生物基础实验

关于生物基础实验第1页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三考纲要求的教材实验归纳分类显微镜观察类用高倍镜观察几种细胞观察DNA和RNA在细胞中的分布用高倍镜观察叶绿体和线粒体观察植物细胞的质壁分离和复原观察细胞的有丝分裂和减数分裂物质检测和提取类检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质绿叶中色素的提取和分离第2页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三实验探究类影响酶的活性的条件探究酵母菌的细胞呼吸方式低温诱导染色体数目加倍植物生长素类似物对插条生根的作用探究培养液中酵母菌种群数量的变化探究水族箱中群落的演替第3页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三调查模拟类模拟探究细胞大小与物质运输的关系调查人群中的遗传病土壤中动物类群丰富度的研究第4页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三一、显微观察类1.观察用具——显微镜使用显微镜观察的一般步骤取镜安放→

→安放玻片→调节

→

观察→

观察→绘图。焦距低倍镜高倍镜对光2.显微镜相关的知识（1）显微镜的放大倍数代表的是物体

的放大倍数。长度或宽度（2）放大倍数与镜头长度及细胞数目的关系归纳①物像放大倍数=目镜放大倍数*物镜放大倍数②镜头长短与放大倍数的关系③低倍镜下的视野、高倍镜下的视野：第5页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三第一种情况：一行细胞数量的变化，可根据放大倍数与视野成反比的规律计算。第二种情况：圆形视野范围内细胞数量的变化，可根据看到的实物范围与放大倍数的平方成反比的规律计算④放大倍数的变化与视野中细胞数量变化的关系第6页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三（3）视野中异物的位置判断只有三种可能——在装片上、在目镜上、在物镜上。判断方法如下：①移动装片：异物随装片的移动而移动，则其位于装片上；②换目镜：异物不随装片移动，但换目镜后消失，则其位于目镜上；③换物镜：异物不随装片移动，换目镜后也不消失，但换物镜后消失，则其位于物镜上。第7页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三①压片法：用于比较疏松的材料，如根尖、花药等用较小的力即可把材料压成一薄层。压片法的一般过程是：取材、固定、解离、漂洗、染色、制片、观察。②装片法：某些微小生物，如草履虫、衣藻等，或某些大型生物的一部分，如人体口腔上皮细胞，植物叶片的表皮细胞从整体上取下，不作任何处理直接制成装片。其过程是：将材料在载玻片上的水滴中展平、放盖玻片时应从一侧慢慢盖在水滴上，防止产生气泡，染色或改变溶液浓度时，从一侧滴染色液或溶液，另一侧用吸水纸吸引。③切片法：用刀片将待观察的材料切成极薄的片，以用于显微镜观察。如细胞中脂肪的检测与观察。3、临时装片制作有装片法、压片法和切片法。第8页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三步骤器材与试剂作用与原理制片水解冲洗染色观察

观察DNA和RNA在细胞中的分布(必修一P26)实验结果:细胞核呈绿色,细胞质呈红色.分布：真核生物的DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。①将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9%的NaCl溶液滴②载玻片烘干10.9%的NaCl溶液防止细胞破裂，2维持细胞形态。3烘干使细胞固定在载玻片上8%HCl中30℃保温5分钟盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。用蒸馏水缓流冲洗10分钟2滴吡罗红甲基绿染色5分钟甲基绿使DNA染上绿色吡罗红使RNA染上红色显微镜下观察第9页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三观察线粒体和叶绿体(必修一p４7)一、实验原理

1.叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭形。

2.健那绿染液是专一性的细胞染料。用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色二、材料：叶绿体：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶线粒体：口腔上皮细胞临时装片三、方法步骤与注意事项取材制片观察1）选用藓类叶或菠菜叶的下表皮（稍带叶肉）作观察叶绿体的实验材料是实验成功的关键，因为藓类属阴生植物，叶片薄而小，常是一层细胞，叶绿体清楚，易于观察和操作；菠菜叶的下表皮是菠菜叶的背阳面，这样的细胞中的叶绿体大且数目少，便于观察。

2）实验过程中的临时装片要始终保持有水状态，目的是为了防止叶绿体失水。如果叶绿体失水，就缩成一团，无法观察叶绿体的形态和分布。结论第10页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三观察植物细胞的质壁分离与复原（必修一P61）

细胞液浓度<外界溶液浓度时，细胞失水；质壁分离；细胞液浓度>外界溶液浓度时，细胞吸水，质壁分离复原。原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性，因而收缩幅度大，造成质壁分离。1．实验原理紫色洋葱鳞片叶（液泡大且有颜色易观察）3、实验材料及试剂0.3g/ml的蔗糖溶液2、条件：

细胞内外溶液浓度差，成熟的植物活细胞第11页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三制作洋葱表皮临时装片（紫色—有紫色的大液泡）↓显微镜观察：①紫色大液泡②质壁紧贴在一起↓

滴、吸0.3g/ml的蔗糖溶液（充分↓浸泡）显微镜观察：质壁分离（液泡由大到小,颜色由浅变深）↓滴、吸清水↓显微镜观察：质壁分离复原三、步骤正常细胞初始质壁分离显著质壁分离第12页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三①培养根尖：应每天换水

(防止水中缺氧烂根)

②取材：取生长旺盛、带有分生区的根尖，长度为根尖的2-3mm。③解离：解离液（15%盐酸∶95%酒精溶液＝1∶1）；

时间：室温3-5分钟，至根尖酥软；（时间短则细胞没有完全分离，长则可能使根尖烂掉）

目的：使组织细胞分离开，杀死并固定细胞④漂洗：用清水漂洗10min，目的是洗去组织中的解离液，便于染色(防止酸碱中和)。观察植物细胞的有丝分裂（必修一P115）第13页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三⑥制片：目的是使细胞分散开。方法（用镊子弄碎根尖，盖上盖玻片，再放上一块载玻片，压片）（压片过重过猛可能将组织压碎、压烂；过轻则细胞未充分分散开而重叠。）⑦低倍镜观察：找到分生区细胞（特点：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂）⑧高倍镜观察：找各时期细胞。可见处于间期的细胞最多，中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过程，因细胞在解离时已被杀死。⑤染色：染液（0.01g/mL的龙胆紫或0.02g/mL的醋酸洋红）;时间为3－5分钟；目的是使染色体或染色质被碱性染料染成深色，便于观察。第14页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三观察细胞的减数分裂（必修二P21）1、目的要求：通过观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同阶段的染色体的形态、位置和数目，加深对减数分裂过程的理解。2、材料用具：蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，显微镜。3、方法步骤：（1）在低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别初级精母细胞、次级精母细胞和精细胞。（2）先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞，再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。第15页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三实验归类实验名称观察方式观察对象显微镜玻片标本染色剂生物材料观察细胞多样性原色观察细胞高倍临时装片无多种生物细胞观察叶绿体叶绿体高倍临时装片无菠菜叶或黑藻嫩叶观察植物细胞质壁分离与复原紫色大液泡及原生质层的位置低倍

临时装片无洋葱紫色外表皮细胞观察细胞中的DNA、RNA染色观察DNA、RNA的分布高倍临时装片吡罗红甲基绿人口腔上皮细胞观察线粒体线粒体高倍临时装片健那绿人口腔上皮细胞观察细胞有丝分裂染色体高倍临时装片龙胆紫或醋酸洋红洋葱根尖分生区细胞观察细胞减数分裂固定装片

蝗虫精母细胞第16页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三1、实验原理：蛋白质+双缩脲试剂紫色反应脂肪+苏丹IV红色脂肪+苏丹III橘黄色还原糖+斐林试剂砖红色沉淀

葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质(必修一p18)二、物质检测和提取类第17页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三还原糖的检测

（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。

（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。

（3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色）

第18页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三蛋白质的检测

（1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）

（2）步骤：试管中加样液2mL

加双缩脲试剂A液1mL，摇匀

加双缩尿试剂B液3~4滴，摇匀观察颜色变化(溶液变成紫色)

第19页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三脂肪的检测

（1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。

（2）步骤：方案一制作切片（切片越薄越好,将最薄的花生切片放在载玻片中央)

↓

染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液)洗去浮色(滴体积分数50%的酒精→吸去多余的酒精）

↓

制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）

↓

镜检鉴定（高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）

方案二取组织样液2ml，滴加2～3滴苏丹Ⅲ染液，观察组织样液的着色情况。第20页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三叶绿体中色素的提取和分离

(必修一P97)

1．实验原理：（1）色素提取：叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇（2）色素分离：不同色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。第21页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三2．实验步骤：（1）提取绿色叶片中的色素：（2）制备滤纸条（3）画滤液细线均匀，直，细，重复若干次

（4）色素分离——纸层析法不能让滤液细线触及层析液

（5）观察实验结果3、注意事项：取材、提取色素、画滤液细线要求、色素分离第22页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三尿糖的检测

1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸

3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。

4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。

第23页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三影响酶活性的条件（必修一P83）三、探究性实验第24页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三第25页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三第26页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三探究酵母菌的呼吸方式（必修一P91）1、原理:酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水：

C6H12O6

＋6O2

＋6H2O6→CO2

＋12H2O＋能量

在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳：

C6H12O6→2C2H5OH＋2CO2

＋少量能量

2、装置：（见课本）

3、检测：（1）检测CO2的产生：使澄清石灰水变浑浊，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。

（2）检测酒精的产生：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色。

第27页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三低温诱导染色体加倍

（必修二P88）

1、原理：用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。

2、方法步骤：

（1）洋葱长出约1cm左右的不定根时，放入冰箱的低温室内（4℃），诱导培养36h。

（2）剪取诱导处理的根尖约0.5~1cm，放入卡诺氏液中浸泡0.5~1h，以固定细胞的形态，然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次。

（3）制作装片：解离→漂洗→染色→制片

（4）观察，比较:视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞.

第28页，讲稿共34页，2023年5月2日，星期三

3、预实验：先设计一组浓度梯度较大的实验进行探索,在此基础上设计细致的实验.1、常用的生长素类似物:NAA(萘乙酸),2,4-D,IPA(苯乙酸).IBA(吲哚丁酸)等

探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用（必修三P51）2、方法：

①浸泡法：把插条的基部浸泡在配置好的溶液中，深约3cm，处理几小时或一天。处理完毕就可以扦插了。这种处理方法要求溶液的浓度较低，并且最好是在遮荫和空气湿度较高的地方进行