甾体激素类药物的分析3

基本结构：环戊烷并多氢菲ABCD12345678910111213141516171819一、基本结构及分类本文档共40页；当前第1页；编辑于星期一\17点50分分类：甾体激素肾上腺皮质激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素本文档共40页；当前第2页；编辑于星期一\17点50分二、结构与性质1.肾上腺皮质激素主要活性基团性质△4–3–酮UV、与羰基试剂反应C17

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α–醇酮基还原性本文档共40页；当前第3页；编辑于星期一\17点50分2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基团性质△4–3–酮UV、与羰基试剂反应

C17–

β–羟基可成酯本文档共40页；当前第4页；编辑于星期一\17点50分3.孕激素主要活性基团性质△4–3–酮UV、与羰基试剂反应C17–甲酮基与亚硝基铁氰化纳反应C17–乙酰氧基C17–乙炔基水解鉴定乙酸与硝酸银沉淀本文档共40页；当前第5页；编辑于星期一\17点50分4.雌激素主要活性基团性质A环为3–OH苯环UV、与重氮苯磺酸盐反应C17–乙炔基与AgNO3反应C17–羟基可成酯本文档共40页；当前第6页；编辑于星期一\17点50分二、鉴别试验（一）与强酸的呈色反应甾体激素类药物呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）本文档共40页；当前第7页；编辑于星期一\17点50分与硫酸显色反应

显色荧光加水稀泼尼松龙深红

絮状↓灰泼尼松橙黄→蓝绿炔雌醚橙红黄绿↓红色

炔雌醇橙红黄绿絮状↓玫红醋酸可的松黄或微褪色并澄带橙清本文档共40页；当前第8页；编辑于星期一\17点50分(二)官能团的反应肾上腺皮质激素药物呈色四氮唑盐费林试液多伦试液OHˉ1C17

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α–醇酮基还原性A.呈色反应本文档共40页；当前第9页；编辑于星期一\17点50分肾上腺皮质激素药物Cu2O↓橙红色碱性酒石酸铜B.沉淀反应Ag↓黑色氨制硝酸银本文档共40页；当前第10页；编辑于星期一\17点50分甾体类激素药物黄色的腙羰基试剂2.C3–酮基和C20–酮基＃常用的羰基试剂：2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼本文档共40页；当前第11页；编辑于星期一\17点50分黄体酮蓝紫色亚硝基铁氰化纳其他甾体淡橙色不显色3.甲酮基呈色反应本文档共40页；当前第12页；编辑于星期一\17点50分雌激素类药物红色偶氮染料重氮苯磺酸4.酚羟基本文档共40页；当前第13页；编辑于星期一\17点50分含炔基的甾体激素白色银盐沉淀硝酸银5.乙炔基↓本文档共40页；当前第14页；编辑于星期一\17点50分有机氟Fˉ有机破坏有机氯Clˉ6.有机卤素茜素氟蓝硝酸亚铈硝酸—硝酸银AgCl↓蓝色配合物

本文档共40页；当前第15页；编辑于星期一\17点50分△４-3-酮240nm苯环280nm（三）UV法本文档共40页；当前第16页；编辑于星期一\17点50分（四）IR法本文档共40页；当前第17页；编辑于星期一\17点50分（五）TLC法

主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别本文档共40页；当前第18页；编辑于星期一\17点50分（六）HPLC法

主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）本文档共40页；当前第19页；编辑于星期一\17点50分三、杂质检查（一）有关物质检查定义与标示药物结构不同的甾体化合物都称为“有关物质”本文档共40页；当前第20页；编辑于星期一\17点50分（1）TLC法（高低浓度对比法）判定方法：规定杂质斑点数目规定杂质斑点颜色本文档共40页；当前第21页；编辑于星期一\17点50分（2）HPLC法（高低浓度对比法）判定方法：规定杂质峰数目规定杂质峰面积本文档共40页；当前第22页；编辑于星期一\17点50分（二）游离磷酸的检查地塞米松磷酸钠氢化可的松磷酸钠倍他米松磷酸钠氢化泼尼松磷酸钠对照品法本文档共40页；当前第23页；编辑于星期一\17点50分（三）有机溶剂残留量的检查甲醇和丙酮甲醇≤0.3%丙酮≤0.5%

GC法本文档共40页；当前第24页；编辑于星期一\17点50分（一）HPLC法USP、BP、JP均采用RP－HPLC（大多内标法）特点用样量少，灵敏度高，分离效果好，测定速度快例：黄体酮的含量测定：ODS柱；甲醇-水（65：35）；254nm内标：己烯雌酚（甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体杂质，对利用结构特征设计的比色法有干扰）四、含量测定本文档共40页；当前第25页；编辑于星期一\17点50分（二）UV法△４-3-酮240nm（±）肾上腺皮质激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素苯环280nm（±）雌激素本文档共40页；当前第26页；编辑于星期一\17点50分（三）比色法弱、非分光光度活性药物强分光光度活性药物化学反应本文档共40页；当前第27页；编辑于星期一\17点50分

肾上腺皮质激素类C17-α－醇酮基强还原性1.原理OH-[还原]四氮唑比色法本文档共40页；当前第28页；编辑于星期一\17点50分

制备对照液制备供试液加入四氮唑盐有色产物484nmAX×

CXAR标示量（%）=AXAR×V×标示量×100%2、方法：以醋酸地塞米松为例本文档共40页；当前第29页；编辑于星期一\17点50分3.讨论（1）基团对反应速度的影响C11=O＞C11－OHC21－OH＞C21-酯本文档共40页；当前第30页；编辑于星期一\17点50分（2）溶剂、水分的影响含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10%含水30%→几无反应—无醛无水乙醇醛→A↑—无水乙醇本文档共40页；当前第31页；编辑于星期一\17点50分（3）O2与光线的影响反应过程反应产物怕光→避光、快速O2影响颜色强度和稳定性→隔绝空气、快速、充N2本文档共40页；当前第32页；编辑于星期一\17点50分（4）碱的种类及加入顺序反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行以氢氧化四甲基铵的结果最佳加入顺序：本文档共40页；当前第33页；编辑于星期一\17点50分（5）温度与时间t℃↑→ν↑→甲瓒分解↑ChP25℃40～45′本文档共40页；当前第34页；编辑于星期一\17点50分肾上腺皮质激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基1.原理HCl（缩合）异烟肼比色法本文档共40页；当前第35页；编辑于星期一\17点50分2.测定方法本文档共40页；当前第36页；编辑于星期一\17点50分3.讨论反应速度（1）C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反应反应专属性C3－酮基本文档共40页；当前第37页；编辑于星期一\17点50分（2）溶剂的选择异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇无水甲醇无水乙醇本文档共40页；当前第38页；编辑于星期一\17点50分