细胞培养和和移植技术演示文稿

细胞培养和和移植技术演示文稿本文档共30页；当前第1页；编辑于星期二\5点21分（优选）细胞培养和和移植技术本文档共30页；当前第2页；编辑于星期二\5点21分探究活动资料一：细菌真菌和病毒等均可造成细胞培养环境的污染，而离体培养的细胞已失去了对微生物和有毒物质的防御能力，一旦受到污染或自身代谢物质积累等，培养的细胞就会死亡。资料二：人体细胞培养的标准温度为36.5+0.5度,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢就会受到影响。培养的细胞对低温的耐受能力比对高温的耐受力大。资料三：开放培养时一般把细胞置于95%氧气和5%二氧化碳的气体环境中。氧气参与细胞的呼吸作用，二氧化碳可以维持培养基的pH。大多数细胞的适宜pH为7.2~7.4。资料四：培养的细胞就像体内细胞一样，需要一些基本的营养物质和生长因子，如氨基酸、葡萄糖、无机盐、维生素、核苷酸等。不同组织来源的细胞需要不同的生长因子，而且需求量也不同，所以，必须精心设计这些成分的搭配比例。

动物细胞培养需要哪些条件？本文档共30页；当前第3页；编辑于星期二\5点21分归纳总结动物细胞培养的条件无菌、无毒的环境营养：氨基酸、葡萄糖、无机盐、维生素、核苷酸及动物血清。适宜的温度和pH气体环境本文档共30页；当前第4页；编辑于星期二\5点21分动物细胞的培养过程

幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞用胰蛋白酶分散成单个细胞，说明细胞间的物质是什么？用胃蛋白酶行吗？为何选幼龄动物组织或器官进行细胞培养？本文档共30页；当前第5页；编辑于星期二\5点21分动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解纤维蛋白）本文档共30页；当前第6页；编辑于星期二\5点21分

细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。

细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。

细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。解答概念本文档共30页；当前第7页；编辑于星期二\5点21分原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。解答概念本文档共30页；当前第8页；编辑于星期二\5点21分动物细胞培养的应用（一）生产蛋白质生物制品（二）检测有毒物质（三）为烧伤病人植皮（四）生理、病理、药理研究本文档共30页；当前第9页；编辑于星期二\5点21分2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基2、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体练一练本文档共30页；当前第10页；编辑于星期二\5点21分细胞的全能性细胞株、细胞系植物体或组织培养结果获得细胞或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目试一试本文档共30页；当前第11页；编辑于星期二\5点21分

根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达?

再想一想利用动物体细胞核移植技术本文档共30页；当前第12页；编辑于星期二\5点21分本文档共30页；当前第13页；编辑于星期二\5点21分本文档共30页；当前第14页；编辑于星期二\5点21分动物核移植：

将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。

用核移植的方法得到的动物。克隆动物：记一记本文档共30页；当前第15页；编辑于星期二\5点21分卵细胞母羊B母羊A乳腺细胞胚胎移植细胞核移植细胞质融合后的卵细胞细胞核母羊C子宫早期胚胎多莉羊分娩卵裂妊娠多莉羊的培育过程问题1、多莉羊是雄还是雌？2、为什么要使用卵细胞？3、克隆羊多莉的成功证明了什么？本文档共30页；当前第16页；编辑于星期二\5点21分供体细胞（供核）细胞培养体细胞卵巢卵母细胞（MⅡ中期：供质）去核无核卵母细胞注入细胞融合重组细胞构建重组胚胎胚胎移植代孕母体生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛归纳:1.共分成两大阶段：核移植和胚胎移植2.取卵细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状同时其可为细胞核的全能性表达提供物质基础3.严格来说新个体有卵母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状核移植过程本文档共30页；当前第17页；编辑于星期二\5点21分多莉——细胞工程的一个里程碑！本文档共30页；当前第18页；编辑于星期二\5点21分卵细胞母羊B母羊A乳腺细胞胚胎移植细胞核移植细胞质融合后的卵细胞细胞核母羊C子宫早期胚胎多莉羊分娩卵裂妊娠多莉羊的培育过程问题1、多莉羊是雄还是雌？2、为什么要使用卵细胞？3、克隆羊多莉的成功证明了什么？本文档共30页；当前第19页；编辑于星期二\5点21分2.体细胞核移植技术的应用前景本文档共30页；当前第20页；编辑于星期二\5点21分克隆动物的研究意义1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白2.改良动物品种3.治疗人类疾病，作为供体4.保护濒危动物体细胞核移植技术存在的问题1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。2.成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。本文档共30页；当前第21页；编辑于星期二\5点21分核移植技术的应用（1）在畜牧业中，加速优良种畜改良进程。（2）保护濒危物种。（3）生产医用蛋白。（4）用于组织、器官移植。本文档共30页；当前第22页；编辑于星期二\5点21分1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达（Lucinda）的奶牛，年产奶量为30.8t，创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛，年平均产奶量一般为十几吨，而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3～4t。走进生活如果将克隆高产牛卢辛达的任务给你，你将如何进行克隆？本文档共30页；当前第23页；编辑于星期二\5点21分本节的收获动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养条件过程：原代培养，传代培养细胞株，细胞系应用核移植技术过程：核移植，胚胎移植存在问题应用本文档共30页；当前第24页；编辑于星期二\5点21分1．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是 （）

A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清

B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞

C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变

D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞C本文档共30页；当前第25页；编辑于星期二\5点21分2．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是（）A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体C本文档共30页；当前第26页；编辑于星期二\5点21分3．一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能（）A．有选择地繁殖某一性别的家畜

B．繁殖家畜中的优秀个体

C．用于保存物种D．改变动物的基因型D本文档共30页；当前第27页；编辑于星期二\5点21分

1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（）

A．细胞系B．细胞株C．原代细胞D．传代细胞

2、动物细胞工程技术的基础是-----（）

A.动物细胞融合B.单克隆抗体

C.胚胎移植D.动物细胞培养

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3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于----（）

A.培养基不同；

B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；

C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；

D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。A教学反馈本文档共30页；当前第28页；编辑于星期二\5点21分教学参考1.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？细胞间的成分主要是蛋白质。胃蛋白酶适宜的PH约为2，当PH>6时，胃蛋白酶就会失去活性，而胰蛋白酶作用的适宜环境PH为，多数动物细胞培养的适宜PH为，胃蛋白酶在此环境中没有活性。胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。

2.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。

3.单层细胞培养：1957年，科学家采用胰蛋白酶消化处理和应用液体培养基的方法，获得了单层细胞培养。单层培养法的出现，对细胞培养的发展起了很大的推动作用。本文档共30页；当前第29页；编辑于星期二\5点21分

4.为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质为白蛋白和球蛋白；氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，有些动物细胞不能合成，必须由培养液提供；激素有胰岛素、生长激素等促进细胞的生长、增殖、贴附。因此，细胞培养要保证细胞能顺利生长和繁殖，一般要添加10%----20%的