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文档简介
发酵饲料生产工艺与应用灵璧县立腾同创农牧科技有限责任公司二0一二年十一月膊目鸦录客安徽用省立避腾同献创农握牧科黄技有震限公屈司韵简介嘴安徽畜省立肝腾同堵创农扁牧科栋技有超限公仆司舱企业封文化举安徽唤省立泼腾同池创农闷牧科街技有直限公骆司盖的十毛年发耀展战嫂略析—悠—笼——李—困安徽咏省立惕腾同纱创农兆牧科付技有丧限公蜻司赔的第择一个养发展片五年废发展争计划塘发酵遮饲料倘生产丛的菌与种及闹发酵餐工艺题发酵畅饲料忽生产掀技术寺第一勿章拦发酵忽饲料煌生产寨的菌掉种及喇发酵挨工艺概述扛发酵芦饲料忘的定秆义湿发酵午饲料韵的定昼义袄是饮:在蛾人为资可控伴制的严条件吼下,帜以植旋物性园农副蒜产品流为主签要原茄料,嚷通过止微生休物的墓代谢哲作用挪,降筹解部朵分多菌糖、蜂蛋白步质和辅脂肪避等惹大分讲子物盲质,连生成山有机惕酸、振可溶推性多口肽怎等小蚂分子棕物质句,形迈成营洽养丰观富、型适口演性好蜡、活甘菌含专量高饲的生涛物饲爽料或布饲料反原料瓶。算采用帝发酵菌技术烛生产巨的动淡物饲允料或排饲料牧原料仁,其笋特性树主要尿是:帆(1甩)含掀有大叔量的川活性查微生顶物;宝(2三)眠多数毒以厌谎氧发姜酵方就式进宵行生瓣产;颠(3度)未灾经干命燥的捆物料蒜含水五量通津常在院30枝%以途上;碍(4迅)物希料的该酸性坦物质枪明显啄增加绕,营甜养组啄成更保合理遇;由(5鲜)生弟产原仪料以留植物疼性农愧副产鼠品为蛙主。离也有济发酵摆成品珍是经衔过干录燥处盲理的际,比会较典章型的愈有发索酵豆山粕和快发酵寨棉粕孝。在汤发酵涛过程窑中有点大量细的活吸性乳莫酸菌这和酵包母菌乏发生膝的代召谢作霉用,贷经过肾干燥老以后行,乳尺酸菌爹基本稠都失砍活了滔,但戴是它夹们也武属于炎发酵茂饲料以。活发酵桑饲料聋的概死述寺发酵生饲料阿的生破产工氧艺基盘本都周是以午固态院发酵苦的方鞠式进秀行的四,生弹产菌博种以自乳酸肃菌、洗芽孢强杆菌台和酵北母菌博为主证,绝胜大多爪数采孤用厌请氧或垃兼性穿厌氧犁发酵涛。发其酵物笋料的杏含水恭量为欠30板%~骡50旷%,银发酵茄时间念和温强度受颠环境问影响虽很大幅,基普本不励进行耳人为疮控制教和调刺节。刃在实能际生姑产中盼也有竖采用避好氧绘发酵劫方式衡进行占的,部生产甜菌种祥以霉柔菌和译假丝灵酵母锈为主压,生世产用煤的蛋摇白原杂料主够要是胃一些涝乳酸纵菌和御酵母患菌难夏以降摇解的恶杂粕借和胶俭质蛋温白。阴但是逢生产烦设备巡复杂纤,物荒料温傲度和寨湿度端变化剑很大价,控拐制及奔其困咐难。曲成品舒主要冷是作杂为饲闻料蛋崇白原碰料的折替代驱物,北能降继低饲陪料生帮产成的本,行但基摘本不桂具备黑生物日学活丸性和歌功能拴。央本节绸主要惹论述授厌氧冤固态少发酵恼工艺春,常苏规的弦发酵辱饲料群生产坏流程瓦如:遣原料很→嘴消毒惠→舟冷却唐接种茅→非培养盲→左干燥受→遭包装穴工业赵化规丽模的剑微生志物发案酵过约程基己本上断都是测纯培臭养过是程,弃原料己需要剃消毒抛,空杜气需低要过缺滤等盒。这衰些操拜作都访是为堂了确汽保在感发酵神产品叫生产裹和储陕存过碑程中质不受刺杂菌旧的侵布袭和废干扰鸭,但部也正贞是这走些常层规操蝴作使反产品皱的生刃产成楚本居扔高不采下,室影响伙了微培生物释发酵先产品六在动勿物饲齐养中寒的大溉剂量吗使用贩。饶大量钩试验兽证明秧,在嗓不考拌虑动陷物饲想养成羊本的新前提攻下,覆大剂何量(乐在配多合饲挨料中拣添加灵5.旱0%改以上尤)兆使用享高活团菌含尤量的炼微生恨物发米酵饲宅料可咽以明渣显改镰善动鉴物的异生产浴性能良,提偏高动仍物的腥健康镇水平备,甚创至可渣以进狡行无连抗生记素饲伶养。朴但是势采用瓜传统旧的生乳产工捎艺获零得的柿高活合菌产棋品其厚生产浪成本喜通常弟都在正10止元/子kg法以上柄,如立果以疫10把%的侮比例展使用庙在配掉合饲筐料中创,钥每吨松配合冲饲料特的成掏本至灵少需猴要增吧加8壳00顺元,歼这个甚增加融值对笛传统嗓的畜辉禽养饰殖业持来说损是难援以接绞受的悦。爷降低掘发酵编饲料最生产结成本霉最直捡接的表方式捡就是躬简化丰生产遍工艺色,其乏中原哲料的摇蒸甩煮、厕消毒尺和干脂燥是菊最耗江能的丛操作妨过程煎,是目导致刘生产平成本螺增加薪的主妖要步渣骤,广也是请导致念生产惨设备牵投资辜增加竞的主锯要原错因。蔑如能授简化直生产谜操作雾工艺喷步骤引,同碰时又所能保沸证产置品质圆量的捡安全拥稳定姨,就项能使现发酵捡饲料羽的生溉产和枯应用材具备作强大影的市欺场竞崭争力薯。柴发酵费饲料耻的生嚷产菌位种柔发酵丝饲料劣的生鸽产菌原种很袋多,们主要师有:诸乳酸矛菌、乎芽孢叶杆菌减、酵逗母菌邪和霉誉菌。联乳嗓酸熔菌恐目前即生产敌中使喉用的式乳酸拌菌至瞎少有和30党多种像。按汽乳酸钻菌的档代谢售途径庭,大葛致可执归纳截为四迷种类胆型:贝同型陷乳酸偏发酵渗、专宰性异阿型乳堪酸发浮酵、殿兼性炉乳酸宗发酵烛和双扯歧杆独菌异招型乳词酸发滴酵。田同型侧乳酸翁发酵伤C海6毅H泥12丹O由6临——寸→谢2C订H逼3货CH个(O抚H)基CO朗OH晕一分精子葡纵萄糖陪分解锯成两达分子偷乳酸超,整辅个过薯程不疤产气带,吸发酵则转化暮理想福,产沃物最机合适筹,效挺率最孩高。喇典型奇的生脉产菌顽种主驼要有男:德拴氏乳有酸杆沾菌、匆嗜酸隶乳杆灰菌、蒙唾液灯乳杆垮菌、爽嗜热洋乳杆销菌、首粪肠帖球菌贿、乳僚酸乳贼球菌葡。例专性获异型距乳酸迅发酵斜C败6野H扬12滚O掠6圈——止→美CH晴3员CH预(O剖H)磁CO为OH协+C伶H岔3殊CO抛OH偶+C摩O歌2能↑宝一分浙子阔葡萄森糖转晌化成换一分锁子乳病酸和愿一分构子乙关酸,桶另外精还释摸放一术分子辅二氧调化碳铃。相时比同险型乳慰酸发邮酵,球这种开发酵哈的转捞化效波率要哀低得孟多,寿而且重还有蛛产气甜损失赶。典患型的呜生产塘菌种膜主要驶有:聪发酵螺乳杆造菌、敢高加陈索酸鹿奶杆明菌、迅短乳沿杆菌阴、巴解氏乳费杆菌尼。蜘兼性涛乳酸夺发酵躁兼性沸乳酸铲发酵竖能同释时进纳行同搬型乳服酸发极酵和垃异型蹦乳酸拣发酵滚,这温两种焰代谢区进行讽的程盛度和颜比例渡取决患于逼菌种汽的性传质和笑外界卫培养恋条件蒜。典次型的乔生产作菌种脾有:啦植物经乳杆资菌、脉干酪舱乳杆甜菌、盟鼠李拿糖杆躁菌捷、清鸦酒乳厕杆菌笋。陵双歧施杆菌葬异型雾乳酸供发酵嗽2C旗6道H股12洞O锄6桑——柴→亲2C各H宽3价CH薄(O堵H)尺CO柿OH驱+3恋CH泉3柔CO削OH对比较鞋典型烦的生烧产用营菌种宜是动险物双希歧杆洞菌。久双歧谷杆菌范的培卵养要盈求很疯严格亦,对守厌氧熟要求杰极高雄,目照前还拴很难吓在实寻际生垃产中士应用雅。促乳酸植菌分容布广叼、种亮类多隙,有痛杆状伟和球做形两路大类提。有础单个吴、成炭对和侮链状眠排列师的,拨基本导上都袄是厌通氧菌鸡或微侧需氧刮菌。调在饲君料青迫储、佛发酵哑开始炊时就长繁殖亏,到壤饲料省因密尽封缺恋氧后腰仍然妄能繁弓殖,仰只是垮增殖冲的速架度慢捧一些惕,而样乳酸趣的生哗成速愉度却安快一痒些。羞乳酸摔菌能笨分解困饲料槽原料硬中的兼糖,侍形成父乳酸粪。乳错酸能腐提高流饲料览的营盐养价胀值和陶适口较性,径同时锻还能矮抑制稀大肠吼杆菌男和沙解门氏贷菌等智有害破微生晚物的档生长辜代谢炮,使玻饲料拔产品掏能长仰期保村存。炉在饲芬料青唯储和匠发酵完的过仁程中探,同颜型和新异型信乳酸困发酵妖同时命存在遭,产烤物除头乳酸损外还笛有少苦量乙卡醇和撤CO消2刘。哲芽列孢废菌瑞目前丛在生羞产中谷应用创的芽抱孢菌申有近美十种芳,以克杆菌塌为主位,主潜要为东以下鸣三种型:地幻衣芽斜孢杆园菌、哥枯草竟芽孢扩杆菌怖和蜡豪样芽已孢杆仍菌。谎芽孢诊杆菌嘴能耐捡受高访温,秧在有失氧和例无氧室条件稍下都罪能存丢活。惧在营商养缺已乏、容干旱朽等条芬件下统形成逃芽孢委,在停条件架适应钢时又盐可以及重新米萌发痕成营有养体饰。福利用姜芽孢录杆菌裳发酵双饲料册的目池的主昌要是查为了诚消耗博培养丧体系遇中残榜留的舞氧气恋,为庸乳酸驾菌创顶造一雹个厌哀氧环拣境。查另外型,近德年来牌研究京还发伤现,敲有些涝芽孢牙杆菌蒜能产铜生杀述灭大脸肠杆链菌和硬沙门贱氏菌舟等有杰害微浇生物羞的细祖菌素井(也骡称抗杯菌肽津),横这些烧抗菌俊肽有宰很强坝的针础对性屡,只馅对某留些类若型的运微生沾物细芳胞有春破坏偶作用亏,对下酵母封菌和甜乳酸娱菌没枝有影碰响。盐酵粉母颈菌恭酵母森菌是忧一类悟单细贼胞真去菌,踏形态钓多种择多样谣,主街要有何球形创、卵象形和熔丝状品形(批如假叛丝酵妨母)饭,以博出芽原的无历性繁补殖为教主,肉最适专宜生广长温行度为烟25秒~愿35置℃车,p米H偏捐酸性巴(4蓬.0衫~6凤.0禁)。扛酵母俯菌基催本上通都是央兼性捎厌氧脸菌,党在有绝氧的缘条件执下迅说速增洋殖,勾在无绿氧的昌情况斩下进度行酒扎精发寺酵(储EM骨P)聪。馆目前竿在生码产中兽应用标的有济20仅多种示,主烦要为鼓以下稀三种艇:酿昆酒酵肤母、旅热带欢假丝冲酵母早、产焰朊假浩丝酵晒母块。宝啤酒壳酵母裁和面唐包酵记母是立最常赚用的扑酿酒殿酵母陷。热蜜带假赞丝酵角母和坦产朊泛假丝渗酵母睡的生线长速贡度很革快,轰在适躺宜的婚温度鲁和营炉养条牵件下巷,它赵们的仪世代厅倍增秒时间姐不超稳过3大h,筒特别脑适合矩处理拨食品摩加工何业产急生的爆废水集。置酵母澡菌的逆个体见比乳份酸菌老大得曲多,崇直径及通常甜为2拥~6和μ弓m尿,体鞠积几垮乎是幕乳酸惊菌的扎10齿00央倍左么右。意工业绣生产倾中常梁用的亡酵母呀菌主与要有不酿酒祖酵母暴和假户丝酵蛛母,拍酿酒烦酵母包是生候产啤幕酒、柄白酒准等含挨乙醇料类发触酵物淘的重样要菌肯种;历假丝蓝酵母径主要刻用于诞好氧晨发酵校生产府动物她饲料脏或者颂废水涨处理开。炮霉毙菌浊目前妇在生还产中轧应用疼的霉孕菌有迫近十判种,使主要章为:快米曲毙霉、删黑曲杠霉、伟白地厚霉。万一般皇来说由利用歌霉菌胀发酵也,基地本上贸都是电有氧昌发酵化,发对酵过裙程会稍产生鹊大量拣的代碰谢热言,生方产过萌程中蒙料曲扮的温的度控第制往我往是券生产泽成败灶的关例键。未霉菌钟发酵路目前饮采用舒浅盘钥发酵有,料摔曲厚岁度不恶超过校5c腰m务。如灾果采已用厚焰层发逢酵,培需采棉用强井通风案装置家,生绩产能议耗很驶大,灿从这秋一点恋上说躁,霉功菌发潜酵不哭适于己生产租饲料凭或者使饲料暖原料情。钢目前浆,实电际生峡产中锹利用条霉菌小主要敏是利箩用它望能合绑成纤封维素考酶、犬半纤免维素才酶和舒蛋白活酶的郊特性扰,利照用廉饿价的枪粗蛋尸白原店料作伐为发蓬酵底壁物,再生产渡高活延性的膨蛋白桑饲料岛或者较粗酶忘制剂附。尘选用庙生产耀菌种峡的基择本原花则想安全绿性(哗必须仁同时岔符合邀以下热两个线要求租)网菌体盏本身及不产张生有唯毒有袖害物窝质。辞不会烦危害虫环境雀固有遮的生墙态平求衡(核主要赞针对性某些缠基因建工程话菌)还。怀(二威)语有效虑性(悔能满蒙足一陕个要浓求即境可)析菌种枪本身析具有扑很好雨的生谣长代席谢活够力,钞能有捡效降打解大仗分子龙好抗需营养徒因子葱,合揉成小体肽和织有机劣酸等霉小分挑子物戚质。铁能保额护和虎加强挠动物判微生朴物区貌系的磨正平孕衡。肉这种除功效公主要恨是指楼能有棕效维俘护和锤提高芹有益勒微生拥物在易动物体消化河道中磁的数栽量优先势,讯其可拼通过驾两种引方式伞达到常:驶一种愤方式茶是利物用发弟酵饲疤料的什生产存菌种烘本身课就是适从饲婚养的膊目标允动物痕的消嫩化道友中分吐离出躺来的隶有益凝菌,译通过嚼饲喂闪高比喜例的厚发酵滋饲料幻直接投提高楚有益模微生议物的嘉数量哗,形必成数卵量优锄势;答另一瓶种方强式是烟利用冤生产倍菌种味或代咏谢产冲物可采以选浅择性赤地抑其制或纳者杀奋灭有行害微叮生物米,形觉成有民益菌体的数闯量优馒势。图实现萌第二幅种途邻径的无方式填可以精多种纺多样残,比横较常免用的述有:看耗尽臣氧气待,降自低体愉系的议氧化咏还原醉电位京;降观低环宿境的无pH压值;滴代谢箱物中隔含有晴能选都择性把杀灭归大肠朱杆菌夺和沙镜门氏先菌等渣有害栏微生砌物的得抗菌过物质葬等。卷发酵庆饲料表生产夫菌种叨之间址的相吵互关债系哲目前蜻人类径可利厕用的时这些引发酵均技术钻基本阔上都杰是纯勇培养彼技术于,而窄实际愤上在巨自然零界中辽很难舱找出转单一坐微生歼物存某在的稍生态非环境洽。面据已极有的场微生骂物研楚究报书道,奥地球饰上存绣在的远微生剖物超像过1漫00受万种遗,而穿人类怒所分墨离的巨纯种欢累计棉不超镜过1默0万性种,柄做过收比较铃系统丈研究兽的不岗超过西1万天种。村根据决目前挠已有刃的研回究成念果,词大体哥可以框把微棚生物病之间筑的关拴系分拦为以纲下几极种:虏中性个共生选、同荷住、湿互惠框共生笼、共殿生、吼竞争言、拮碍抗和件寄生递。杯中祖性州共软生穷这是沾指两义种或迹两种涉以上养的微须生物项同时备存在己于同侍一个敌环境马中,装但是隆它们茧之间饭没有表直接狮的生抛态关摸系,听各自狡生活清互不泛干扰赠。散例如且淡水仰中生遭长的诸衣藻类和水线生细小菌。淋同痰住府这是祖指两川种微芒生物血同处目在一躁个栖哗所内框,其问中一皮个获愚益,渣另一现个不营受影卵响。滥常见阶的现图象是候一种蚁微生蹄物产蒙生一裙种代垦谢物堵供另掌一种凶微生制物作蹄为营盐养物熟质,毛或者宜产生黎适合它于另赠外一窄种微捷生物路生长礼的环吨境。污发酵迈饲料梯生产会中比境较常凉见的赖例子冻有以碌下几耳种:欠酵母球菌能沈在高明浓度涝的糖戴液(雁25疏%左踩右)汉中生象长。堤当糖拥被酵稍母菌片消耗淘以后踩,糖绑浓度费的降提低就势有利宝于不层耐受趋高渗英透压贸的微就生物枪(如迷乳酸惕菌)岂的生用长。狗能分肥泌淀肆粉酶向的微桐生物羞(芽泼孢菌辅)水骑解淀咳粉产狡生寡钞糖和趋单糖技,为疗另外搏一些倘只能材利用絮还原傍性单璃糖的痰微生姻物生只长提资供营睡养。决还有迷一种户比较滑特殊吐的同恰住微创生物王,好峡气性础菌可撇消耗懒氧气冰,降洲低环松境的谎氧化富还原劳电位胆,使任之适皱合于德厌氧习微生阳物的符生长而。这博种同艺住关泉系只舟能产材生在畏开始没阶段惨,在存后期鸡就不贩是同描住关栽系了狭。这梨种现佳象在慎发酵伯饲料钉到生晃产过皆程中照经常凯遇到口,也部是利弃用微凝生物钱组合耻发酵武生产渴发酵肃饲料将的重甜要理勿论基筹础。勿互俊惠拣共装生桐这是叼两种庭微生益物互恰惠互嫌利的虎现象鱼,比晃较典熔型的句菌种保是阿姨拉伯贸糖乳把杆菌载和粪煮链球巧菌的羡组合姥。妇阿拉精伯糖梢乳杆鼠菌闯不能萍合成豆苯丙阳氨酸灰,粪宋链球崇菌不寿能合馆成叶全酸。颠阿拉鸣伯糖畏乳杆伏菌不嚷能在崖缺少裹苯丙乔氨酸惜的培榴养基工上生奇长,跨粪链罚球菌扎也不暑能在沿没有漂叶酸亡的培别养基档上生贺长。挣但是蹲把它销们组浑合在倚一起间,却祖可以到共同搏在冬没有裤苯丙线氨酸籍也没听有叶凯酸的衣培养大基上裕生长锁,因椒为适它们至能相锤互为赢对方克提供塌必需品的限捷制性资营养泰物质妙。都这种虑现象劈在自牺然界寒中普枕遍存工在,院发酵族饲料演的菌盯种组心合应辞该多茎考虑讨这种枕组合须优势趴。姿共定生僚共生坛是指值两种迷微生弯物在会同一胶个严位酷环拌境中头彼此束相依崖为命卖。比卖较典学型的蠢例子芹是地胀衣,幸它是淘蓝细辩菌(芬或蓝家藻)敢与真系菌共祝同组际成的督一个纸形态滩和生丑理单朽位。煎蓝藻旱或蓝孙细菌望的细颤胞毫仅限仔于特鹊定的厕层内朵,地威衣内敌的菌液丝交般织成历菌丝需组织激,形誓成一限个稠荒密的梯外皮泛层。赌皮层扩下为鞋蓝藻租的细伸胞层钳,在五下面蹄为菌经丝疏厨松交笼织的澡菌髓板层。侍真菌位可以郊从蓝嘉藻获涂得碳割水化无合物止,真棵菌菌虎丝所氧摄取乖的水洋和无丢机盐择又可屡以提淘供给萌蓝藻握,因永此地极衣能租耐干栏旱、夺潮湿辟和抗胀寒冷裹。这锣种现迫象在瞎发酵筑饲料坑的生发产过价程中问很难员遇到就,少悄有实母用的芽例子锁。兔竞绝争衬当两尾种甚微生轨物对惜某种牙环境匠因子来有相月同要恐求时瞒,就触会发汗生生煌存竞塌争。抵由于爆微生叙物的眯世代浇时间监比较军短,极代谢樱强度糠大,到所以咱生存倚竞争辽往往晃表现阁的很变激烈捞。狂在一负个生赛存环兆境内桶,不况同的荡时间唯会出办现不躲同的交优势何种。堪这种肚优势补微生暮物在六某种博环境共下能冶最有营效地秒适应胖当时扣的环疼境,宜而环继境条垃件一岂旦改岗变,幻就可爹能被催另一逗种微惯生物父代替伍并发萄育成斥新的马优势啦种。寨目前林工业睡化发克酵生懒产之扇所以捡采用歪纯种病培养尤,其舍主要爹原因骡就是碗消除云其他孝微生冬物的蒸竞争裂。目译标代伐谢物涛合成京能力续强的泻微生呈物其组生长强速度弹往往院比较电低,岁至少窑比同芽类的络野生亭菌低脱。野坟生菌俗的代寿谢活篮动是炭很喂“料经济腔的午”权。如马果从虑生长喉速度崇分析握,它吴们的搂物质遮和能鬼量的魂利用鸭效率带要远响高于睡生产除菌种趟。但垮是,能由于约生产朗成本布的限催制,健发酵井饲料稍的生衰产往切往不丙能采斥用纯网种培围养,呢所以蒙微生鸽物之陆间的废生存匙竞争翻不可蛋避免果。总如何便巧妙近利用凶微生桐物之当间的孩生存姐竞争栋是研暂究微刷生物副发酵炮饲料版生产贫的一尤个非砌常重抢要送的本课题暮。亮从理侄论上伍分析姐,通言过控草制调共节微却生物怜生存抗环境杯可以产调整览物料偷中微闸生物睛的种城类和讽数量各分布挥,从翁而达释到利哗用微悼生物吴有益疼菌群拘种群酱优势屈发酵吨饲料窗的目罗的,议但是厕到目吵前为塑止,列有关钟方面联的成拔熟技露术还认是很疗少。犬六、魄拮暖抗必一种锄微生庙物可竖以产纹生不由利于稀另一育种微田生物链生存渗的代旦谢物眠质,搁或者屡通过剂代谢丸活动奋改变的生存岁环境求,而展这种表环境杠不利戚于其驻他周谈围微艳生物许的生闹长,歇这种安现象台就称垫为遮“闭拮抗咽”居。古如:缺青贮段饲料多接种移的乳则酸菌捷和醋焰酸菌锯在发全酵过皇程中倾,不尊断降狸低p虑H值修,结尘果绝化大多辫数不路耐酸解的微金生物菊不能劲生存哲,甚喊至趋踪向死线亡。摧酵母响菌在寨无氧垄条件己下将裕糖发篮酵成嘴酒精烘,当迫酒精银浓度附达到必一定破数值答时,帖其他睡微生塔物就阴不能港生存俯。据研究德发现奇拮抗瑞还具撤有览明显纺选择孔性,索农业缘部饲残料工树业中升心分慰离获诊得的趣枯草岁芽孢饮杆菌缠MA燕13真9能逗分泌慰杀灭提大肠津杆菌统、沙脉门氏湾菌和芳金黄考色葡样萄球宿菌的悲抗菌拣肽(甘细菌赵素)见,但强对自件身、松酵母只菌和沸乳酸盒菌的村生长态代谢慢基本仅没有渡影响带,这百种拮革抗的顺选择歉性是降发酵参饲料屠研究沾所希命望的桶。羊七、浆寄民生克一种茧微生速物生躲活在引另一绒种微旅生物掩体内仆或体释外,败依靠欲摄取柜寄生省细胞滔的营万养进刷行生控长繁笔殖,长并使阀后者企遭受派损害鹿甚至沃死亡苗,这库种现冬象称吐之为们寄生检。这稠种现姐象在加饲料阔发酵夺过程住中可恐能存单在,蚂目前拌在研笔究中福还没披有遇撇到。偶微生南物是厚发酵欠饲料鄙的动疯力来堂源惹,研易究发束酵饲每料中朱微生笨物的概相互沙关系他是获鹿得高赏质量多发酵煎饲料陆的必焰要前栗提,奥也是针饲料迁发酵刊生产化的核奸心。嚷第四势节滴发酵由饲料吃的生废产工条艺切固态疼厌氧纸发酵汗高活众性生洪物饲眉料渠相对谣于好取氧暖发酵渠,厌偿氧发蜘酵的可能耗避低,关微生驴物代沈谢产提生的喇热量唯也要太小得促多,友生产奶过程而往往国不需纤要翻冶拌散冠热。枕另外隶,发睬酵产贡品只若要密鹿封得雨当,梢即使易长期配存放妙也不尤会腐宅败变阔质。讽目前液比较呈典型飞的固竭态厌妙氧发胸酵生碑物饲猫料的裙成功扶例子滋主要犯有两失种:见一种响是适栏合养挂殖户址自产耐自用绣的袋朱装发究酵饲但料;惯另一伍种是斧属于甘规模循化流胞水线担生产华的袋苦装发寸酵饲类料。庄它们羡接种膛的微员生物山基本悔一致滚,主正要有碎酵母牌菌、窄乳酸裹菌和扎芽孢册杆菌暖。杆适合却养殖搭户自仿产自昌用的酬发酵旱袋是出一种惧普通揉的密罪封包询装袋若,物越料接想种以焰后装督袋,立再将寿袋口赛用绳老扎紧坊,物鸟料的艳含水寸量为纷30稿%~巡40尿%顽。开获始时镰,酵压母菌歌消耗辛袋内煌残留液的氧角气进汽行增飘殖和区呼吸觉代谢壮,同屋时也班为乳栗酸菌冬创造相一个欠厌氧抄的生丹活环湾境。谋然后圆,酵韵母菌贸在无圾氧条狠件下春进行部糖酵堡解,邻产生涉酒精箩和C抱O垫2川,乳驾酸菌声也同境时增分殖、弊代谢熔,产黎生有神机酸也。随痕着袋志内气北压的项不断瞒增加董,不星断有飘CO种2群带着封酒精至和有轰机酸叙排出程袋外敞,管寻理饲扭料的境饲养都员可怠以根璃据排搂出的竞酸香区味来六判定束物料姜发酵全的成客熟度粒。告有氧续发酵显阶段邀:根C蚀6冈H蔽12单O米6淘+6生O衫2题——巷→亏6C格O厦2段+6谢H暮2咳O傅无氧锁发酵加阶段圈:蜂C渴6穿H龟12叉O榴6肿——隙→指2C轻O吐2燥+暖2C践2富H题5乐OH膝(乙兴醇)通在夏仗季,患发酵龄3~至5d宅就有偷明显放的酸喊香味野。在谎冬季条,时堆间需趟要延目长。森如果赞环境稀温度重低于王12响℃求,发遣酵就爪有可助能归己于失嚷败。己酵母松在低尾温下候长期删代谢僻低迷热,不欢产生渐CO湖2,育使得蜂外界脖的O被2长挥时间烤与接续种的鱼乳酸第菌接安触,肆会导绩致乳杂酸菌刑活力先大减菠,甚喷至死势亡。锡事实邪证明罗,如陶果环赚境温喂度缘适宜护,时律间控式制得仔当,记采用腥上述贫袋装仿式取土办立法发役酵,雁也可休以获柄得质苏量很鼓好的印微生么物发立酵饲层料,今活性某乳酸塑菌现的含倘量能滚达到至10塌8诞cu承f/宽g以按上。布将其踪在生布羊驻配合贪饲料番中添沿加1蛙5%胞~2斥0%枝,生撤羊乓采食况量能平明显宅提高庸,最绑多能硬提高茎10供%以暗上,锋而且社增重漂速度追和健蔽康水迹平也萌有显酱著提秃高。读这种欠工艺刷虽然扒简单材,但拳是受膛限制性的因矮素很欧多,显质量名标准塌也很混难把滑握,储实际测推广该有一曾定困深难。治为了键使这谷种袋孕装发清酵技亭术进丹入程峰序化改、工配业化购应用铲,发讽酵饲壮料的台质量括能得丹到有弦效保过证,鞠必须油完成软以下移几个减前提述:发庄酵过修程不尽受环芽境温饰度限阵制;迷产品紫质量吩不受战存放秃时间甩限制垒,或妄者保灶质期蛙能达借到三观个月炮以上脚;产府品在副储存远和运分输过简程中匀不受窝外界悦空气危干扰氏。倦农业们部饲钻料工伤业中旦心的心微生穷物发迈酵饲涝料课胆题组弹发明竹了呼筒吸膜违可移搏动式答固态攀厌氧引发酵姿饲料崖(也魂称袋害装发悄酵饲畜料)厌生产径技术跌。嚼这种罢发酵铅技术熄的具焰体工面艺流志程如贯图糕1-吐1。发酵原料发酵原料粉碎机过渡仓电子秤搅拌机菌种液计量和包装机成品最原料洒接种悲以后窗直接惩进入样包装庸袋中垒,包淘装袋鲁上附淋加一支个可陈以调碎节气堡压的丘硅胶嫂膜。笑在发革酵过倘程中缠,微却生物竞会产渣生C裂O弦2贫等气痛体,歇使得碰袋内孕的气篮压大乓于外运界常晃压。榴当袋懒内气炮压达滑到某叫一临猎界值啦时,手气体盏通过见硅胶薯膜排迟到外剪界。动但是添外界笋的气钻体始鞠终没岩有机豆会进夜入发挪酵体揉系,侍从而流也就屑排除耐了外近界杂棵菌的备干扰落。完研李制的西特定殿微生痒物菌鸟种组痰合能掩使乳均酸菌席迅速尼繁殖景,占税据数锻量优买势,充原料跪不需畅要消牢毒就雷可以情直接适用于千接种级培养支。徐这种绩工艺腐很简滤单,举如果谦以日妹产3狭0t姜计算坟,设鸟备投巩资不政超过怜40锦万元练,特民别适仆合在撤我国啊广大践农村斥推广表使用扣。煌发酵件饲料晌生产蔬技术爹发酵戏饲料握用乳石酸菌寺的分劝离筛织选愁乳酸坚菌是顿一类剧最常互见的民益生样菌,姻生物扛饲料洪的发惩酵生酷产一运般都贷离不仔开乳觉酸菌患。衰乳酸妙菌种责类很能多,拘市场免上流男行的与产品司也极各多,首至少味有2朱0多丸种。夸大量刃实验挣证明肝,只崖有动猛物消耀化道项国有剩的微甲生物惑才能剖在消惰化道鹊内定把植,挨外源叙微生谜物只鼻能短屡时间除存活叫在消欣化道造内,舌不可橡能长拌期融谁合到是动物颗消化被道的事微生绳态系刮统中继。筛劣选发厦酵饲土料的絮生产背菌种怒,其汤主体狐应该营来源汽于最虾终适志用的损动物陵消化真道印,而迅乳酸梯菌细暮菌是金动物筛消化份道内极起主角要作垒用的奸微生孩物。蔬样品忠的采向集煮为了悔获得孔合适衰的生何产用膜乳酸出菌,臭样品沫的采肤集很苍重要贼。适艇合于拾实际喂生产德的乳运酸菌票必须兽来源似于健楼康动遵物的飞消化甩道,果最好影是在狮发生持了瘟巨疫的涉养殖直场而旧幸存幻的畜赛禽。蜓发生瓦瘟疫咽的养青殖场包,动豆物大搁比例倒死亡安,幸沙存的黑畜禽须虽少替,但司是生担命力蚕很顽牺强,投是极皆好的苹生产苍菌种捉采集萄样本举。能以下坐以筛证选符掌合生黄羊乔健康形养殖隔需要五的生滥物饲馋料用刮乳酸迟菌为室例,睬叙述税样品叫的采注集和朝乳酸豪菌的秋分离字。在慨实验曲室腊中觉对生击羊尊进行苦攻毒干试验让,在狱饲料驳中不失断加塌大大辱肠杆贞菌(唯实验庆用E厅.C静ol屑iK艰88奶,这刃是一除种常芝见的唯攻毒滴试验举用大稀肠杆会菌宗)限的用突量,炮以检蒜验生奏羊待的抵碗抗力闭。经纠过5疯~7标d的么试验谦,生颗羊姓的健吼康水稀平越虎来越塑差。热我们异选择忠其中水两头偷最健梯康的晋生坡羊泊进行男屠宰撞,在编无菌栋环境动中提国取它杜的胃哀液、穴小肠券液和秋大肠钻液,谋迅速护保存妥在无蛇菌生岁理盐短水(晓Na置Cl济的浓蝶度为舅0.昏9%妥)中沃。颗目标碧乳酸杠菌一谁般都棕是厌爱氧菌震,为离了确甜保乳煎酸菌斑的活哨力,饭需要轮尽可跳能降筝低生升理盐蚀水的捏氧化肆还原友电位骗。最碧简便射的方咬法是赠在溶寿液中掠加入赛适量逼的半纺胱氨敏酸,其半胱舰氨酸超有吨巯赞基(刘—步SH角)睬,有够很好索的还羞原力必,可运以消剩除溶以液中誉残余台的氧南。岭乳酸屋菌的德分离企纯化疗样品跨中的挎目标复乳酸悟菌含离量一佳般都回不是开很高催,而蓄且还魄污染三了其忽他杂筋菌。字为了恭提高凑筛选尾成功右的几宗率,醋在样脖品进软行分诞离纯和化以伤前,划可以彩对样雪品进丰行选聋择性竟增殖鹿培养罚,以领增加滑目标塌乳酸抢菌的争含量课。版样品告的增哈殖培践养比斧较简岛单,裁把经舰过适饺当处倦理的据样品弯接种侮到适萍于目蜘标乳肢酸菌撇生长壶的培蛮养基既中。颈比较咳常用男的是蛛牛奶闪增殖合培养孤液,灯在无艘抗生最素牛坟奶中朵补充款6%欺~8观%的弦蔗糖烟,高片温消陕毒、咸冷却拍,然汽后用再氮气消或者跌二氧忠化碳乐驱除我溶液陶中残瑞留的静空气锹,再圈接入姿适量提采集捡的样球品,在在3愉0~锐32庸℃丛条件嘉下厌羞氧培岛养1贴0~暗24较h。撞如果虑样品辰中的街目标鬼乳酸恼菌含节量比总较低队,可箩以适遮当延赛长培篮养时伤间。身样品臣经过登预增饿殖培煮养以类后,料目标浅乳酸籍菌含每量明僚显提羡高,钥可以毁进入皮下一晨步分觉离纯谜化操蹦作。请乳酸陈菌分详离培得养基你通常急采用久MR赤S琼勒脂培南养基林,其垒营养灾组成天与p枕H如苹下:赌蛋白川胨:阻5.线0g米/L呼;牛霉肉浸僵膏:提4.芦0g没/L凤;邮酵母否膏:处2.席0g岗/L狭;葡泼萄糖呈:治12采.0暑g覆/L眼;玉粉米浆未:绿10茄.0器mL顷;衡司盘隐80洋:1治m描l震;此磷酸继氢二东钾:神1.湿0g宁/L认;三须水乙笼酸钠槐:谋3.孝0g谁/L洗;柠唐檬酸于三铵外:碗1.攻0g著/L兵;硫捏酸镁槐:春0.俗1g喇/L愚;硫沙酸锰掌:趋0.司03镰g拢/L陈;琼惠脂:岂18治.0画g这/L晒。p咳H6吩.2冻±勉0.俘2。祸加热鞠溶解羞上述僻各组虎分,多配制茄成均狼匀的仇溶液脂,分降装在蹈厌氧宫滚管已中(梳每个烛管中宪加5凶~毅6m斯L化)车。在垦11旁5局℃营消毒折杀菌胁30滩mi叮n。恭冷却惠至据50岛℃歪左右睁后,鹅在冰季水中寿滚动丝滚管著,使晚固体沉培养各基均真匀凝拢固在像管壁合上。秀为了趣指示龄培养猪基的肤氧化舍还原样电位摧,可舰以在秀培养宽基中艘加入咐极少戴量的双刃天漏青(继一种填显色碧剂)孝,浓臣度0尿.0设2%矛就足地够了寸。在纳低电篮位时炭培养灰基显论蓝色专,随话氧化颜还原森电位下不断钥上升燕,培轰养基未的颜肃色逐串步由买蓝转慎为浅怎蓝、鞋粉红妖、红迎色。统如果魔培养松基的刺颜色仇转成计粉红肠就基升本不蕉合格忠了。雪同增毫殖培垫养过乞程一件样,痛在M延RS岂分离蔽培养扇基中何加入般适量漫的半已胱氨迅酸可樱以在岛一定闹时间枕内维尖持环畏境的猴低电盗位。欢分离式纯化滩培养患基准侧备好鲁以后忌,就膝可以样进行蚀目标她乳酸帆菌的刃分离座操作陈了。见在超异净工察作台著上(址或者浴其他问无菌桶环境查中)大,对拆经过玻增殖腹培养却的样受品进敞行梯偏度稀祝释,汪稀释毕液还尺是用习无菌星的生孤理盐界水,匙把稀腥释后恶的样然品接仅种到邮厌氧围滚管夜中,倚密封貌(滚兔管有捉密封狡盖)旗。在岭30故~钱32跌℃蜜条件垦下培究养1科~2迁d。校为了助提高蜡筛选蝴几率脚,可常以同巾时做落多个雄稀释服梯度旧样品玩的培既养。葱如果残两天执以后筒不出雅现理皂想的倦菌落穷,可蓬以再厘延长朴培养始时间授。池虽然疼乳酸五菌的改最适犬宜生护长温伪度是岛37投~驰40省℃蝶,但茎是宇在分价离筛源选过猴程中热,培雷养温吃度应验适当津调低奸,以射降低包其生稼长速绳度,俘这样献菌落史之间乒的差崭异可例以更激明晰疗,也哪更有确利于卸挑选两理想盲的菌机种。悬经过船上述杯分离途操作断,我旷们获疗得了貌5株妙乳酸弊菌,哭它们冲分别遇是:锡1.叔来源骄于柴羊跌胃的瘦格氏恼乳板杆索菌榆(L樱ac步to学ba烦ci们ll拆us微g请as害se剃ri燃)嫌;骑2.吸来源句于十规二指达肠的症罗伊牧氏乳萄杆菌闭(知La蚀ct响ob匠ac苹il原lu熊s锦re劈ut疤er润i役)燕;挎3.酷来源光于小下肠的皂屎肠久球菌支(E果nt仿er率oc痛oc锈cu野s翠fa事ec政iu额m)岩;演4.胸来源归于空培肠的慎嗜酸远乳杆毫菌(钉La县ct栏ob任ac班il隙lu丢s投ac软id点op穴hi史lu认s吊);吉5.仔来源信于结秀肠的绣发酵白乳杆聪菌(跳La抢ct科ob岭ac姑il朵lu事s伐fe坦rm庙en盾ti棍um辰)。饥三、酸发酵库力和祥耐酸盯稳定鹊性分确析巴为了育后续纠生产滋应用突的需爬要,岂我们胞对分霞离获州得的料乳酸洪菌进资行发附酵力知测定盯和耐袍酸稳羽定性询试验激。发嗓酵力字测定帆比较累简单莫,主狂要测碧定其信乳酸沉菌的击产量拔,具咏体方喂法如良下:曾接种西分离惭获得原的细淹菌纯猪种于剃试管非培养辜液中归,3厌0梨~肝32涉℃喷恒温孩培养午12干h,长然后挂再扩销大接呈种到滨牛奶肯瓶中诱,3犯0~奥32升℃佩恒温膊培养驾6h今,测扑定乳季酸含公量。痕在乳摆酸发涌酵的堵过程未中乳省酸通弹常以务乳酸搁钙的轿形式络存在路,凉通过央去除掉发酵餐液中粱的葡盛萄糖挺和蛋挣白质榆,并酸加入丰适当桨浓度昌硫酸笑酸化族,钙身离子耗转化毫成难沟溶的果硫酸丙钙沉俱淀,搬使溶回解度搞不高奉的乳杏酸钙当全部旦转变馅为乳屠酸。膛乳酸伙在铜毁离子时的催于化下狡,与珍浓硫碌酸作溜用生狠成乙缝醛,芽乙醛翅能与与对羟蚀基联攀苯作词用生透成在滋5道65烂n骄m悉处有绿特征矮吸收叼的紫那色物泳质。插在一晕定浓瞎度范旺围内代,乳胖酸含五量与吗5肯65摔n虏m饥处波店长吸位光度嫂呈线目性关渡系,俊因此赛,可奇以通返过测央定渴56鸟5驻nm艇处彻的吸鞭光度纺来测医定乳伟酸的贤含量敌。睡实验匠室秩乳酸乓含量滋的测钱定途一、位原男理尸稀乳艇酸奏在市浓硫趁酸作叹用下弟加热缺,可私以变灯成乙似醛。篮乙醛能与陡羟基余联苯逃作用面可以靠生成菠红色敞的复迅合物膨,在揪56鸦5键nm沸条件洞下比辅色测饿定,碗可以慌确定撕乳酸炼含量烂。烧二、切试轰剂岔1.浇4揭.0圾%硫材酸铜旗溶液塌将灭4g耀无水粒硫酸油铜溶争解在愿水溶凯液中站,定翁容至篇10胀0m斯l。僵2.蕉羟基互联苯葵(C旅6H挣5宝·云C6牺H4涉OH葱)溶孩液雾将咽1g种羟基漏联苯鲁溶解械于1菠00破ml行浓度弊为0糊.0翁8m护ol董/L戏的N河aO习H俩溶液采中,村储存扎在褐爪色试绩剂瓶隙中。具3.务乳酸倦标准闲液龙将2耗80泻mg辆纯乳抱酸锂挎溶于凉水中傻,配卫成2殿50捐mL销溶液蓬,其仅乳酸疼浓度摸为1雷mg再/m今L,矮存放拉于板4度℃城冰箱忧中。抹在做负标准僵曲线违时将刷溶液进稀释辜10遮倍,尘使乳间酸含造量为断10名0应μ旺g/元mL地。在构分别失取1勾,2应,3重,4户,5激,6艰mL干稀释非液,挖稀释户配制俭成1易,2争,3岂,4跳,5啊,6晴μ读g/广mL果乳酸警标准般液另。师4.袖浓硫执酸溶畅液你在比霉色管牙中分速别加蹦入1痒mL顶乳酸者标准沾液和张0.麦05芒mL忘硫酸步铜溶薪液,像然后妨加入吗6m驱L浓迈硫酸蛙,放亏置5载mi乘n,糟冷却庄至键20习℃抗以下壶。排三、件标准候曲线狼的制完备和辫乳酸彼含量绪的测遵定目在上些述比秀色管弓中加延入0魄.0往5m曾L着羟基笋联苯莫溶液券,混灯合均屿匀,桶在室源温下伞放置割6~柱8h爆,过平夜。温在5原65亲nm夜波长色下进压行比泉色测失定,弓绘制柜标准箱曲线傲。惩(1极)忽最大摩吸收旷波长纵的确鸭定贷乳酸及发酵蝇液样减品显扛色后吗,表需明,替最大痰吸收姐波长呢为狭56讽5牌n晕m。所图己2买-老1秃最大系吸收偶波长斧的确怪定鄙(2批)掏最佳哑显色谋条件坚的选佛择尾结果派表明庭,氢座氧化而钙和腔浓硫府酸的蚕加入岁量对交显色基反应请影响途显著叔,其殖余因佳素的掏作用筐不显粗著,罚最佳丈显色异条件胞为A拔2B膝3C面2D纺1E巡1F权3厘,即凶氢氧扑化钙事0.饮05啄g目,2诞0%陷硫酸寺铜围0.筐8喂ml废,浓救硫酸篮6孕m足l,槐对羟粮基联半苯甘0.姐12差5韵ml及,静山置时称间漂15纷m我in节,加戒热显牧色时说间跪5袜mi敬n。勒(3餐)圆乳酸命标准相曲线姥的制庸备韵乳酸划标准倚应用僚液浓症度在馅1银0应~肿80方街μ着g/增ml处范围陶内与呈吸光凉度值斯基本众呈线菊性关狗系,章当浓抛度大霞于等厨于模60纤忆μ并g/樱ml猪时吸择光度堵值大律于杀1,粗考虑赏到仪贩器误跪差的转因素仿,故销制备勇标准讲曲线涛时浓缠度范跟围取坑在夜15首、2努0、抄25蓬、3艇0、茶35玉、4罪0、沸45究、5饺0旦μ跪g/叫ml凳,得里到如省图的烘乳酸然标准押曲线世,求博得标撤准曲燥线回匹归方饶程为谢A=遗0.鸟01郊89目C线-0间.0裹80邻8(意A为餐吸光跑度值择,C苦为乳钢酸浓毯度,绝n=纽8)碰,r质=0桑.9烛98昌9,快在仓15辫~驱50很μ招g/遇ml羽范围守内呈悦良好帆线性植关系费。刘(图省2怜-御2薯:朗乳酸考标准稼应用也液浓卧度与码吸光果度值罚之间洪的关此系撞)难(图胖2察-怒3古:扑乳酸陡标准斜曲线立)磨本实腾验对初发酵低液进堆行预冠处理蠢,排项除蛋雄白质智和葡天萄糖如的干狗扰,猾使测右定结正果更红接近洋真实险值;时优化感了显班色条电件,迁使测值定时蹈操作叮简便直,精煌确度沙高,怀显色疾稳定眉,准拴确度窗高,目适合乖于发蓬酵液况中乳眨酸含刺量的塞测定泰。谅耐酸最稳定够性分谈析主打要是航考虑傍乳酸乡菌在似实际厨使用处过程航中过抢动物溪胃酸恒的成熟活问灰题。医生长打育肥篮羊的白胃酸著pH植比较赤低,头一般笨的微蜻生物符很难扩在其每中存彼活,剩这种壮功能嫁实际绑上也贫利于演生羊均的健鲁康,备使它丘可以谜在卫邀生条徐件比妖较差碎的环悼境中帜生存摘。但驼是这丑种特睁性役不利趟于外昨源有芳益微衣生物课的存躲活,遥外源刃有益嫁菌必欺须先劣通过泼胃液炎的考香验才遵能达皂到其草发挥育作用那的场蜜所(苗肠道蜘)。盏所以遭耐胃箭酸稳稠定性翻也是圆决定赛乳酸徒菌实滥际使闸用效辈果的走一个谅重要跨指标腊,具滋体检枕验方性法如搭下:斜取1广.0抵mL意活菌根数量安已知蓬的培昆养液陈,在浑无菌茎条件柱下,段接种品到生笑长羊些、牛勾的胃子液中巾,在张37浸℃兽恒温愿培养冬。同气时做蠢6个轿平行贤,每拘隔1栽h取繁样1痒次,浩分析毒乳酸税菌数恨量的酸变化慰。屋在生著长羊涌胃液隔中融,上由述5索株菌幸都体出现了朗很好没的稳遍定性付,维其存日活率城都在孙50纳%以蜓上(垃见表药2-插4匪)阁表3马-螺4钢各种经乳酸烟细菌识在生煌长羊头胃液白中的原稳定崇性军时间稍/h刃1领2怠3滩4退5崇6惩格氏朋乳杆洲菌存灭活率射/%恼88陆.2顷82屯.6斥91掏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用刃前,强我们舒必须刃做严杜格的纹鉴定边。浓形态捎学鉴填定顶首先饱进行瓶形态鸣学鉴枕定,错观察供其单孤菌落舱的形酷态,伞并对江活细惑胞进贫行革植兰氏糕染色请及芽哲孢染焦色。露MA较13梯9的绑细胞剂呈直畏杆状慰,芽俘孢椭想圆形潜近中踪生,革孢囊锈不膨系大。修在M誓NA链培养每基上厕培养承12询h,父产生中黏液踩,细饿胞形霜态为平长杆汽状;怒24局h后所菌落耳圆形廊,隆薄起,侍表面茧皱杨褶防,不粱透明睁,干绿燥;尾培养诚至3要6真h,除菌体传均以佣休眠石体芽赛孢的史形式岸存在雄,菌纳落呈雄白色佳[图凶2-馒8(随1)层]衣。在痕液体喝静止冷培养驾时有恨菌膜士形成僻。甩图2霉-8合生理灿生化血鉴定阶形态理鉴定晚结果米(图绕2-增8)此符合跌芽孢签杆菌缠的特慌性,哈接着掠进行春生理撞生化零鉴定游。生谋理生首化鉴小定比时较复暑杂,秆涉及秆的操堵作步卸骤很库多。幸参照霜《常贩见谣细菌晋细菌速系统览鉴定其手册厕》捕中的复方法忧,对浩试验塞菌种资进行凭糖醇后发酵惨试验圣、需脑氧性俱测定矩、V穿-P范试验洁、淀座粉水付解试崭验、前明胶元水解系试验捧、过编氧化蚊氢酶从试验垮、柠作檬酸平盐利栗用试党验、规石蕊订牛奶封试验泼等。自芽孢盈杆菌糊鉴定接用培订养基信如下盯:煌糖醇净发酵莫培养晶基及斧葡萄贯糖产师气试卧验妙培养奴基组药成:公(N客H甩4椅)纹2雷HP功O盼4须1.干0g柴/L黄;M容gS段o膜4苦·灯7H池2思0端0.淹2g穴/L棵;酵痰母浸府膏袭0.悦2g染/L扬。任配好永后加窃入2究%的泪溴百润里香劈兰指谨示剂盆1m谱L/逼L各,调释节p沈H为尺7.步2,践分别积加入肥1%雅的底皆物(浩糖醇饰或者郊葡萄避糖)它,按偷照底演物类拒型分久装试磨管,和并将钥杜兰惨管口纸朝下夜放入相试管陈,闲11口5姜℃扎灭菌禽30助mi育n。甜(2短)运挣动型沸培养刚基适琼闲脂:塌3g菌/L戚;牛示肉膏潜:鸡3.俊0g午/L桂;氯玩化钠貌:5无.0杰/g赤;蛋叙白胨谊:倒10廊g贺/L爷。p骗H7土.0者~7口.2鹿。议12苹1兄℃赔灭菌谱15径mi表n。镇(3后)V撕-P跌试验威培养奴基览蛋周白胨鸡:紫5.蒸0g旬/L拘;K浅2H绢PO盏4:吸5.脏0g驱/L展;葡毕萄糖元:晋5.越0g固/L巧。p朋H7成.0搜±招0.惑2。竟2m见L/两支分转装试枪管,白12棍1摄℃筝灭菌险15增mi静n。示(4宝)舒耐盐骄性试唉验培岛养基课命营养习肉汤攀培养照基分楼别加境入2翠%、害5%养、7高%、抖10胆%的锣Na锐Cl签,p厌H7化.0叹~7奇.2绿。具12狡1前℃谨灭菌稼15不mi凑n。粘(5卸)石接蕊牛权奶试胜验培墙养基叨仿石蕊奥乙醇子溶液剑25详mL仰,脱来脂牛峰奶1速00晋0m录L,害4m街L/另支分雕装试凉管,拥11计5倦℃彩灭菌垄15畜mi泊n。倘(6耀)柠忽檬酸柄盐试扮验培梅养基屿盛Na宪Cl溜:描5.溪0g逮/L稍;M握gS锈O奥4朽·佩7H街2钱0:抬0.嘉2g换/L车;(贫NH筹4移)H企2飘PO因4淋:拴1.肯0g充/L鸭;K翠2眠HP结O否4肉:准1.算0g加/L筋;柠作檬酸骂钠:栗5.乏0g静/L闹溴百废里草败酚兰谅(浓旦度为蜓4%桌)。林pH计6.葛8瘦±改0.板2。战分装之试管便,伤12辰1育℃舒灭菌第15投mi送n。蔽(7关)明损胶水舟解培宅养基珠点蛋白泳胨:吨0.书5%突;明轿胶:季10然%夸~朝15细%。想pH范7.匹0虑~戏7.歼2劳。分乐装试匙管,英11粘5挪℃吩灭菌倦20报mi够n。盟(8尽)淀摧粉水渐解试威验培淹养基魄煤可溶所性淀畅粉:情20践g耍/L祝;K俯NO睛3:竭1.位0g乳/L扔;N泻aC姥l:议0.旋5g刚/L催;K沃2H斗PO浪4:膜0.饶5g越/L肠;M毛gS寸O4绑·掉7H存2O吵:创0.秃1g能/L惑;琼湖脂:牌2.剥0g慧/L聋。p政H7恳.0宽~7礼.2赵。功12委1遣℃密灭菌顾15蛾mi患n。刃(9盼)厌捆氧生栋长试漂验培稍养基防藏营养厨肉汤兴培养返基,村分装斜厌氧且试管疮,充尺氮除治氧,肿12弓1猛℃烈灭菌娘15喇mi范n。沾生理降生化窃试验共结果蛋见表垦2-传9。疗表2泊-9而李搞红谅略试验龟菌的业生理理生化摔试验装结果凤项你目依MA淋13丧9毫项熊横目线MA煎13理9冷葡萄张糖发犹酵照+柿葡萄著糖产箩气泽-归麦芽辱糖发塘酵鲜+注运动吨性栽+贡棉籽厉糖发季酵过+桶厌氧冈生长意-瓣乳糖光发酵刺+声淀粉袖水解购试验涛+驰甘露私醇发慕酵补+论H2坟O2泛酶试溪验星+旅2%遗Na虏Cl钥+并柠檬她酸盐棉试验扣+荷5锈%N茎aC斥l龄+献石蕊屋牛奶哀还原痒+洗7灶%N伏aC的l绘+骑V-更P试无验谱+奋10浆%N鄙aC直l考-虑明胶亦液化斩试验槐+婚“诚+私”饥为反袄应阳昨性;踏“粘-狸”因为反皱应阴谅性。表根据归生理榜生化守的试险验结剩果,别基本奶可以脑证明零试验作菌M私A1闭39珍是芽涨孢杆势菌。轮基因设鉴定血:1拆6S晨rR题NA颤分析纷为了挣进一赠步确坏证生的理生头化鉴寿定的牛可靠释性,雅还可恐以补卡充进瑞行基塌因序起列分阿析。冤16腹Sr模RN句A分懒析务是目点前比坚较常抽用的淋分析牌手段船。采舟用基汁因组莫DN纷A提辈纯试蛇剂盒绞提取授MA链A1雪39裹基因支组D股NA尺,并猫以此味为模醒版,史选择不细菌懂16鉴Sr宋RN先A基类因特呜性引堵物进冶行P暖CR臣扩增葵,并境对扩驱增产再物提轿纯回用收,险测定曲16昼Sr伐RN遣A腊序列赵。目较前这释种试诚验在舟实验惹设备近比较餐完善眠的生开物研村究所乌实验播室都拔能进低行。浸其结彩果证蒸实M横A1根39肢是枯共草芽闹孢杆阁菌。扩五、风芽孢趣杆菌慢的安微全性捐评价鬼确证比了芽仁孢杆司菌的宏特性平,接胶下来简需要减考虑绸其安闷全性网问题因。硬益生揭菌菌止种的营安全江性是萌研究辈开发僚中必匹须关悠注的蚊问题行。这付其中稠包括躲:单①完生产千菌种萝必须顶属于怖官方甩公布而允许只使用扇的饲窗用微想生物鸦菌种润;榨②挎使用脑的菌颤种本堤身必乒须无巡毒无各害,笼不会蚊产生范任何显毒素衣;板③攀不存慕在耐篇药性论的质谨粒或谦者耐驴药性顽基因辅不存居在转次移的倘问题慧。以镜下还麦以枯注草芽雁孢杆无菌M近A1训39制为例铜,简哀要说权明进序行芽殖孢杆痒菌安笨全性勤评价累的方召法。趁安全旱性试幕验的尊靶动词物一非般都化选用迫老鼠涨,具烟体可伶参考辈如下米方法编:宪选择爪12醒只体稍重基牌本一遣致的麦SD列大鼠辜(S饲pr悲ag截ue确-D堂aw双le巩y,内SD捞)处,初楚始体估重在靠20赛0参~链22五0g棍比较隔适合兽,雌义雄各纤半,瘦分为复两个朝实验幸组,梢一组雾用5辅mL貌芽孢绵菌悬恼液(绳10昌8c众fu弯/m荒L)低注射含到大逐鼠腹氏腔中效;另件一组确用5蓝mL揪生理雷盐水率注射裤大鼠狱作为淘试验唐对照淡。注源射前列禁食统6h劲。灌凯服后丹观察薯其中流毒症危状,能看是象否出鼠现呼偏吸困友难、童抽搐捧、肢犹体麻拢痹等搜。观孟察时殊间为凉1周刚。障灌服效MA峰13杏9的剩芽孢尘后,档所有鞭大鼠息均无留明显液临床读症状鸣,无朗一死桑亡,盾试验府组和芳对照另组间益,没两有明哪显差淘异,忍证明航MA踢13鼓9安帜全无臂毒。衬六、煎抗生枯素敏颤感性戒试验浴在实孤际生殿产中解,绝艰大多箩数的瞧动物能饲料毯都添吵加了屠抗生批素,念动物哑的肠膛道经秃常处秀于抗累生素鞠压力狐之下馒,这踪种选爪择性源压力弹更容损易促挡进细税菌间咐耐药眼性基暮因的绿传递写和转答移。丽所以忘在选催择菌柿种的毅时候思,对粥于哪闸些携赌带有饮可转稠移耐耀药性猎基因客的质俘粒的饮细菌研,从绒长远饶考虑令,在词生产腹实际跃中一掌定不虎要采郊用。泄在抗渣生素卡尚未积完全养被益凉生素运类的发绿色女添加残剂完浇全取悠代的含时候侮,抗罚生素严有时登会与惯益生萍素联记合添薯加,登因而瓶在菌帮株筛拣选的项时候沫,规会人膊为地告筛选情出对询抗生亦素具豆有抗雕性的苗微生胸物应酒用于犬实际壶,这讨种短辆期行饰为也虫加大圈了耐朝药性蠢细菌酷扩散波和转芹移的曲可能柄。所批以,剃为了饿确保念芽孢向杆菌野的使近用效孩果,孝需要现对抗傅生素泳的敏秤感性呆进行促检验坐。寿研究躺结果子显示煮(表嘴2-芳10使,图状2-画11俭),未MA更13炊9对挪试验际的十倾种抗翻生素概的敏光感性奖不一猴样,掀对杆粮菌肽袍锌不口敏感酱,对艰其它绵的抗规生素脑都有欢一定估的敏科感性药,对点杆菌强肽锌杜的耐鞠药性歼可能伟与产市生杆职菌肽蔑的细屠菌具畜有一惧定的螺同源哈性。淹图2令-1文1腾M议A1岛39勒对抗杂生素织的敏洒感性宋表2常-1设0何凤王穿秩覆凭M么A1桃39槐对抗杠生素蒸的敏衡感性戒抗生忽素名若称司浓度犹抑菌投圈直稀径/嫩mm宜结果英判定联大观悲霉素察[S嫁pe劝ct墙in会om驼yc浪in粘(S斤PT本)]纷10碌0裤μ脚g/泡片梁26骨.5坏+攻杆菌余肽[美Ba览ci均tr浩ac条in卷(B柿)]萌0.没04奉IU哄/片菌0.焦0煌-丙卡那浪霉素肠[K汽an技am庆yc妈in折(K套)]希30咱μ懒g/姨片信24平.1痒+屡多黏旅菌素竞B[僻Po珍ly叹my喜xi谁nB踪(P扛B)美]夏30叫0俊μ爱g/绍片慧12冈.8饭+币呋喃钟唑酮诸[F恶ur值az协ol旬id于on载e(弟FR乎)]绸30莫0薄μ贞g/霸片蒙21赶.3无+点红霉捞素区[E滋ry挠th盏ro染my医ci朝n(剑E)芝]遗15拆μ挖g/狗片挥24沾.0暴+公氯霉歪素匙[C畜hl鸭or趴am援ph须en网ic浑ol棍(C动)]么30猎μ饼g/粘片堤28牌.7奉+桑四环顿素印[T导et亡ra栗cy评cl馆in终e(中TE仓)]锐30压μ珠g/雨片卡17带.7贱+童万古糖霉素侧[V商an蝇co竭my绪ci乞n(于VA器)]须30经μ宾g/瞒片乎19车.2育+丈利福舍平热[R选if耕am时pi六n(接RA需)]蔑5煎μ呢g/颜片示27裹.8涂+名注:薪“只+良”界为敏敲感;烟“求-酸”戏为不鱼敏感长。藏从上哭述分般析可妄以发未现,讨芽孢趋杆菌添的分舰离筛西选远头比乳删酸菌妇复杂什,特皇别是振在安窑全稳膜定性披方面胖的检多验更缘是极皇为繁世琐。避但是霞这些磨都是旨必须蚂完成州的工详作,炒在实落际生眠产过贡程中厦,任怜何步讯骤出疾现差四错都牲有可纱能导庙致很波严重脉的后悠果。康第三兴节镰发墙酵饲筛料生究产菌狡种的足制备南和保抽存验在获魄得了库饲料堵生产丸菌种耀以后遮,需返要对扛生产很菌种业进行馆扩大抖培养撤和保撤存,需在生鹅产中表称为辜制种装。生味产企妻业的棚规模铅不同旦,准坑备生朗产菌恢种的丸方式公也有夏差别祸。大威型生衬产企申业由为于用携量比赖较大煌,往括往自喘己制颗种,睬现生浅产现竟用。绘生产沉规模灵比较逃小的放企业色倾向沙于购谦买菌味种,唱或者婚部分激购买存,部袄分自墙己制挎备。调摊在前苦期的盲叙述违中,祥我们圆已经渔知道僚,发另酵饲绣料的猎生产导菌种在主要它是乳竭酸菌斗、酵恶母菌宰和芽器孢杆蚕菌。送现在候就针芝对这骂三种功微生桨物的糊扩大朋培养芝和干梅燥保仗存进痰行论宏述。倍一、萝乳酸遮菌的刊培养乐乳酸袄菌是释最常厕用的般有益艰菌,茄一般蝶都是袭厌氧顾菌,愁很难鞋制成吩干粉丢,最奉好现糖培养洞现用排。推乳酸推菌培斗养最领简便救、最嫩成熟财的方点式类岸似酸模奶的孙发酵竟。在考无抗则生素会污染社的牛垄奶中倒加入腥6.咱0%夕~8疗.0博%的毅糖,执经过日消毒霜,冷搂却至敬37茅℃兼左右从,在茄无菌她条件象下接虽种、仆厌氧奥培养地,就券可以使获得黎比较薪理想仇的培俊养物蒜。以绵下是景在实号际生鹊产中毅采用岩的乳剖酸菌妇扩大氧培养泼方法伙。兴选取轿无抗培生素豆污染荣的纯总牛奶婶10哭L贡,加岛入6垄00句~污80躬0g杰白砂狗糖(超也可雁用红博糖代宵替)避,加深热至肝60其~让70佳℃纳,直针至蔗讲糖完驶全溶罗解,疫然后谅分装旅在5宵00工mL饱三角画瓶中蓝,用赤棉花银塞塞誉紧,评外包笔牛皮哭纸。毙在另11境0府℃板左右斤消毒疫灭菌纲10薄mi馅n,缎冷却柴至旦37挽℃纺左右渔,接眨种乳逃酸菌狮,这遥样不鞋仅可萄以提犹高糖济酸转廊化效够率,稀而且纱乳酸且菌培皱养过犁程容致易控碑制气沿压。歌在3辜6~秋40速℃攻恒温禾培养旨20捉~2相4h牛,就请可以干用于埋后续古的发按酵饲文料扩需大接诱种,态乳酸条菌培钩养液犁与发恩酵饲尖料的虫接种敌比例乒为0雄.2际%左生右。流需要强强调想的是倦一定饮要用冶无抗犬生素镇污染哥的牛四奶。揉乳酸困菌一零般对溜抗生悄素很赠敏感纵,溶御液中颗只要扑有5浮mg暖/k讨g的扒抗生隆素获就会算对乳陵酸的泳生长位繁殖执起到献明显酒的抑隙制作缝用,哀基本替不能阅获得在合格研的培膀养物困。如趣果没租有合么格的悟无抗球生素估污染赴牛奶糠,可娘以用阳无药祝物污职染的续豆粕耕粉。岩豆粕爱经过役浸泡泊、磨渐浆以蝶后可麦以替洗代牛聋奶,逼豆粕殿干物说质在延溶液饥中的膝含量藏为8飞.0背%左祸右,宗类似毒于豆背浆,梦其后扎续的辫补糖剥和接胶种发倚酵过遇程与释牛奶烦发酵怠过程店类似去。也借可以猎用无胳抗生回素污疑染的掏奶粉请(如乳新西申兰奶晚粉)排加水谁调浆貌(加右水量钻是是奶粉马分量导的8呀倍左传右)狼,恢磨复成易原始数牛奶绑的营娘养浓部度龄。堤二、莲乳酸泼菌培龙养液掏的脱水水干聚燥件传统药的微私生物订培养形液的型干燥潜都是变设法奏先除珠去培陈养液湖中的摸自由塌水。呀但是粗对乳维酸菌赏培养掘液来圾说,机除水章是比毛较困紧难的留单元旗操作烘。乳螺酸菌石对热泛和氧躺气都断很敏血感,钓即使饼是高荷浓度普的乳斩酸菌插培养捕液,愈其含夜水量满一般淡都超两过9车0%粗,干抢物质伯的含级量不列超过妙10旅%,瓶除水带通常通需要内较长叹的时炕间。膨对于巾厌氧勤的乳裂酸菌茎来说纹,与觉空气槐接触逐时间厉越长逃,活慧力损源失也处越大英。会采用点常规苏的气盈流干观燥,芒乳酸删菌的摊活性袖损失奏一般乏都要间超过融90缺%以境上。茧即使棕采用部瞬时反喷雾挽干燥桂,活刺力损恐失也脱要超扶过8习5%球。脱摄水后净的制毒剂,苗在饶20宴℃林条件付下,核在空篮气中锡暴露堪24余h,份活力跃损失病就会郊达到铺40赶%以角上,西给实缓际推刺广造滨成很品大困央难。婚近年探来,晶世界眼各地歪的畜目牧科谨研工探作者馆在活和性乳透酸菌慰的干蝇燥保偿存方乓面进蔑行了胖大量拐研究科,提显出了业很多研高科各技的必方法贷,其浩中比傲较常除用的耽方法室是抽揪真空煎冷冻残干燥质和包岸埋造虽粒陵。但姜因成甩本造执价高护昂,校并不扬适合识工业惩化生业产。呼下面针叙述茶是比嚼较实翠用的耐乳酸吗菌脱起水干促燥方吉法:皱一般觉普通暗的大律麦、浓小麦棒和玉队米沉等农享副产答品的孕含水倚量都你在1侦4%贸左右共,经教过凡10宜0绪℃筒气流瑞干燥迈以后原,可鬼以比姐较简祸单地即把水葡份降敬低到恢6%未左右惹。然爹后再训用这租些经俊过干蚊燥的雪载体莫以大万比例劈(1饺0倍茄以上龟)与续乳酸忧绝培核养液老混合删,使汁混合律物的灿水份怎含量铜为1断1%朱~2征0%讨,从否而使呢乳酸击菌处伸于休碧眠状因态,肢不易往失活孩。稻干燥衰冷却刻后的硬载体弯可以辆迅速别的吸迷附培原养液灾中的劈游离铁水,袍然后台在真凯空包气装。职实验控表明草,此伟方法齐保存去的乳困酸菌滩,在昏室温攻条件辛下保兵存3顺个月让,乳途酸菌呈的活秆力可踢以保堂存5钞0%纺以上悲,保许存6盗个月兼时,腾乳酸毯菌的郑活力辛保存便在4胡0%竞左右拥。弹此方子法简揉便实翁用,情成本胞低廉案、托质量圈稳定莫,保晚质期型长,源且活衫性乳券酸菌械的回别收率头较吉高。重活性势乳酸膛菌脱投水干梨燥流叫程抽真空密封包装混合道干燥禽载体抽真空密封包装混合球乳酸但菌培献养园(二伟)流请程说访明的1.榜载体黄的干仿燥挎载体保为麦索粉、隙玉米倾粉或答者其在他农馅副产倍品。春粉碎昂后过闸20穿目筛勒。对狸载体鸣进行父气流阵干燥分,检够测其抓含水晒量。第将干嚷燥后腥的麦餐粉收连集在拜缓冲贪仓内斜,抽蕉气冷伐却至败40痒℃包。匹如果宿缓冲牙仓的观物料涝不超借过1眼t,弟冷却不时间哑一般句不超艰过2培h,讨干燥拿后麦详粉的赌含水管量只秒增加乞0.拔3%优左右孝,对泳后续斤的吸昆附操孟作影畅响很消小。兰必要蚀时可喝在冷德却后安将干
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