电针对雌雄实验性老鼠脂代谢的影响

电针对雌雄实验性老鼠脂代谢的影响

本文作者：孙东云孙立虹梁玉磊张书义肖红玲吴中秋李文丽李新华马红利单位：河北医科大学中医学院针灸系北京市丰台区兴隆中医院中医科河北医科大学中医学院实验中心

单纯性肥胖症患者脂肪组织摄取能量的效应增强会使甘油三酯的合成和储存增加，同时高密度脂蛋白胆固醇的含量下降，其清除胆固醇的能力减弱，使机体内呈现高ＴＣ血症状态；ＴＣ含量的增加又可抑制肝脏合成低密度脂蛋白胆固醇受体，从而使ＬＤＬ－Ｃ含量升高。这种脂类代谢的异常不仅可引起肥胖，还是动脉粥样硬化产生的重要因素之一［１］。大量研究证明，针刺减肥除了可以加快局部脂肪细胞分解代谢的速度［２］，还具有较好的降血脂作用［３－４］，但目前关于针刺对雌雄两性脂代谢影响差异的研究还相对缺乏。由于雌雄两性在激素分泌、新陈代谢、免疫调节等方面都存在显著差异［５－６］，故本实验以雌雄两性单纯性肥胖大鼠为研究对象，电针干预后观察其血脂含量的变化异同，探讨电针刺激对雌雄两性大鼠肥胖调节机制的异同，以期为临床治疗不同性别单纯性肥胖症提供科学的实验依据。

１材料与方法

１．１实验动物出生１ｄ的清洁级ＳＤ大鼠８窝，雌雄各半，体质量６～９ｇ，由河北医科大学实验动物中心提供。实验动物处置经河北省实验动物管理委员会审核批准。

１．２试剂与仪器谷氨酸钠注射液；ＴＧ、ＴＣ试剂盒；ＬＤＬ－Ｃ试剂盒；ＨＤＬ－Ｃ试剂盒；一次性无菌针灸针；韩氏电针仪ＷＱ１００２Ｆ型；Ｈｕｍａｌｙｚｅｒ２０００型生化分析仪；ＭＳＥ－２５型高速冷冻离心机。

１．３造模及分组将８窝大鼠置于室温为２５℃左右、明暗各１２ｈ的清洁级动物实验室，适应性喂养１ｄ后造模。随机从每窝乳鼠中抽取雌、雄各３～４只按每只０．２ｍＬ／１０ｇ在颈部皮下注射１５％谷氨酸钠０．９％氯化钠溶液，其余乳鼠注射０．９％氯化钠溶液作为对照，连续５ｄ。２１ｄ龄断乳，雌雄分笼饲养，经Ｌ－ＭＳＧ处理的大鼠均喂高脂饲料，未经Ｌ－ＭＳＧ处理的大鼠喂普通饲料。３６ｄ后测量模型大鼠和正常大鼠体重、体长，并计算其体质量指数［Ｌｅｅ’ｓ指数＝体质量１／３×１０３／体长［７］，其数值大小反映大鼠体脂含量］，模型大鼠Ｌｅｅ’ｓ指数大于正常大鼠３０以上为造模成功［８］。将造模成功的肥胖大鼠随机分为模型雌、模型雄、电针雌及电针雄４组，每组１０只，继续喂高脂饲料；注射０．９％氯化钠溶液的雌、雄大鼠各１０只作为正常组，继续喂普通饲料。普通饲料和高脂饲料均由河北医科大学实验动物中心提供。

１．４针刺方法电针雌、雄组大鼠：不做麻醉，将其固定于自制束鼠器上，按照《中国兽医针灸学》的方法取穴，并参照人体有关穴位，以动物比较学方法定位［９］。取大鼠“曲池”“后三里”“丰隆”“三阴交”“中脘”和“关元”穴，常规消毒后针刺，平补平泻捻转手法行针１ｍｉｎ。后在同侧“后三里”与“三阴交”及双侧“丰隆”接通韩氏电针仪，频率２Ｈｚ，强度１～２ｍＡ，３０ｍｉｎ后停针。每日治疗１次，连续针刺２８ｄ。模型雌、雄两组及正常雌、雄两组：用上述方法将实验大鼠在自制束鼠器上固定３０ｍｉｎ，每日１次，连续２８ｄ，不施加其它干预措施。

１．５观察指标及检测方法大鼠的体质量、体长及Ｌｅｅ’ｓ指数的计算：由专人分别在治疗前后测量各组大鼠的体质量、体长，每只大鼠测２次，如果２次所测值相近则取其平均值，如果相差很大，测量第３次，取相近两值的平均值作为测量结果，计算其Ｌｅｅ’ｓ指数。血浆ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ－Ｃ含量的测定：治疗结束后各组大鼠禁食１２ｈ，用１０％水合氯醛腹腔注射麻醉后股动脉采血６ｍＬ，加入预冷的加有１％肝素和抑肽酶的塑料试管中，４℃、３０００ｒ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ，提取上清液测定血脂各项指标。于生化分析仪上用甘油磷酸氧化酶－过氧化物酶法测ＴＧ含量，胆固醇氧化酶法测ＴＣ含量，直接一步法测ＨＤＬ－Ｃ和ＬＤＬ－Ｃ含量。１．６统计学处理数据处理运用ＳＰＳＳ１３．０统计软件，计量资料数据用均数±标准差表示，组间比较采用方差分析和ｑ检验法，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。

２结果

２．１电针对雌雄两性肥胖大鼠Ｌｅｅ’ｓ指数的影响图１结果显示，造模后，模型雌、雄两组和电针雌、雄两组大鼠的Ｌｅｅ’ｓ指数均高于正常雌、雄两组，差异有统计学意义，说明造模成功。治疗４周后，模型雌、雄两组大鼠Ｌｅｅ’ｓ指数均高于正常雌、雄两组；电针雌、雄两组大鼠Ｌｅｅ’ｓ指数较模型雌、雄两组均有明显降低，且电针雄组较电针雌组下降明显。图３结果显示，模型雌、雄两组血浆ＬＤＬ－Ｃ含量较正常组升高，ＨＤＬ－Ｃ含量较正常组降低；电针雌、雄两组血浆ＬＤＬ－Ｃ含量较模型雌、雄两组均有下降，ＨＤＬ－Ｃ含量较模型雌、雄两组均有升高；电针雄组与雌组比较差异无统计学意义。

３讨论

脂代谢异常是引起肥胖的重要因素，主要包括ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ－Ｃ和ＨＤＬ－Ｃ的代谢异常。ＴＣ可合成某些激素，参与机体如糖类等物质的代谢，对维持人体正常的生理功能有重要意义。但长期大量摄入ＴＣ，会形成高胆固醇血症，对人体不利。ＴＧ在肝脏和脂肪等组织中合成，主要储存在脂肪组织中，分解可供给机体能量，体内ＴＧ的合成速度加快，可导致体质量增加。ＨＤＬ－Ｃ是将各组织中的ＴＣ运回肝脏代谢，清除血液循环中游离ＴＣ，同时它还能够竞争性地与ＬＤＬ－Ｃ受体结合，阻断ＬＤＬ－Ｃ进入动脉壁细胞，清除血管壁中的极低密度脂蛋白和乳糜微粒。肥胖者体内的高ＴＧ血症，使ＴＧ由乳糜颗粒、ＶＬＤＬ过多转移到ＨＤＬ－Ｃ上，使ＨＤＬ－Ｃ浓度降低，从而导致ＨＤＬ－Ｃ清除ＴＣ能力减弱，内源性ＴＣ合成增加，同时抑制ＶＬＤＬ异化及循环中ＴＧ的降解，使脂肪沉积体内。中医学认为本病病机为脾肾阳虚为本，痰湿瘀停聚为标［１０］，故以“健脾益肾、祛湿化痰、通腑泄浊”为法，取足阳明胃经合穴足三里及足三阴经交会穴三阴交，二穴相合具有健脾祛湿，化痰降浊的作用。现代研究也表明针刺“足三里”等穴可以使肥胖大鼠下丘脑腹内侧核自发放电频率显著升高，使饱中枢兴奋水平升高，抑制了饥饿中枢的活动，从而降低食欲［１１］。取胃之募穴中脘及小肠募穴关元，二者相配具有健脾和胃，分清泌浊，祛湿化痰之功效。此外，胃经络穴丰隆与手阳明大肠经合穴曲池同用可健脾除湿，通利肠腑，降浊消脂。六穴合用共达减脂减肥之效。针刺能通过调节机体紊乱的脂代谢达到减肥的目的，在临床应用中取得较好疗效。目前认为，针刺可通过影响下丘脑单胺类介质［１２］、瘦素、神经肽Ｙ［１３］、神经－体液系统［１４］以及炎性因子表达［１５］等方式调节脂代谢，但针刺对不同性别脂代谢影响差异的报道较少，本实验旨在通过观察电针刺激对雌雄两性实验性肥胖大鼠血脂含量的影响，探讨电针刺激对不同性别肥胖者调节异同的可能机制。本实验结果表明，电针刺激上述穴位可以降低雌雄两性肥胖大鼠的Ｌｅｅ’ｓ指数，调节血浆ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ－Ｃ的异常水平，起到减肥的作用。电针刺激在降低Ｌｅｅ’ｓ指数方面，对雄性肥胖大鼠的作用优于雌性，可能是由于雄性大鼠受电针刺激后能更加敏感地调节交感－肾上腺系统和下丘脑－垂体－肾上腺皮质系统及甲状腺系统的功能，从而增加能量消耗，促进脂肪的动员与分解［１６］。在降低血浆ＴＧ、ＴＣ的含量方面，电针刺激对雌性肥胖大鼠的作用优于雄性，可能由于电针刺激可更好地调节雌性大鼠饱食中枢，抑制饥饿中枢的兴奋性［１７］及下丘脑室旁核的放电频率，并抑制下丘脑神经肽的合成和分泌，同时增强交感神经功能，抑制亢进的副交感神经功能，进而调节体内异常的瘦素和胰岛素含量，纠正异常的脂肪－胰岛内分泌轴［１８］，改善糖代谢紊乱，从而对体内异常的脂代谢起调节作用。在调节血浆ＬＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ－Ｃ的含量方面，雌雄大鼠之间差异虽不明显，但电针对雌性大鼠的改善趋势优于雄性，可能是由于样本量小，观察时间短所致，也可能与雌性