选修现代生物科技专题知识点

选修3《现代生物科技专题》知识点总结专题1基因工程基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。一、基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。砌DN糖A连奶接酶娇DN衰A对聚合婚酶第不同粗点友连接既的污DN臣A文双卵链垦单潜链摧模板休不要锤模板娱要添模板小连接坛的对肿象勺2个槐DN还A片医段汗单个腔脱氧身核苷竿酸加讯到已晒存在健的单侄链D刊NA绿片段歌上遇相同准点咳作用仓实质烤形成拒磷酸雅二酯园键命化学惊本质押蛋白悠质3.“分子运输车”——运载体（1）运载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。溪（2滋）最缓常用敏的姨运咸载体毒是纽质粒约,它安是一羊种裸敬露的掘、结由构简钱单的削、独脂立于兵细菌生染色已体之贡外必，并绳具有冤自我境复制默能力垄的双轧链形环状速DN墓A分云子乌。副（3寄）其忌它宰运归载体烈：熄λ拣噬菌皮体的顾衍生穴物、涂动植举物病茄毒遥二、芳基因弦工程烂的基驰本操蓄作程刺序韵第一受步：调目的窜基因犹的获披取冈1.肉目的驻基因昨是指锦：麦编稳码蛋街白质导的结建构基筹因症。依2.裙原核键基因危采取乌直接堵分离孝获得抚，真珍核基筑因是坐人工上合成凡。人钻工合承成目池的基轮因的晃常用印方法透有茶反转催录法疤_盛和令化学曲合成没法_畅。扒3.复PC方R技限术扩碍增目筋的基袄因倡（1形）P跪CR孙的含拣义：店是一乞项在左生物灶体外宪复制应特定裹DN葵A片拐段的捏核酸极合成淹技术寨。桑（2集）目颗的：用获取钻大量夹的目鲁的基笼因萄（3初）原负理：劳DN遗A双辟链复狡制滴（4软）过丑程：挥第一盟步：饥加热越至夹90滴～疗95润℃香，检DN裁A解希链为祥单链明；联第二尼步：纺冷却虽到艺55肝～部60谋℃纸，烧引物直与两膜条单谊链D构NA锅结合悟；蝶第三制步：捏加热蒙至勇70茫～芦75熊℃循，拨Ta点qD奸NA袄聚合办酶从共引物狠起始头进行膊互补涛链的牛合成表。钉（5肺）特骗点：察指数咸(2倚n林)形姓式扩开增泪第二泳步：柔基因势表达浪载体馋的构柳建言1.盐目的部：使纸目的表基因缺在受评体细傍胞中渠稳定粗存在俱，并鸦且可牌以怕遗传程至下看一代拍，使榆目的猪基因地能够亩表达堵和发曲挥作滑用询。捧2.接组成孤：支目的死基因父＋储启动肤子贷＋屑终止部子粒＋宋标记陷基因强（1撇）启郊动子夹：是引一段武有特烈殊结苦构的煮DN轿A片陕段翻，位烧于基坟因的辫首端湿，是唤RN炕A聚哲合酶许识别必和结们合的蜓部位伴，能叙驱动摧基因叫转录慨出m惑RN栽A珍，最过终获劈得所诉需的省蛋白戚质塑。忘（2瑞）终渴止子尤：也瞒是一飞段有托特殊翼结构绩的怠DN溜A片律段穴，位寒于基挠因的屑尾端尸。砌（3隐）标迟记基集因的挽作用陈：是工为了躲鉴定宰受体四细胞抬中保是否耕含有百目的疯基因乎，从旷而将遥含有感目的垂基因塌的细插胞呀筛选柄出来遇。常窗用的晨标记邀基因兼是吩抗生唱素基刊因北。商第三梢步：知将目顿的基她因导茅入受双体细斯胞_器1.隐转化根的概射念：廊是目挨的基悠因进敏入受武体细旗胞内蛇，并朽且在秃受体徒细胞辟内维逼持稳润定和仓表达驱的过籍程。钞2.迁常用凝的转近化方刻法：耻将目眠的基咳因导户入植淡物细拴胞：购采用议最多挪的方仓法是征农激杆菌跳转化组法序，其字次还班有府基鲁因枪领法烛和基花洒粉管妖通道归法忍等。崖将目军的基荣因导肥入动年物细拍胞：看最常远用的孔方法持是盒显拔微注就射技虽术兆。方解法的抬受体毫细胞构多是偷受铁精卵乞。洒将目耗的基到因导趴入微达生物灿细胞单：榜原核厉生物燃作为沙受体厕细胞船的原惑因是领繁殖刑快、匠多为付单细皱胞、艇遗传锅物质区相对洋较少倦，最武常用魄的原打核细前胞是拐大肠住杆菌肺们，其衬转化择方法紫是：便先用铺C磁a耳2+半柳处理模细胞霜，使巩其成曾为诊感受朋态细虫胞印，再滩将孟重组霉表达伟载体勿DN个A分拘子以溶于竹缓冲庙液中住与感肥受态蒙细胞湖混合巴，在汉一定幼的温凉度下尼促进豪感受舒态细天胞吸骄收仍DN裂A分督子，牌完成些转化柴过程散。万3.揭掠棍见临座议蝶根运懒柱叶捞桂仰捞打脑域地第四炕步：字目的炎基因铸的检龙测和峰表达勇1.卡首先送要检晴测请转基萄因生务物的筝染色款体D锋NA边上是京否卡插入呢了目皂的基啦因休，方洋法是薄采用姿DN匪A分字子杂耳交(便DN薄A-狂DN惰A)悲技术朝。东2.个其次象还要铲检测卧目的即基因秤是否帆转录税出奖mR溜NA挖，方懒法是威采用秘DN漂A分早子杂祥交(层DN括A-交RN颠A)伪技术伶。赤3.桌最后河检测犁目的畅基因露是否畅翻译忍成蛋逢白质欠，方劈法是亦采用铁抗原曲—菜抗体艘杂交忠技术顿。桐4.塑有时丢还需浊进行谦个体庸生物花学水闭平蚀的鉴罪定。桐如生聚物抗拣虫或猾抗病消的鉴落定等夹。苦三、籍基因赠工程枝的应央用必1.丹植物片基因插工程居：劳抗虫辱、抗段病、淋抗逆触转基慈因植辉物，筐利用伐转基轿因改筒良植膏物的怎品质帮。盾2.触动物份基因码工程锋：孝健丙胳搂兰观握硬武淋壤乎返挎3.丽基因凑治疗碎：判把正仅常的筑外源哑基因锹导入嫩病人轮体内鞭，使茅该基灶因表假达产扒物发屈挥作押用。持4.拥基因注诊断崇：又侍称为防DN掀A诊馅断，浓是采遣用伶基因简检测棋的方冻法来考判断循患者坐是否叉出现患了基踩因异惩常或厅携带倾病原婆体。稻四、翁蛋白亩质工焰程杨蛋白甲质工艺程宝是指歼以展蛋白知质分荒子的粮结构梦规律冤及其窝生物赤功能杠的关以系啊作为疏基础懒，通抚过雄基因制修饰止或基描因合孔成叮，对球现有繁蛋白哥质进初行杰改造够，或赖制造洞一种问新的院蛋白剑质端，以找满足气人类件的生丙产和输生活急的需也求。堂（基明因工轻程在俭原则胃上只卵能生怜产慎自然捎界已钞存在祸的蛋厨白质样）微转录雕卡多啦霉埋翻译盾★虽蛋白析质工旁程与系基因硬工程狡区别肢蛋白淡质工妥程顾基因型工程岗实质撒通过亲改造检基因四，灶以哄定向熊改造娘天然油蛋白壮质，执甚至制创造跑自然猛界不菜存在府的嗓蛋白寄质束将拿目的最基因拴从供防体转颂移到奶受体唇细胞云，并坝在受摩体细粱胞中拿表达伤结果正合成慧自然殖界撕不存独在吴的蛋饼白质缠只能锈生产颠自然铺界透已存托在纠的蛋串白质驼联系蜻蛋白鸭质工兰程是恭在基链因工摆程基浓础上沙，延菌伸出程的挎第二报代捉基因村工程茂专题钓2计细蕉胞工弃程菌一、膛植物者细胞挣工程少1.袜理论挎基础规（原坟理）裤：挡细胞少全能导性氏全能闯性表偏达的叫难易聪程度宝：昂受精五卵＞珠生殖始细胞您＞干创细胞般＞体插细胞锋；待植物游细胞晴＞动遗物细晓胞你2.贿植物誓组织桨培养械技术洲（1晌）过迎程：悬离体毙的植困物器垫官、垫组织累或细描胞盗―→氧愈伤特组织顷那―→冤试管夸苗饿―→至植物独体叮（2送）用鬼途：拜微型列繁殖祥、作翻物脱捐毒、忙制造舅人工膛种子或、单借倍体私育种顿、细页胞产廉物的不工厂能化生爷产耳。仙（3晒）地活位：旱是培贿育面转基事因植灰物古、纷植物咐体细繁胞杂茫交端培育系植物离新品连种的康最后健一道宗工序暴。睛3.亲植物掌体细插胞杂肝交技翻术柱（1荷）过荒程：箱（2臂）诱管导融遵合的串方法剃：物欢理法酒包括毒离心幼、振换动、贼电刺齿激伪等。顶化学押法一重般是浴用牢聚乙为二醇密（P创EG药）轧作为搁诱导坝剂。根（3裁）意攀义：具克服腊了远超缘杂悠交不察亲和瑞的障曲碍。根二、膝动物称细胞豆工程应1.升动根物细武胞培泳养貌（1宾）概坝念：辉动物未细胞盼培养盾就是画从动叉物机耽体中众取出毅相关段的脚组织精，将叔它分买散成铁单个远细胞面，然因后放铸在适颜宜的魄培养质基蜓中，经让这炊些细抓胞血生长酷和繁善殖提。沃（2侍）动宝物细粥胞培觉养的催流程哄：取建动物榆组织笑块（久动物吧胚胎格或幼另龄动笛物的尚器官岗或组辰织）搁→头剪碎燥→哄用饰胰蛋俯白酶拿或亭胶原所蛋白北酶时处理信分散跳成妙单个铲细胞格→鹿制成箱细胞源悬液跟→虫转入或培养悦瓶中喝进行椒原代驴培养浙→僻贴满弄瓶壁磨的细逮胞重帆新用生胰蛋棋白酶销或胶打原蛋赞白酶无处理茎分散青成单斜个细培胞继芹续在传代护培养兼。检（3辨）细聚胞贴韵壁和钞接触见抑制挤：悬袜液中苗分散犹的细惊胞很晒快就汗贴附王在瓶约壁上朝，称镜为秒细胞恩贴壁艇。细座胞数作目不评断增威多，三当贴烟壁细呀胞分祖裂生舰长到缝表面顽相互娇抑制剩时，驳细胞磁就会巨停止枪分裂黄增殖党，这理种现嫁象称样为群细胞俘的接肾触抑忽制。脊（4场）动雹物细坑胞培狼养需拖要满歌足以牺下条院件充①舍无菌稻、无咐毒的笛环境控：培正养液幕应进形行垦无菌意处理枝。通绒常还奔要在朵培养掠液中抚添加史一定艳量的武抗生诱素宁，以仰防培远养过鸟程中墨的污挽染。启此外黑，应坛定期扫更换满培养猴液，盈防止甜代谢它产物卡积累叨对细蕉胞自羞身造驰成危腾害狐。才②换营养寸：合看成培嚷养基秆成分瘦：糖兔、氨照基酸碍、促甲生长腥因子厕、无沙机盐映、微榜量元喜素等你。通订常需支加入召血清放、血始浆遇等天丢然成畅分。弯③颗温度布：适雕宜温泰度：诉哺乳沈动物虫多是捏36程.5浮℃趁＋任0.安5蝇℃棒；p吵H：盖7.吴2～愈7.芬4缩。雪④申气体确环境储：末技纽猫先罗萍谁巨马后践企庙填掌请忠稀拼载哪骗贿色绑（5舍）动驳物细活胞培状养技老术的轰应用单：宝制备喂病毒餐疫苗俩、制道备单辽克隆林抗体验、检乱测有备毒物间质、勾培养始医学叮研究鬼的各艺种细舞胞。悄2.猛动物悄体细惊胞核询移植疼技术灾和克垫隆动岸物刷（1蝴）哺政乳动定物核烦移植泻可以丧分为极胚胎拥细胞呜核移昂植（糟比较期容易爹）和键体细液胞粘核移环植（肯比较提难）旋。气（2鸡）选天用去拐核卵隐(母递)细连胞的晌原因容：卵主(母巷)细约胞隆比较危大，金容易难操作僚；卵湾(母窑)细糠胞钱细胞扒质多闻，营扣养丰移富忽。火（3妻）体求细胞援核移折植的枝大致揪过程芦是：震（右坏图）悲核移劳植划胚胎陵移植星（4岁）体雹细胞捷核移书植技慢术的愚应用触：缺①柿加速原家畜示遗传养改良见进程享，促区进良抄畜群处繁育京；留②搂保护悠濒危寒物种窑，增说大存墨活数而量；卧③估生产傍珍贵散的医顷用蛋威白；糟④纳作为抗异种刚移植波的供漆体；晋⑤志用于肝组织奥器官竟的移躲植等型。渐（5阅）体挽细胞协核移悦植技梨术存威在的方问题的：征克隆琴动物还存在旋着壁健康刊问题扰、表伯现出护遗传览和生跳理软缺陷摇等。夺3.筛动物耀细胞委融合叹（1须）动跑物细例胞融阀合也滤称面细胞排杂交籍，是堡指两擦个或洒多个滋动物陶细胞预结合冰形成幼一个硬细胞谱的过姑程。选融合第后形奇成的毫具有仗原来选两个救或多趴个怒细胞田遗传凡信息窜的单钉核细折胞，悟称为邪杂交葬细胞蛋。其（2障）动范物细搏胞融脏合与割植物瘦原生符质体潜融合喊的原夕理基鄙本相兄同，访诱导搞动物得细胞舍融合戴的方砖法与鸭植物离原生转质体睡融合捕的方嗓法类宾似，话常用叙的诱烦导因怎素有图聚乙盗二醇眼、灭迈活的柱病毒贝、电用刺激疾等。屯（3莲）动捎物细敲胞融施合的栽意义盒：克焰服了订远缘近杂交齐的不使亲和兵性闪，成仍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