细菌耐药现状与抗生素的应用

关于细菌耐药现状与抗生素的应用第1页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三一、细菌耐药的现状

1.

肺炎链球菌肺炎链球菌的耐药性增加是一个全球性的趋势。在美国，90年代，耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）仅10％，不到10年则升至50％以上。在我国，肺炎链球菌对青霉素的耐药率平均为5％，而广州地区高达11.8％。目前，肺炎链球菌对磺胺类、大环内酯类和四环素类的耐药率已很高，并且在不断地上升。见图－1和图－2第2页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三在美国耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）的耐药率

图－1第3页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三我国肺炎链球菌对青霉素的

耐药率

图－2第4页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三

葡萄球菌耐药性2.

葡萄球菌耐甲氧西林葡萄球菌（MRS），包括耐甲氧西林金葡菌（MRSA），临床分离的葡萄球菌中，其比例一直呈现逐年上升的趋势，在欧美国家已升至近年的60％～85％。在我国，1999年，上海、广州、武汉和北京的MRS的检出率分别达到70％、45％、28％、和50％。上海检测显示，MRSA、耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）和凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCN）的检出率分别为64.5％、84.2％和72.7％，而MRSA和MRSE对万古霉素依然敏感（100％）。美国和日本已出现了耐万古霉素的金黄色葡萄球菌（VRSA），而我国目前尚未发现。见图－3和图－4第5页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三

耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）

耐甲氧西林金葡菌（MRSA）图－3

第6页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三上海检测出耐药葡萄球菌第7页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三

大肠杆菌与克雷伯氏菌耐药性

3.1根据广州地区13家三甲医院1999年～2000年分离的菌株数量来看，大肠杆菌和克雷伯氏菌（即容易产生超广谱β－内酰胺酶（ESBLS）的细菌）的比率占大部分，其中产ESBLSR比率逐年上升。总发生率由1999年的35.8％升至2000年的49％。对多数抗生素来说这两种菌的敏感率呈下降趋势，其中产ESBLS的敏感率更低。图－5第8页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三大肠杆菌对喹诺酮类药物的

耐药现象3.2大肠杆菌对喹诺酮类药物的耐药现象已十分严重。近十年来，我国大肠杆菌对环丙沙星的耐药率从3％左右升50％以上，而各种喹诺酮类药物（包括新一代的喹诺酮类）之间交叉耐药程度也极严重。根据全国细菌耐药监测协作组的报告，1998～1999年大肠杆菌对环丙沙星、氧氟沙星、司帕沙星、曲线沙星的耐药率分别为58.7％、60.7％、65.6％、67.4％。图－6第9页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三大肠杆菌与克雷伯氏菌耐药率图－5第10页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三1998～1999年大肠杆菌对喹诺酮类的耐药率图－6第11页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三

质粒介导的产β－内酰胺酶（AmpC）细菌

4.质粒介导的产β－内酰胺酶（AmpC）细菌AmpC酶常见于枸橼酸杆菌、肠杆菌属、沙雷氏菌、奇异变形杆菌等，往往在抗生素使用过程中产生，第三代头孢菌素即使对少量的AmpC也无能为力。我国细菌流行分布及耐药监测的结果显示马斯平对易产诱导酶的肠杆菌属的细菌总体敏感率仅为74％，对典型代表株阴沟肠杆菌的敏感性仅71％，AmpC酶对β－内酰胺类抗生素／酶抑制剂复合物也耐药，但对碳青霉烯类抗生素高度敏感。图－7第12页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三质粒介导的产β－内酰胺酶（AmpC）细菌的药敏性图－7第13页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三嗜麦芽窄食单胞菌是院内感染的重要病原菌5.嗜麦芽窄食单胞菌是院内感染的重要病原菌，且临床分离率逐年增高。本菌对几乎所有β－内酰胺类包括碳青霉烯类抗生素均不敏感，对其敏感率相对较高的有复方新诺明（87.1％）、替卡西林／克拉维酸（69.0％）和二甲胺四环素。图－8第14页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三嗜麦芽窄食单胞菌敏感率图8第15页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三

流感嗜血杆菌对复方新诺明和四环素有耐药性

6.流感嗜血杆菌根据北京、上海、广州三地区的耐药监测结果，流感嗜血杆菌对β－内酰胺类抗生素还非常敏感，只对复方新诺明和四环素的耐药性增高。图－9第16页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三流感嗜血杆菌对药物的敏感性图－9第17页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三二、细菌耐药性的产生

（一）细菌的耐药性迅速发展的原因

不合理使用抗生素是导致耐药细菌增加和细菌耐药性增强的原因。细菌的每一种耐药机制都由不同的耐药基因所控制，这些耐药基因可由突变产生，也可以通过增殖过程垂直传播，或者通过质粒、噬菌体、转座子等可移动的遗传物质在相同或不同种属细菌间水平传播。环境中细菌耐药基因的存在和抗菌药物的使用是影响细菌耐药性形成和发展的两个主要因素。在耐药基因存在的前提下，不合理使用抗生素使细菌中的耐药亚群逐渐发展成为优势群，最终导致耐药菌的大量出现。在经济发达地区，过度用药（过高档次、过长疗程、或不必要的用药）是导致耐药菌增加的主要原因；在经济不发达地区，用量不足（剂量不足、疗程过短、阶梯式用药或使用假冒伪劣药品）也同样可以导致耐药细菌的扩散。此外，抗生素在畜牧、水产养殖和农业方面的滥用也是导致细菌耐药性增强的重要原因。第18页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三第三代头孢菌素的滥用将导致细菌的高度耐药性自从第三代头孢菌素被广泛应用以来，细菌耐药性发展比以往任何时期更迅速，更猛烈。第三代头孢菌素的过度使用或滥用将导致细菌的高度耐药性，无论是G＋菌或G—菌。这种耐药几乎对所有的β－内酰胺抗生素都耐药。第19页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三

（二）细菌耐药性的生物化学机制

1.

灭活酶和钝化酶的产生：（1）

β－内酰胺酶：质粒介导或染色体突变使细菌产生β－内酰胺酶（主要有ESBL和AmpC酶）。通过水解或非水解方式破坏内酰胺环，导致抗生素失活。碳青霉烯类药物有效地克服了细菌灭活酶产生的耐药性。第20页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三(2)氨基糖苷类钝化酶(2)氨基糖苷类钝化酶：革兰氏阴性杆菌、金黄色葡萄球菌和肠球菌等可产生钝化酶，例如：乙酰转移酶（AAC）、磷酸转移酶（APH）、核苷转移酶（AAD），它们可以灭活此类抗生素。第21页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三(3)氯霉素乙酰转移酶(3)氯霉素乙酰转移酶：某些革兰氏阴性杆菌、葡萄球菌、D群链球菌可产生氯霉素乙酰转移酶，使氯霉素失去抗菌活性。第22页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三(4)红霉素酯酶(4)红霉素酯酶：革兰氏阴性杆菌如大肠埃希菌中可分离到红霉素酯酶，水解红霉素使之失活。第23页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三2.抗菌药物渗透障碍

(1)细菌外膜蛋白的缺失：可导致细菌耐药性的发生，如铜绿假单胞菌失去特异性外膜蛋白D2后对亚胺培南发生耐药第24页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三(2)细菌外膜上特殊药物泵出系统(2)细菌外膜上的特殊药物泵出系统：使菌体内的药物浓度不足以发挥抗菌作用而导致耐药。这是需要能量的过程，能对多种抗生素发生作用，如对四环素、大环内酯、喹诺酮类、氯霉素。第25页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三外膜屏障与β－内酰胺酶有明显的协同作用(3)外膜屏障:G—细菌菌膜通透性变化转大，膜孔蛋白通道非常狭窄，能对大分子及疏水性化合物的穿透形成有效屏障。外膜屏障使细菌对药物产生耐药性，且大多数G—

细菌产生β－内酰胺酶，外膜屏障与β－内酰胺酶有明显的协同作用，即膜通透性降低的作用可使有效的酶灭活系统加强。如绿脓杆菌的耐药。药物通透性改变可使细菌对氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素类、氯霉素、碳青霉烯类抗生素敏感性降低。第26页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三(4)细菌生物被膜的形成~1细菌在不利于其生长的环境下，产生藻酸盐多糖使细菌相互粘连形成菌膜，从而构成一种附着于病灶表面或导管内的膜状物，其对人体的致病性表现为：第一，菌膜释放浮游菌造成慢性感染急性发作，如慢性支气管炎急性发作；第二，藻酸盐会导致变态免疫疾病，如弥漫性泛细支气管炎。菌膜内的细菌被藻酸盐形成的膜包着，其毒力下降，多数抗生素很难穿透藻酸盐膜，膜内细菌仍然生长，且与巨噬细胞无法相互作用，一旦菌膜脱落，裸菌脱出，就会形成致病原。第27页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三

大环内酯类抗生素具有抗藻酸盐作用，可在菌膜上形成孔穴，进入菌膜内层。同时可联合使用有效药物通过孔穴穿透菌膜，达到杀灭菌膜内部细菌的作用。碳青霉烯类抗生素对绿浓杆菌的膜通透性最强，但用10倍MIC的药物作用于菌膜形成的绿脓杆菌，细菌存活率仍有70％。若将克拉霉素（对绿脓杆菌无活性）与此药物联合，则对膜形成菌的作用效果与裸菌完全相同。(4)细菌生物被膜的形成~2第28页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三3.药物作用靶位的改变

(1).核糖体靶位酶亲和力的改变导致对四环素、红霉素、喹诺酮、氨基糖苷类、甲氧嘧啶、磺胺类的耐药。(2).核糖体位点的改变引起对大环内酯类和林可霉素类抗生素耐药。(3).DNA螺旋酶的改变是引起肠杆菌属和铜绿假单胞菌对喹诺酮类抗生素耐药的重要机制，(4).核酸合成途径中序列靶位酶的改变导致对磺胺甲氧嘧啶耐药，二氢叶酸还原酶改变致甲氧嘧啶耐药。第29页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三(5)青霉素结合蛋白（PBP）发生改变

a.抗生素不能与之结合或亲和力降低，则产生耐药，如金葡萄菌中PBP转变为PBP2ａ，后者为低亲和力的的结合蛋白而耐药；b.大肠杆菌埃希菌中PBP3改变，引起头孢氨苄和其他头孢抗生素耐药；c.产气肠杆菌、鲍曼不动杆菌通过结合蛋白的改变导致对亚胺培南耐药；d.肠球菌Vａｎ基因编码产生肽聚糖上一种前体蛋白，阻碍万古霉素和肽链间相互作用而导致耐药；e.近来也发现了对万古霉素敏感性下降的金葡菌，和胞浆中39KD蛋白的形成及相当数量肽聚糖层的破坏有关。第30页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三第四代头孢菌素马斯平f.马斯平对多种PBP有高度亲和力，能克服以往β－内酰胺类抗生素之不足。酶抑制剂复合物如头孢哌酮／舒巴坦能增强药物对PBP2ａ和PBP４的亲和力，对耐甲氧西林金葡菌（MRSA）效力增强。第31页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三PBP介导的耐药性在G＋菌比G－菌中更常见和更重要PBP介导的耐药性在G＋菌比G－菌中更常见和更重要，其中最常见的是耐甲氧西林金葡菌（MRSA）这种耐药性一但出现，同源的PBP染色体基因可部分转移至相关菌株，并在细菌中迅速扩散而对人体健康造成严重威胁。第32页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三4.代谢途径改变

肠球菌可利用获得的亚叶酸参与代谢过程，因而对磺胺甲氧嘧啶发生耐药。第33页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三常见分离菌株的耐药机制～1菌种抗生素主要机制其他机制葡萄球菌青霉素产生β－内酰胺酶青霉素结合蛋白改变耐β－内酰胺酶青霉素青霉素结合蛋白改变喹诺酮类抗生素药物泵出、DNA螺旋酶改变细胞壁障碍红霉素核蛋白体靶位改变药物泵出第34页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三常见分离菌株的耐药机制～2肺炎链球菌β－内酰胺类抗生素青霉素结合蛋白改变红霉素核蛋白体靶位改变肠球菌β－内酰胺类抗生素低亲和力青霉素结合蛋白β－内酰胺酶氨基糖苷类抗生素氨基糖苷类钝化酶核蛋白体位点改变糖肽类抗生素结合蛋白改变第35页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三常见分离菌株的耐药机制～3流感嗜血杆菌青霉素β－内酰胺酶氯霉素氯霉素乙酰基转移酶淋病奈瑟菌青霉素β－内酰胺酶青霉素结合蛋白改变脑膜炎奈瑟菌青霉素β－内酰胺酶第36页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三常见分离菌株的耐药机制～4肠杆菌科β－内酰胺类抗生素β－内酰胺酶青霉素结合蛋白改变产生ESBL氨基糖苷类抗生素氨基糖苷类钝化酶喹诺酮类抗生素DNA螺旋酶改变第37页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三常见分离菌株的耐药机制～5铜绿假单胞菌β－内酰胺类抗生素β－内酰胺酶青霉素结合蛋白改变氨基糖苷类抗生素氨基糖苷类钝化酶核蛋白体位点改变喹诺酮类抗生素DNA螺旋酶改变胞壁障碍第38页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三三、抗生素的应用

（一）

应用抗生素的原则：（1）

熟悉选用药物的适应症、抗菌活性、药动学和不良反应。（2）

按照患者的生理、病理、免疫等状态合理选用，即所谓经验用药。（3）

及早确立感染性疾病的病原诊断（确认经验用药），分离和鉴定病原体后必须作细菌药敏试验，为先用窄谱抗生素提供依据。（4）

在下列情况下，严加控制或尽量避免应用抗生素：A．

预防用药B．

皮肤和粘膜等局部用药C．

病毒性感染和发热原因不明者D．联合用药必须有明确指征第39页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三（二）关于经验性用药～1

1.经验性用药：在抗感染治疗中仍有一定地位。但是，所谓经验性用药绝不是简单盲目地采用广谱抗生素，而必须建立在临床医生对特定区域特定人群致病的流行情况和耐药情况充分了解的基础上。当然，在治疗过程中，仍必须及时根据细菌培养和药物敏试验结果对治疗方案进行认证或修改。对免疫功能低下的病人，为了避免感染扩散，经验用药显得更为重要。第40页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三2.对危重病人的用药一但诊断确立就开始应用广谱抗生素，剂量要足，即所谓猛击。过去在抗生素治疗上曾有个误区，即所谓阶梯或升级治疗，其中包括按医生级别、按药物档次等。要一步到位（当然不能越位），开始不足（包括剂量、疗程、药物档次）将给治疗带来难于弥补的结果。第41页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三3.降阶梯治疗即是抗感染的经验性治疗方案，它具有两个特点：其一，开始即使用广谱抗生素以覆盖所有的致病菌；其二，随后根据微生物学检查结果调整抗生素的使用，使之更有针对性。第22届国际化疗会议阐述了对ICU中院内获得性感染适当起始治疗的明确概念，对降阶梯治疗予以充分肯定。第42页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三

（三）关于预防用药

有人认为，清洁的非植入性外科或妇产科手术应尽量避免预防性应用抗生素。需要使用者一般选择第二代头孢菌素，用药时间不宜过长，于术前半小时（一般主张在麻醉诱导期）给一次剂量，术期超过４小时者可追加一个剂量。所谓术前三天，术后三天的用法是一个误区。第43页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三（四）关于二重感染

长期应用广谱抗生素后，敏感菌受到抑制，而未被抑制者则乘机大量繁殖，出现抗菌药物应用过程的新感染，此外免疫功能低下的病人也易继发感染，这些统称为二重感染。在广谱抗生素中，泰能99％经肾排泄，极少排入胆和胃肠道，不引起肠道菌群失调。因而不会导致肠道二重感染。要加强监测，结合临床情况并判断是否用抗真菌药，如病人是否有免疫功能下降、应用激素等。抗真菌最好应用二性霉素B，可从小剂量开始。第44页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三

（五）

关于联合用药

1.联合用药应用的条件：（1）抗菌谱应尽量广，联合应用的两种药物，其抗菌谱相互补充；（2）联合的两者至少一种对病原菌具有高度的抗菌活性，另一种也不宜为细菌对之呈高度耐药者；（3）细菌对两者无交叉耐药性，体外试验呈现协同或累加作用。（4）两者具有相似的药物动力学特征，即吸收、分布、代谢、排泄基本一致。第45页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三2.联合用药的指征

（1）病因未明的严重感染；（2）单一药物不能控制的混合感染；（3）较长期用药细菌有产生耐药性的可能者；（4）联合后使毒性较大的药物剂量得以减少。第46页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三3.联合用药实例（1）碳青霉烯类抗生素＋克拉霉素抗形成菌膜的绿脓杆菌（2）β－内酰胺类＋氯霉素

脑脊液药物浓度增加（3）磷霉素＋抗生素

骨组织药物浓度增加第47页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三

（六）常见耐药致病菌的抗生素选择

1.

耐青霉素肺炎葡萄球菌（PRSP）：对低中度感染可加大青霉素用量或改用广谱头孢菌素；对高度耐药菌感染可选用三代头孢菌素中的头孢噻肟或头孢曲松，必要时联用万古霉素，也可选择第四代头孢或碳青霉烯类亚胺培南、米洛培南、必安培南、帕尼培南。第48页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三2.耐甲氧西林金葡菌（MRSA）选用万古霉素耐甲氧西林金葡菌（MRSA）：万古霉素为首选，严重病例单用无效时加用阿米卡星、磷霉素、或利福平。第49页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三3.超广谱β－内酰胺酶（ESBLｓ）细菌选用β－内酰胺酶抑制剂复合物超广谱β－内酰胺酶（ESBLｓ）细菌：选用β－内酰胺酶抑制剂复合物替卡西林／克拉维酸、头孢哌酮／舒巴坦，头霉素类（头霉素）、氧头孢烯类（拉氧头孢）、碳青霉烯类（亚胺培南）、氨基糖苷类。第50页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期三4.质粒介导的β－内酰胺酶（AmpＣ）细菌选用马斯平质粒介导的β－内酰胺酶（AmpＣ）细菌：选用第四代头孢菌素马斯平、碳青霉烯类或氨基糖苷类。第51页，讲稿共60页，2023年5月2日，星期