瓶壁倾斜约30º，微微松动手指，使溶液缓缓沿壁流下至需调定的刻度线相切位置时，立即按紧手指，放下接水杯，用滤纸将刻度吸管外壁擦干净，然后放到所需的容器中。不得在吸管悬空时调定液面。排液：排液时，吸管要垂直，管尖与容器壁接触，容器倾斜约30º，使溶液沿壁流下。不得在吸管悬空时排液。取用一般的水溶液时，按照吸管的容量定义排液，可提高准确度，不能不分型式都将管内残留液吹出，以免带来误差。刻度吸管用毕后应放在吸管架上，如短时间内不再用它吸取同一溶液，应及时清洗，然后放在吸管架上。注意不要把吸管尖或流液口碰坏，否则不能继续使用，以免造成误差。量筒的使用量筒按结构分为具塞量筒和无塞量筒。具塞量筒为量入式量筒，无塞量筒有量入式和量出式两种。量入式量筒：用法标记为“In”，用于精度要求不高的配液。量出式量筒：用法标记为“Ex”，用于液体的粗量。量筒的容量：指在20℃时，量入、量出的容量。量入式量筒：将水注入干燥量筒内至所需分度线的额定的体积，即为该分度线的容量。量出式量筒：将水注入量筒所需分度线，然后倒出，并倒置30秒后所排出水的体积，即为该分度线的容量。使用时，应根据需要选用适当规格的量筒，规格越大，筒径越大，其容量误差也越大。应根据量筒上的量入或量出标记区别使用，量入式只用于量入测量，量出式只用于量出测量。量筒的液面较大，观察和调定液面时，量筒应与水平面垂直，否则带来很大误差。4、其他常用玻璃仪器名称主要用途使用注意事项锥形瓶滴定分析使用的反应容器，用于加热处理样品在电热套中可直接加热，在电炉上应垫上石棉网，使其受热均匀，不可干烧。烧杯配制溶液、溶解样品、溶液周转等同上圆底烧瓶加热或蒸馏液体同上名称主要用途使用注意事项凯氏烧瓶消解有机化合物在通风橱内用电热套可直接加热，在电炉上应垫上石棉网加热，瓶口不可对人。称量瓶矮型：在烘箱中烘烤基准物质，测定干燥失重；高型：盛放标准缓冲液烘烤时，磨口塞子不可盖严，磨口塞子要原配。名称主要用途使用注意事项试剂瓶盛放配制好的试液，其中对光不稳定的试液盛放在棕色瓶中不可加热，不可用于配制溶液，磨口塞子要原配。漏斗过滤分离沉淀不可加热分液漏斗分开两种互不混溶的液体；萃取操作。磨口塞子要原配，不可加热，不能漏液名称主要用途使用注意事项试管离子或官能团的鉴别可以直火加热，不可骤冷，加热时管口勿对人比色管半定量比色分析磨口塞子要原配，不可加热，保持管壁透明吸滤瓶抽滤时接受液体厚壁容器，耐负压，不可加热名称主要用途使用注意事项砂芯玻璃漏斗过滤滤纸无法过滤的腐蚀性液体等必须抽滤，不可骤冷或骤热，不可过滤与玻璃能发生化学反应的物质。砂芯玻璃坩埚重量分析法中，过滤和烘干需要称量的沉淀同上标准磨口组合式玻璃仪器有机化学合成反应，蒸馏、回流等操作除减压蒸馏外，安装时磨口处需涂沫润滑剂，仪器部件之间应按其本身的角度进行安装，不可存在应力。名称主要用途使用注意事项干燥器在冷却过程中保持干燥或灼烧的物质的干燥；也可以干燥制备少量的样品。底部变色硅胶或其他干燥剂，盖子的磨口处应涂适量的凡士林；不可将红热的样品放入；放入较热的样品后，应将盖子开启一个小缝隙，以免盖子跳起。研钵将块状固体试剂或样品研磨成细小颗粒不可撞击，不可烘烤，不可研磨与玻璃能发生化学反应的物质名称主要用途使用注意事项直形冷凝管冷却蒸馏出沸点在140℃以下的液体不可骤冷，冷却水从下进上出空气冷凝管冷却蒸馏出沸点在140℃以上的液体不可骤冷球形冷凝管回流操作不可骤冷，冷却水从下进上出二、常用试液、缓冲液和指示液的配制常用酸溶液的配制

配制时一定要将浓酸缓缓地倒入水中，绝不可将水倒入浓酸中。碱溶液的配制

碱在称量时应用烧杯称取，溶解时易放热，应待热溶液冷却后再定容或转移至塑料瓶中。

配制氨水溶液时，用量筒量取所需的浓氨水，在搅拌下，用水稀释到所需的体积。盐溶液的配制配制易水解的盐溶液时，应加入少量与盐的酸根离子一样的酸，如配制FeCl3时加入少量的盐酸。常用缓冲液的配制

缓冲液一般是由浓度较大的弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸组成。配制可参见药典附录。

标准缓冲液的有效期为3个月。指示剂与指示液的配制

配制可参见药典附录。过滤的分类与操作三、过滤、加热与干燥常压过滤减压过滤热过滤加热的种类与适用范围常用热源的使用范围热源名称使用范围注意事项酒精灯加热温度在400－450℃，适合加热试管、小的烧杯或烧瓶。或是生物学实验中接种棒、瓶口等的灭菌。酒精量不超过其容积的2/3，也不少于1/4；被加热的器皿不可对着人，而且要用其外焰加热，不可触及灯芯；要用火柴点燃，不可互相对点；使用完毕，用灯帽盖灭火焰，禁止嘴吹；室内有可燃性气体时禁止使用。热源名称使用范围注意事项酒精喷灯加热温度在700－800℃，适合加热玻璃管（棒）等，用于玻璃的弯曲、拉伸。酒精量不超过其容积的2/3，也不少于1/4；被加热的器皿不可对着人，而且要用其外焰加热，不可触及灯芯；要用火柴点燃，不可互相对点；使用完毕，用旋钮将火焰熄灭，室内有可燃性气体时禁止使用；使用喷灯时，周围不得有易燃易爆物品。热源名称使用范围注意事项电热恒温水浴锅加热温度在室温－100℃，适合不太高温度的加热及产生可燃性气体反应的加热。不可干烧电炉加热温度在400－450℃，垫上石棉网后可加热烧杯、烧瓶、锥形瓶、坩埚等。加热产生挥发性气体的样品时，要在通风橱内进行；注意用电安全；室内有可燃性气体时禁止使用；不可将水、溶液、试剂等洒在电炉上。热源名称使用范围注意事项电热套加热温度在400－500℃，可加热烧杯、锥形瓶或烧瓶等。加热产生挥发性气体的样品时，要在通风橱内进行；注意用电安全；不可将水、溶液、试剂等洒在电热套里。电热恒温干燥箱加热温度在300℃以内，适合烘烤样品、对照品、基准品、变色硅胶和快速干燥普通的玻璃器皿等。不可加热产生有毒、有害及可燃性气体的物质；不可加热塑料制品；做干燥失重时，称量瓶的磨口盖要打开。热源名称使用范围注意事项马弗炉加热温度在100－1100℃，适合需要200℃以上的烘烤操作；如产生无机物沉淀的重量法或炽灼残渣的测定。安装在坚固、平稳的台面上；注意用电安全；不可加热产生有毒、有害及可燃性气体的物质；不可加热塑料制品。减压恒温干燥箱加热温度在260℃以内，适合烘烤样品、对照品和基准品。除了与电热恒温干燥箱具有相同的内容外，本设备所用的真空泵前面应安装保护装置。实验室常用的称量工具

托盘天平

分析天平四、称量分析天平的安装要求天平室避免阳光直射，基本干燥、尽量无尘、清洁，无震动、无磁场及气流的扰动等；天平室周围的房间不应有电梯、机电设备、排风设备及制水设备等；天平室的温度保持在15－25℃，相对湿度在45%－65%；电源应相对稳定，必要时应安装稳压电源。天平的性能指标

灵敏度

在天平一侧的称量盘上增加1mg游码时，天平指针偏离平衡点的格数（分度数）。单位：格/mg或分度/mg，以字母E表示。

感量灵敏度的倒数，指天平指针偏离平衡位置一个格（分度）时所需要的质量。单位：mg/格或mg/分度，以字母S表示。天平的稳定性

处于平衡中的天平横梁经扰动离开平衡位置后，仍能够恢复原位的性能。

天平的相对精度

天平的感量（名义分度值）与其最大载荷之比。天平的分类：

摆动式天平

摆动式机械天平

摆动式空气阻尼天平

双盘半机械加码电光天平

电光天平双盘全机械加码电光天平

单盘全机械加码电光天平

电子分析天平（10级）

精度级别12345相对精度1×10－72×10－75×10－71×10－62×10－6精度级别678910相对精度5×10－61×10－52×10－55×10－51×10－4称量的操作方法

减量法

增量法注意事项：称量时不可开启空调；称量时开关门应轻缓，并佩戴相应的称量手套；增加减法码时，应使用专用镊子夹取，每个天平只能使用其专用法码；称取吸湿性、挥发性或腐蚀性物品时应置合适的容器中称量，且快速称取；称样量应在天平称量范围内，超过最大载荷易损坏天平；电子分析天平不能称量有磁性或带静电的物品。五、有效数字及其运算规则

有效数字是指在检测工作中实际上能够测量到的数字。“四舍、六入、五留双”有效数字的运算规则：p64

六、分析误差误差：分析结果（测量值）与真实值之间的差值。准确度：是指分析检验结果与真实值的接近程度；精密度：是指在相同的条件下，多次检测结果互相接近的程度。误差的表示方法：绝对误差：绝对误差E=检测值X－真实值T相对误差：对于多次检测的数值：实际检验工作中，真实值往往是不知道的，所以常用多次检测结果的平均值代替真实值，求出的结果便是偏差，所以公式如下：相对平均偏差、标准偏差与相对标准偏差：附：药品分析中常用术语关于水温的表达术语：