医院感染学-标本采集和判断

医院感染标本的采集与结果(jiēguǒ)判断李芳芳讲师(jiǎngshī)第一页，共三十九页。精选ppt病例１：某院胸外科在一个星期内分别送来三份不同病人的标本(biāoběn)（痰标本(biāoběn)、切口分泌物标本(biāoběn)、血标本(biāoběn)），经检测均检出了金黄色葡萄球菌，PCR结果相同，耐药谱结果相同：耐药：头孢唑啉、头孢哌酮、头孢三嗪、青霉素Ｇ、氨苄青霉素、羧苄青霉素，敏感：万古霉素。？What？How耐甲氧西林(xīlín)金黄色葡萄球菌爆发(bàofā)第二页，共三十九页。精选ppt临床标本检验对病人(bìngrén)及带菌者进行监测配合医院感染爆发的调查配合抗生素合理使用的管理医院环境的细菌学监测研究与教育临床(línchuánɡ)微生物学实验室的任务第三页，共三十九页。精选ppt医院感染(gǎnrǎn)标本采集及检验标本采集(cǎijí)、检验的一般程序医院感染标本采集的一般标准标本的运送与处理各类医院感染标本的采集和检验第四页，共三十九页。精选ppt临床需要――医生选择合适的方法(fāngfǎ)、开医嘱、填写申请单――护士备物、采集标本（正确的用物、时间、方法(fāngfǎ)）――卫勤中心运送标本――微生物实验室检验――出报告、指导临床用药标本采集及检验(jiǎnyàn)－一般程序您认为在标本采集(cǎijí)和检验时要注意什么？第五页，共三十九页。精选ppt标本采集的一般(yībān)标准标本容器(róngqì)的要求：无菌干燥、宽口棉拭要求：不同部位的标本采集：眼、耳、鼻、喉、创面、脓肿、组织标本、痰、脑脊液标本及化验单：病人姓名、采集时间及日期、病区、床号、标本名、采集部位(bùwèi)、临床诊断、检验项目与抗生素使用的时间关系存在正常菌群部位：消毒或绕道第六页，共三十九页。精选pptLipsky和Plorde将标本按存在(cúnzài)部位的深浅分为三层深层标本：循环血液、胸液、腹腔(fùqiāng)液、关节液深层标本但与外界相通：子宫内膜、膀胱、瘘管严重污染有正常菌群的标本：皮肤或粪便等第七页，共三十九页。精选ppt标本(biāoběn)的运送与处理标本采集(cǎijí)后应尽快送检采集与培养有时间间隔收到标本后的处理：

检查----肉眼观察---处理---涂片检查---电话通知

立即处理的标本：脑脊液、眼分泌物，洗胃液肺组织(查结核分支杆菌)

可暂缓处理的标本：创面拭子、痰、粪便（冷藏2-3小时）、尿（冷藏24小时）第八页，共三十九页。精选ppt三、各类标本的采集(cǎijí)和检验血标本(biāoběn)尿标本呼吸道标本粪标本脑脊液标本脓及伤口标本第九页，共三十九页。精选ppt（一）血标本(biāoběn)采样时机：菌血症出现于发热或寒战(hánzhàn)前1h内细菌性心内膜炎3次血培养（24h内3次,次间隔>1h）间歇性菌血症3次/24-48h内、不同部位已接受抗生素治疗的病人4-6次，吸收或中和血中的抗生素第十页，共三十九页。精选ppt血标本(biāoběn)采样方法消毒抽取（干燥、灭菌的针筒）更换针头注入(zhùrù)培养基混合周围血推片量：培养基的1/10成人：5-10mL（SBE10-20ml）婴儿及儿童：1-2mL第十一页，共三十九页。精选ppt血标本(biāoběn)抽血至培养瓶（需氧或厌氧）35℃普通孵育置全自动血培养仪药敏试验获得纯菌菌种鉴定（生化鉴定：传统或自动化）二级报告，微生物学检验报告单每日观察仪器阳性报警涂片革兰染色一级报告，通知临床血平板、巧克力平板、麦康凯平板分离培养检验(jiǎnyàn)方法第十二页，共三十九页。精选ppt血标本(biāoběn)抽血至培养(péiyǎng)瓶（需氧或厌氧）35℃普通(pǔtōng)孵育置全自动血培养仪每日观察仪器阳性报警无细菌生长第5、7天作盲目移种第7天作盲目移种阴性报告无细菌生长检验方法第十三页，共三十九页。精选ppt血标本(biāoběn)检验(jiǎnyàn)方法第十四页，共三十九页。精选ppt结果(jiēguǒ)分析有意义菌：类杆菌、肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、嗜血流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌无病原学意义菌：非溶血性链球菌（D族除外）、类白喉杆菌、芽胞杆菌血标本(biāoběn)第十五页，共三十九页。精选ppt（二）尿标本(biāoběn)中段尿采样女性：清洁(qīngjié)----清洗----无菌纱布擦干----分开阴唇----置棉花于阴道口----留取中段尿10ml（灭菌容器）男性：清洗----冲洗----留取中段尿老年人和儿童：清洁外生殖器及肛门部位，用清洁的尿盆或烧瓶接取第十六页，共三十九页。精选ppt其它(qítā)采样方法耻骨上膀胱穿刺抽吸采样：膀胱充盈时，19号或20号针头及针筒，穿刺点----脐与耻骨联合中点连线的下1/3处长期导尿者：消毒尿管与引流管接头，无菌空针抽取膀胱镜检、导尿管导尿、逆行肾盂造影术：术中采取输尿管膀胱梗阻：分段采集数份，分别培养尿标本(biāoběn)第十七页，共三十九页。精选ppt检查(jiǎnchá)方法湿片镜检----指导培养离心----沉淀(chéndiàn)----涂片----染色分离培养----菌落观察---涂片----镜检纯培养结核杆菌检查----抗酸染色培养（罗氏培养基）尿标本(biāoběn)第十八页，共三十九页。精选ppt1份标本(biāoběn)－10个油镜视野，每个视野细菌数：1-10个------每1mL尿液有104-105个细菌

污染或特殊情况100-1000个------每1mL尿液有106-108个细菌

尿路感染

常见病原菌：大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌、伤寒沙门菌等临床意义尿标本(biāoběn)第十九页，共三十九页。精选ppt尿快速检验(jiǎnyàn)报告（24h报告）无细菌生长或尿液含菌数≦103cfu/ml尿液含菌数>105cfu/ml,确定为大肠杆菌或粪链球菌,直接药敏试验结果(jiēguǒ)满意，作最后报告尿液含菌数>105cfu/ml，但鉴定结果不典型，24小时预报，第二天作细菌鉴定和纯菌的药敏试验，争取48小时最后报告尿标本(biāoběn)第二十页，共三十九页。精选ppt（三）呼吸道标本(biāoběn)标本采集(cǎijí)采集时间----晨痰采集方法：咽拭子：灌注活性炭粉的棉拭、Stuart运输培养基痰标本：清晨咳痰法、小儿取痰法、导管取痰法、气管穿刺吸痰法、气管切开者深入透气孔中取痰、纤维支气管镜采取痰标本第二十一页，共三十九页。精选ppt痰标本(biāoběn)的处理取可疑部分（脓、血）接种及涂片涂片三张：1张革兰染色、1张抗酸染色、1张备用接种5%血平板(píngbǎn)1个：分离全部细菌中国兰平板1个：直接药敏试验呼吸道标本(biāoběn)第二十二页，共三十九页。精选ppt痰标本(biāoběn)检查方法直接镜检:标本是否(shìfǒu)合格、区分正常部分和病变部分结核菌检查：抗酸染色、罗氏培养基----鉴定----药敏试验分离培养（巧克力平板、血平板）：菌落观察---鉴定呼吸道标本(biāoběn)第二十三页，共三十九页。精选ppt不合格标本：标本中平均(píngjūn)每个视野内扁平上皮细胞多于25个，找不到病变部分。合格标本：标本中可见白细胞（脓细胞）、柱状上皮细胞集中，有时还可见到不少(bùshǎo)黏液丝（标本来自气管或支气管内分泌物）。镜下观察(guānchá)第二十四页，共三十九页。精选ppt检验(jiǎnyàn)报告直接镜检报告（约2h）：标本是否合格(hégé)、有无脓细胞、柱状上皮细胞、扁平上皮细胞的数量、阳性球菌？阴性球菌？培养检查结果报告：5%血平板、中国兰平板、药敏试验结果呼吸道标本(biāoběn)第二十五页，共三十九页。精选ppt上呼吸道正常寄生菌：草绿色链球菌常见病原菌：肺炎链球菌、A族链球菌、金黄色葡萄球菌(pútáoqiújūn)、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、结核分支杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌等临床意义呼吸道标本(biāoběn)第二十六页，共三十九页。精选ppt（四）粪标本(biāoběn)采集：量----0.5～2g，保存液，4oC<24h检验的方法：直接涂片镜检：只用于怀疑霍乱弧菌感染或伪膜性结肠炎、葡萄球菌小肠结肠炎、白色念珠菌病培养检查：与临床(línchuánɡ)微生物实验室常规方法相同第二十七页，共三十九页。精选ppt（五）脑脊液标本(biāoběn)采集时间：立即送检采集方法：备物腰椎穿刺(chuāncì)分装处理：直接涂片分离培养（注意保温）抗生素敏感试验（立即报告）第二十八页，共三十九页。精选ppt（六）脓及伤口(shāngkǒu)标本采集：脓肿未破口、深部脓肿：局部消毒，以无菌法抽取，隔绝空气送检脓肿已破口：应用针头(zhēntóu)抽取深部脓液，放入Stuart运送培养基送检开放伤口、溃疡、瘘管：清洗、消毒，刮取或切取烧伤创面：痂下变黑或变形的不健康区边缘第二十九页，共三十九页。精选ppt检验(jiǎnyàn)及报告直接涂片：分离培养：厌氧培养、需氧培养抗生素药敏实验(shíyàn)：只有一种、足够数量----直接药敏试验多种细菌----分离出纯菌后----药敏试验报告：直接涂片2h内，分离培养顺利者24h,需补充试验者24h预告，48h出最后报告一般可在72h报告有无厌氧菌，争取4天出最后报告脓及伤口(shāngkǒu)标本第三十页，共三十九页。精选ppt四、检验结果(jiēguǒ)分析直接涂片染色及镜检结果(jiēguǒ)分析镜检阴性培养结果阳性镜检阳性无临床表现与培养结果相同培养阴性第三十一页，共三十九页。精选ppt尿培养报告单金黄色葡萄球菌敏感(mǐngǎn)：万古霉素中介：氧氟沙星（诺氟沙星）耐药：青霉素Ｇ、头孢唑啉、头孢哌酮、头孢三嗪、氨苄青霉素、羧苄青霉素报告单结果(jiēguǒ)分析第三十二页，共三十九页。精选ppt最低抑菌浓度(nóngdù)（Minimalinhibitoryconcentration,MIC）最低杀菌浓度（Minimalbactericidalconcentration,MBC）药物(yàowù)敏感试验第三十三页，共三十九页。精选ppt用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长的效能(xiàonéng)。定性测试的扩散法（diffusiontest）定量测定的稀释法（dilutiontest）临床常用由Bauer和Kirby建立的纸片琼脂扩散法，即Kirby－Bauer法。抑菌试验(shìyàn)（bacteriostatictest）第三十四页，共三十九页。精选ppt抑菌试验(shìyàn)第三十五页，共三十九页。精选ppt敏感（susceptible，S）：所测药物的常规给药剂量所达到的体内浓度能抑制或杀灭待测菌,即平均(píngjūn)血药浓度>MIC的5倍中介（int