动物生物制品的制备

第二章

动物生物制品的制备第一节一般生物制品的制备方法本文档共121页；当前第1页；编辑于星期三\2点21分一、原料的选择、预处理和保存方法1.原料的选则

生物原料可来源于人体、动物、植物、微生物及海洋生物的生物组织或分泌物，也可以来源于人工构建的工程细菌、工程细胞及人工免疫的动植物本文档共121页；当前第2页；编辑于星期三\2点21分1.原料的选则（1）.注意事项：注意最佳生长时期（2）.选择原料时应遵循的原则：原料来源丰富，产地接近，成本低；原料新鲜杂质含量少，起始原料质量稳定本文档共121页；当前第3页；编辑于星期三\2点21分2、原料的预处理生物材料动物材料植物材料微生物材料本文档共121页；当前第4页；编辑于星期三\2点21分3.原料的保存方法1）冷冻2）有机溶剂脱水3）防腐剂保鲜本文档共121页；当前第5页；编辑于星期三\2点21分二、目的产物的提取1.组织细胞破碎高压匀浆高速珠磨超声破碎压力法反复冻融化学渗透酶溶破碎2.固液分离离心双水分配膜过滤微滤超滤反渗透

本文档共121页；当前第6页；编辑于星期三\2点21分三、.目的产物的分离纯化在去除各种杂质的同时将目的产品成分进行富集与浓缩纯度、提纯倍数、收获率分级沉淀、超滤、电泳、层析……本文档共121页；当前第7页；编辑于星期三\2点21分第二节各类生物制品的分离纯化方法本文档共121页；当前第8页；编辑于星期三\2点21分一、蛋白质类制品的分离纯化方法1.根据蛋白质的分子大小、形状和密度差异进行的分离纯化（1）.过滤和超过率技术（2）.离心和超离心技术（3）.凝胶过滤层析技术（4）.透析本文档共121页；当前第9页；编辑于星期三\2点21分2.利用蛋白质电性进行分离纯化（1）.等电点沉淀（2）.离子交换层析技术（3）.电泳和等点聚焦电泳本文档共121页；当前第10页；编辑于星期三\2点21分3、利用蛋白质的亲水性和疏水性进行分离（1）.盐析技术（2）.乙醇和聚乙二醇沉淀法（3）.疏水层析法本文档共121页；当前第11页；编辑于星期三\2点21分4.利用蛋白质的化学性质分离纯化（1）.辛酸沉淀法（2）.利凡诺沉淀法（3）.固相化染料柱层析（4）.螯合柱层析本文档共121页；当前第12页；编辑于星期三\2点21分二、核酸类制品的分离纯化方法1.提取环烷酸2.对提取的核酸制品进行纯化1）.盐析法及沉淀法2）.离心法3）.膜分离法本文档共121页；当前第13页；编辑于星期三\2点21分三、多糖的分离纯化方法本文档共121页；当前第14页；编辑于星期三\2点21分四.脂类的分离纯化方法本文档共121页；当前第15页；编辑于星期三\2点21分第三节强毒菌(毒)种的选育病原分离纯粹试验致病性免疫原性

筛选出适用毒株，分装，冻干保存本文档共121页；当前第16页；编辑于星期三\2点21分三、弱毒菌(毒)种选育本文档共121页；当前第17页；编辑于星期三\2点21分传统方法培育弱毒活疫苗种和病毒种

利用病原自然弱毒株LaSota、牛痘、鸽痘经典方法诱变弱毒株选育化学途径：亚硝酸基胍物理途径：热、干燥、射线等生物途径：适应非易感动物适应细胞杂交减毒本文档共121页；当前第18页；编辑于星期三\2点21分第四节细菌增殖技术本文档共121页；当前第19页；编辑于星期三\2点21分一、细菌繁殖规律与生长条件细菌的营养：水、碳、氮、盐类、生长因子等细菌生长的条件：气体、温度、PH值、渗透压细菌繁殖规律：二分裂法迟缓期、对数增殖期、稳定期、衰退期本文档共121页；当前第20页；编辑于星期三\2点21分二、细菌的分离与培养需氧菌的分离培养1．平板分离培养法：平板划线分离培养法、倾注培养法2．需氧芽胞菌的分离培养法3．利用化学药品抑茵的分离培养4．通过实验动物分离法本文档共121页；当前第21页；编辑于星期三\2点21分厌氧菌的分离培养1．生物学方法：在培养基中加入动植物组织2．化学方法保险粉法：利用连二亚硫酸钠（Sodiumhydrosulphite）和碳酸钠以吸收空气中的氧焦性没食子酸法：焦性没食子酸在碱性溶液中能吸收大量氧气硫乙醇酸钠法：硫乙醇酸钠（HSCH2COONa）是一种还原剂，能除去氧或还原氧化型物质3．物理学方法：加热、密封、抽气等本文档共121页；当前第22页；编辑于星期三\2点21分

含二氧化碳条件下细菌分离培养有些细菌特别是初次分离培养，要在含有5%～10％CO2。蜡烛缸法二氧化碳培养箱本文档共121页；当前第23页；编辑于星期三\2点21分三、工业化大生产中细菌培养方法1、固体培养基表面培养法：用于制备抗原、灭活苗苗或冻干苗苗2、液体静置培养法：适于一般菌苗的生产本文档共121页；当前第24页；编辑于星期三\2点21分3、液体深层通气培养法：适于大量的培养，菌苗生产中的主要培养方法。反应缸4、透析培养法：培养物与培养基之间隔一层半透膜的培养方法。发酵器透析培养系统本文档共121页；当前第25页；编辑于星期三\2点21分三、细菌计数技术总菌数计数法1．显微镜直接计数：利用血细胞计数器2．直接涂片计数法：数出红细胞与菌数之比3．过滤计数法：测定空气或水中的细菌数4．比浊计数法：麦氏比浊管本文档共121页；当前第26页；编辑于星期三\2点21分活菌计数法：通常用菌落形成单位（CFU）表示1．倾注平板培养2．平板表面散布法3．微量点板计数法4、其他方法：玻璃片琼脂薄层法、还原试验法、大肠菌群最近似数测定法、过滤计数法等5、新技术方法：如生物发光法、放射测量法，鲎试验法，电阻抗测量法等本文档共121页；当前第27页；编辑于星期三\2点21分

第五节病毒增殖技术本文档共121页；当前第28页；编辑于星期三\2点21分

一、病毒的增值病毒的增殖过程包括吸附、穿入、脱壳、病毒成分的合成、装配与释放等步骤。本文档共121页；当前第29页；编辑于星期三\2点21分吸附本文档共121页；当前第30页；编辑于星期三\2点21分吸附与温度有一定关系，37℃时吸附最好要求病毒附加蛋白质细胞感受器本文档共121页；当前第31页；编辑于星期三\2点21分穿入-----质膜溶解疱疹病毒,副粘病毒,艾滋病病毒HIV本文档共121页；当前第32页；编辑于星期三\2点21分穿入----通过形成内涵体本文档共121页；当前第33页；编辑于星期三\2点21分穿入----通过形成内涵体本文档共121页；当前第34页；编辑于星期三\2点21分H+本文档共121页；当前第35页；编辑于星期三\2点21分穿入-----有囊膜病毒fromSchaechteretal,MechanismsofMicrobialDisease,3rded,1998本文档共121页；当前第36页；编辑于星期三\2点21分穿入-----无囊膜病毒

直接通过质膜本文档共121页；当前第37页；编辑于星期三\2点21分H+穿入-----形成内涵体本文档共121页；当前第38页；编辑于星期三\2点21分病毒成分的合成此过程称为“隐蔽期”，主要为mRNA的转录、病毒多肽的转译和基因组的复制等根据病毒核酸及其转录和复制的方式不同，将动物病毒分为以下六个基本类型1．双股DNA病毒2．单股DNA病毒3．双股RNA病毒4．单股RNA（正股）病毒5．单股RNA（负股）病毒6．单股RNA（正股反转录）病毒本文档共121页；当前第39页；编辑于星期三\2点21分病毒的装配与释放新合成的病毒蛋白质亚单位组成前衣壳，病毒核酸进入前衣壳而形成完整的病毒粒子。无囊膜的病毒由于细胞溶解而逸出胞外。有囊膜的病毒，在核膜、胞浆空泡膜和细胞膜上出芽时，获得囊膜囊膜病毒出芽时，病毒糖蛋白进入细胞膜，使细胞获得病毒抗原的特异性本文档共121页；当前第40页；编辑于星期三\2点21分天花病毒的装配与成熟本文档共121页；当前第41页；编辑于星期三\2点21分SemlikiForestVirus释放本文档共121页；当前第42页；编辑于星期三\2点21分HIV释放与成熟本文档共121页；当前第43页；编辑于星期三\2点21分Hockleyetal.JGenVirol69:2455-2469没感染的HIV感染的(athighermagnification)HIV感染的本文档共121页；当前第44页；编辑于星期三\2点21分

二、病毒的营养需求必须利用活的细胞为其提供生物合成所需的能量和材料。常以动物、鸡胚、细胞培养方法增殖病毒培养细胞的营养液主要成分包括：无机盐离子、碳水化合物、氨基酸、维生素、蛋白质及抗生素等。本文档共121页；当前第45页；编辑于星期三\2点21分三、禽胚增殖病毒技术禽胚的选择接种途径与收获

绒毛尿囊膜接种法

尿囊腔接种法

羊膜腔接种法

卵黄囊接种法其它接种方法：脑内接种、胚体接种、静脉接种本文档共121页；当前第46页；编辑于星期三\2点21分10-11天龄鸡胚本文档共121页；当前第47页；编辑于星期三\2点21分影响禽胚增殖病毒的因素种蛋质量

SPF胚、母源抗体、抗生素残留孵化技术

温度、湿度、通风、翻蛋等接种技术：

无菌操作、伤及胚体本文档共121页；当前第48页；编辑于星期三\2点21分鸡胚接种后的检查与收获病毒弃去接种24小时内死亡的胚蛋，24小时后死亡的胚蛋随时取出，放4～8℃冷冻4～24小时，以备收获材料。收获含病毒的尿囊液、羊水、绒毛尿囊膜、卵黄囊、胚体本文档共121页；当前第49页；编辑于星期三\2点21分本文档共121页；当前第50页；编辑于星期三\2点21分

四、培养病毒的细胞类型及其培养方法细胞类型1、原代细胞(2-3代)2、二倍体细胞株(有限性，10-50代)3、传代细胞(恶性转化细胞系、转化细胞系)本文档共121页；当前第51页；编辑于星期三\2点21分细胞培养方法1、静置培养2、转动培养3、悬浮培养4、微载体培养5、中空纤维细胞培养6、微囊化细胞培养本文档共121页；当前第52页；编辑于星期三\2点21分组织培养细胞上皮细胞上皮样细胞纤维原细胞本文档共121页；当前第53页；编辑于星期三\2点21分上皮细胞------腺病毒正常感染初期感染后期本文档共121页；当前第54页；编辑于星期三\2点21分上皮细胞(epithelialcells)–呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytialvirus)感染前感染后本文档共121页；当前第55页；编辑于星期三\2点21分纤维原细胞-------单纯疱疹病毒正常感染初期感染后期本文档共121页；当前第56页；编辑于星期三\2点21分纤维原细胞-----脊髓灰质炎病毒正常感染初期感染后期本文档共121页；当前第57页；编辑于星期三\2点21分

三、实验室细胞培养技术培养细胞用器材及其处理一次性的使用方便酸碱处理、清洁、干燥、消毒本文档共121页；当前第58页；编辑于星期三\2点21分细胞培养液和贮存液1、平衡盐溶液(BSS)和磷酸缓冲盐溶液(PBS)2、胰蛋白酶-EDTA溶液3．碳酸氢钠溶液4．胰蛋白酶溶液5．水解乳蛋白溶液6．胰蛋白胨磷酸盐肉汤（TPB）7．Eagle’s营养液8．199营养液9.RPMI－1640营养液10.犊牛血清、抗生素本文档共121页；当前第59页；编辑于星期三\2点21分

细胞培养的细胞制备1、鸡胚成纤维细胞(CEF)10天龄鸡胚→去头、脚、翅、内脏→剪碎→洗3次→加胰酶水浴消化→洗3次→加入生长液过滤→离心→加犊牛血清、营养液分装培养瓶→24~48小时后成间层细胞本文档共121页；当前第60页；编辑于星期三\2点21分

2．传代细胞的培养：次代细胞和传代细胞系的培养方法基本相同。良好单层的细胞→用无钙镁的磷酸平衡盐水洗两次→胰酶消化→加生长液分装(1：3~4)本文档共121页；当前第61页；编辑于星期三\2点21分细胞的保存单层的细胞培养→更换新的营养液→胰酶消化→收集细胞→细胞冷冻保护液→分装干lml安瓿→0.05％美蓝溶液中，4℃30min→一50～一70℃→液氮罐内贮存数年细胞的复苏：将安瓿自液氮罐取出后立即放入37～40℃温水中，在lmin之内使细胞融化→吸出细胞悬液→加入新的生长液，稀释分装培养瓶→贴壁后换液一次→至形成细胞单层。细胞的运输：留少量生长液能覆盖单层，防细胞干燥，防液体振荡冲脱细胞。本文档共121页；当前第62页；编辑于星期三\2点21分病毒的接种与检查单层细胞培养→弃生长液→洗一次细胞面→接种待检病料或病毒液→吸附30～60min→弃接种液加入维持液→细胞病变→鉴定本文档共121页；当前第63页；编辑于星期三\2点21分病毒的蚀（空）斑技术病毒接种于细胞上→覆盖一层琼脂→形成局限性病灶→蚀斑多用于病毒克隆化及病毒含量的滴定本文档共121页；当前第64页；编辑于星期三\2点21分细胞培养污染问题细菌污染真菌污染支原体污染病毒污染来源血清的原虫污染本文档共121页；当前第65页；编辑于星期三\2点21分五、以动物体增值病毒的技术

用途病毒的致病力、致病机理免疫应答方面制造疫苗抗血清等接种技术脑内接种法皮内接种法皮下接种法静脉接种法腹腔接种法本文档共121页；当前第66页；编辑于星期三\2点21分六、工业化大规模生产病毒的方法

1．多表面细胞培养系统(多层玻璃板)2．微载体细胞培养系统3．气升悬浮细胞培养系统4．过滤培养5．大规模生产过程中的计算机自动控制系统本文档共121页；当前第67页；编辑于星期三\2点21分第二章第六节

灭活剂、保护剂与免疫佐剂本文档共121页；当前第68页；编辑于星期三\2点21分一、灭活剂灭活灭活—指破坏微生物的生物活性、繁殖能力和致病性，但不影响其免疫原性。微生物灭活、血清灭活、毒素灭活…本文档共121页；当前第69页；编辑于星期三\2点21分灭活的主要方法物理灭活：加热超声波裂解、

60Co照射等本文档共121页；当前第70页；编辑于星期三\2点21分化学灭活：用于灭活微生物的化学试剂或药物称为灭活剂。

甲醛、戊二醛烷化剂(乙酰基乙烯亚胺、二乙烯亚胺、缩水甘油醛)、苯酚、结晶紫、

β-丙酰内酯本文档共121页；当前第71页；编辑于星期三\2点21分影响灭活作用的因素灭活剂的特异性微生物种类与特性灭活剂浓度灭活温度灭活时间酸碱度有机物的存在本文档共121页；当前第72页；编辑于星期三\2点21分新型灭活剂的作用新型病毒灭活剂----辛酸钠，用于血清制品的病毒灭活壳聚糖----可作为流感病毒灭活疫苗的新型佐剂本文档共121页；当前第73页；编辑于星期三\2点21分二、保护剂指一类能防止生物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。作用机制：防止失去结合水阻止结合水形成结晶降低膜内外渗透压差提供复苏和修复所需的营养本文档共121页；当前第74页；编辑于星期三\2点21分保护剂(稳定剂)的种类1.渗透剂(二甲基亚砜、甘油和蔗糖等)，能渗入生物活性物质内部，降低因冷冻而增加的渗透压，防细胞内脱水。

2.非渗透剂(聚乙烯吡咯烷酮“PVP”和蛋白质等)，能防止活性物质由外向内渗漏溶质。本文档共121页；当前第75页；编辑于星期三\2点21分三.冻干保护剂的组成营养液：脱脂乳、蛋白胨、氨基酸、和糖类等赋形剂：蔗糖、山梨醇、乳糖、PVP、葡聚糖等抗氧化剂：Vit.C、Vit.E和硫代硫酸钠等本文档共121页；当前第76页；编辑于星期三\2点21分四、影响保护剂效能的因素保护剂的种类保护剂组分浓度保护剂配制方法保护剂酸碱度本文档共121页；当前第77页；编辑于星期三\2点21分五、常用的冻干保护剂脱脂牛奶(TACC配方)脱脂奶-谷氨酸钠(日本配方)7.5%葡萄糖-血清(NCYC配方)环乙醇-血清喷雾干燥稳定剂(NCTC和NCIB的配方)……本文档共121页；当前第78页；编辑于星期三\2点21分三、免疫佐剂佐剂（Adjuvant）或“免疫佐剂”凡能非特异地通过物理或化学的方式与抗原结合而增强其特异免疫性的物质。用于疾病预防、治疗、免疫制备中1925年法国免疫学家Ranmon发现在疫苗中加入某些与之无关的物质可以特异性地增强机体的免疫反应本文档共121页；当前第79页；编辑于星期三\2点21分佐剂的作用机理对抗原的作用增加抗原的表面积和改变活性基团构型增强T细胞和B细胞的协同作用使抗原缓慢降解和缓释对机体的作用引起细胞浸润，增强细胞免疫反应加速淋巴细胞的转化为效应细胞使膜和胞浆活性增加分泌辅助因子细胞功能改变，免疫细胞数量增加本文档共121页；当前第80页；编辑于星期三\2点21分完美佐剂的标准无致癌性;无毒性;纯度高;有一定的吸附力;在动物体内能被降解、吸收;不含与动物有交叉反应的抗原物质;不诱发自身过敏反应;稳定,储存1年以上不分解、不变质本文档共121页；当前第81页；编辑于星期三\2点21分佐剂的类型1、颗粒性佐剂盐类佐剂油水乳剂佐剂蜂胶佐剂脂质体佐剂免疫剌激复合物(ISCOM)佐剂其它：MF59佐剂、微囊化佐剂、硬脂酰酪氨酸佐剂、γ-菊粉等本文档共121页；当前第82页；编辑于星期三\2点21分佐剂的类型2、可溶性佐剂肽类：MDP表面活性分子类：TDM核酸及其衍生物类：CpGDNA,CpG-ODN含硫复合物类：左旋咪唑碳水化合物高分子类：多糖和DEAE-葡聚糖等细胞因子类：IL-γ-IFN脂质分体类：脂多糖，Vit.A\E其他：蛋白毒素如CT、PT、TT本文档共121页；当前第83页；编辑于星期三\2点21分常用佐剂1、铝盐类佐剂

氢氧化铝胶明矾磷酸三钙本文档共121页；当前第84页；编辑于星期三\2点21分氢氧化铝成本低廉,使用方便、无毒,是胞外繁殖的细菌及寄生虫抗原的良好免疫佐剂。主要的不足之处是铝盐佐剂仅能诱导、激发体液免疫。本文档共121页；当前第85页；编辑于星期三\2点21分油乳剂佐剂弗氏佐剂、265佐剂、白油Span佐剂、MF259……本文档共121页；当前第86页；编辑于星期三\2点21分

常用矿物油佐剂的缺点①矿物油在组织中因不能代谢而长期存在，造成局部组织损伤；②有污染致癌性多环芳香烃化物的危险，限制了矿物油佐剂只应用于实验动物及一些兽用疫苗。本文档共121页；当前第87页；编辑于星期三\2点21分

蜂胶（Propolis）佐剂蜂胶是蜜蜂采自柳树、杨树、栗树和其它植物幼芽分泌的树脂，并混入蜜蜂上颚腺分泌物，以及蜂蜡、花粉及其它一些有机与无机物的一种天然物质。本文档共121页；当前第88页；编辑于星期三\2点21分蜂胶免疫性剂具有良好的免疫增强作用，它能增强巨噬细胞的吞噬能力，促进抗体的产生，提高机体的特异性和非特异性免疫力。质量不稳定蜂胶需95%乙醇溶解蜂胶佐剂注射部位形成肿块本文档共121页；当前第89页；编辑于星期三\2点21分新型免疫佐剂细胞因子类佐剂CpGDNA(胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸DNA)基因工程减毒素免疫刺激复合物（ISCOM）佐剂脂质体(liposomes)佐剂MF59佐剂……本文档共121页；当前第90页；编辑于星期三\2点21分新型佐剂----细胞因子类佐剂作为免疫佐剂，其佐剂活性不如常规佐剂作为免疫治疗剂，预防治疗某些病原感染通过基因重组，构建新型基因工程疫苗这类细胞因子主要为IL-2、IL-1、IL-12、γ-干扰素。本文档共121页；当前第91页；编辑于星期三\2点21分CpGDNA(胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸)激活NK细胞和巨噬细胞刺激B细胞及产生Ig诱导分泌多种细胞因子诱导抗抗体诱生的细胞凋亡安全、无副作用、可人工合成(CpG-ODN—寡聚脱氧核苷酸)本文档共121页；当前第92页；编辑于星期三\2点21分基因工程减毒素细菌细胞壁成分或毒素通过现代基因工程技术脱毒霍乱毒素(CT)大肠杆菌不耐热毒素(LT)破伤风类毒素(TT)本文档共121页；当前第93页；编辑于星期三\2点21分其他新型佐剂1、免疫刺激复合物（ISCOM）佐剂ISCOM是由抗原+QuilA+胆固醇=1：1：1混合后自发共价结合而成的一种较高免疫活性的脂质小泡。ISCOM现已广泛应用于兽医多种细菌、病毒和寄生虫病的疫苗。本文档共121页；当前第94页；编辑于星期三\2点21分ISCOM快速、有效地将抗原递呈给免疫系统免疫后迅速激活机体的细胞免疫应答和体液免疫应答经口服或鼻腔接种获得免疫,且能达到在局部和全身黏膜表面诱导有效而特异的黏膜应答;重复低剂量口服ISCOM疫苗不会引起免疫耐受只有含疏水基团很多的抗原或免疫原才能与ISCOM形成复合物本文档共121页；当前第95页；编辑于星期三\2点21分2、脂质体(liposomes)佐剂人工合成的具有单层或单位膜样结构的脂质小囊，由一个或多个类似细胞单位的类脂双分子包囊水相介质所组成，具有佐剂兼载体效应。一类以提高抗原输送和递呈为主要作用的佐剂与弗氏佐剂或铝胶合用，效果更佳本文档共121页；当前第96页；编辑于星期三\2点21分脂质体膜对细胞膜具有很好的亲和性,容易将包被在脂质体上或内部的抗原成分输入到细胞内近似于病毒与宿主细胞的作用过程，定向传输主要存在问题是稳定性本文档共121页；当前第97页；编辑于星期三\2点21分由N’,Ｎ’-二甲基乙二胺基氨甲酰基胆固醇(DCchol)制备成的正电荷脂质体作为基因转移的载体而被批准用于基因治疗的临床研究脂质体佐剂多在粘膜疫苗和基因工程疫苗上应用本文档共121页；当前第98页；编辑于星期三\2点21分3、纳米(Nanometer,NM)佐剂是将抗原物质或能编码免疫原多肽的DNA或RNA包裹于纳米粒子内部或是吸附在纳米粒子表面,或与纳米粒子结合纳米乳剂是对黏膜无毒性的佐剂避免传统疫苗的载体效应发生,提高生物利用度,提高制剂的均匀性、分散性和吸收性本文档共121页；当前第99页；编辑于星期三\2点21分4、MF59佐剂4.3%角鲨烷+0.5%吐温-80+0.5%司班-80制成水包油型疫苗可刺激体液免疫，可激发细胞免疫取代氟氏佐剂。采用了可代谢和无毒的鲨烯作为油剂,以减轻炎症反应实验效果并不稳定本文档共121页；当前第100页；编辑于星期三\2点21分5、QuilA佐剂QuilA系从南美皂树树皮中筛选到的具有佐剂活性的成分。使外源性抗原刺激机体Th1免疫应答,又能诱导CTL应答亚单位疫苗、细胞内病原体疫苗及癌症疫苗的理想佐剂引起溶血、局部组织坏死,甚至全身不良反应或中毒本文档共121页；当前第101页；编辑于星期三\2点21分6、胞壁酰二肽(MDP)及其衍生物佐剂从分枝杆菌细胞壁中分离到的具有活的最小结构片段诱导机体产生细胞因子存在致热原性,在动物体内会引起赖特尔过敏综合征本文档共121页；当前第102页；编辑于星期三\2点21分注射局部反应轻微,极少化脓无抗原性和过敏原性,可反复注射无致癌作用分子量小,对生物学降解作用有抵抗力,可以口服。本文档共121页；当前第103页；编辑于星期三\2点21分（七）佐剂的应用关键控制抗原-佐剂复合物的体积利用佐剂的靶向性优化佐剂的选择注重佐剂的联合应用本文档共121页；当前第104页；编辑于星期三\2点21分（八）在DNA疫苗上使用较有潜力的免疫佐剂CpG-ODN脂质体霍乱毒素(CT)大肠杆菌热不稳定性肠毒素(LT)细胞因子…….本文档共121页；当前第105页；编辑于星期三\2点21分（九）新佐剂的研发药效、药理、毒理学研究佐剂类型、联用配方有效性、安全性、选择性、可控性有机结合本文档共121页；当前第106页；编辑于星期三\2点21分（十）中药免疫佐剂具有多效性、双向调节性、不良反应少、毒副作用小和无依赖性等特点。存在成分复杂、作用机制不清、稳定性差多糖、黄酮、皂苷等是主要的活性成分本文档共121页；当前第107页；编辑于星期三\2点21分能有效提高机体免疫力的中药

滋补类药物中的人参、枸杞、五味子、何首乌、黄芪、仙茅、肉桂等;清热解毒药物中的金银花、仙人掌、黄连、黄芩、柴胡、穿心莲、大黄、板蓝根等;活血化瘀药物中的红花、三七、川芎及一些地衣类植物等方剂有:玉屏风散、补中益气汤、小柴胡汤、养真方、银翘散、白虎汤等本文档共121页；当前第108页；编辑于星期三\2点21分中药佐剂的作用机制免疫调节(细胞因子网络的修饰)、抗原递呈(抗原构象的维持)、细胞毒性T细胞(CTL)诱导、抗原靶向和储存等本文档共121页；当前第109页；编辑于星期三\2点21分中药佐剂的研究方向传统中药制剂为研究对象以中药有效部位(群)为研究对象以中药有效单体为研究对象本文档共121页；当前第110页；编辑于星期三\2点21分第六节

生物制品的冷冻真空干燥技术本文档共121页；当前第111页；编辑于星期三\2点21分一、冷冻真空干燥(冻干)原理与特点原理：

将生物活性物质先行降温冻结成固体，再在真空和适度加温(不超过40℃)条件下使固体水分子直接升华成水汽抽出，最后使生物活性物质形成疏松、多孔样固状体。本文档共121页；当前第112页；编辑于星期三\2点21分一、冷冻真空干燥(冻干)原理与特点特点：

(1)保护热敏物质的活泩