病毒总轮二课件

医学微生物学之病毒篇病毒学基本原理（二）病毒学基本理论二√√病毒致病作用病毒感染的检查方法抗病毒免疫病毒感染的治疗4病毒感染的特异性预防23病毒的感染与免疫第章每一个病毒必须决解的三个问题如何在感染细胞后进行自身的增值；如何逃避宿主的防御性攻击；如何从一个个体向另一个个体传播；

病毒的致病作用只是它为了解决其复制、逃逸和传播三个问题所采取策略造成的结果。一、病毒感染的传播方式病毒感染的传播方式水平传播（horizontaltransmission):

病毒在人群不同个体间的传播，引起水平感染。垂直传播（verticaltransmission):病毒直接由亲代传给子代，引起垂直感染。

呼吸道消化道眼或泌尿生殖道破损皮肤输血、注射或器官移植经胎盘、围产期水平传播垂直传播病毒感染的传播方式

多数病毒单一途径进入机体，少数病毒可多途径进入机体，如HIV。二、病毒感染的致病机制病毒感染的致病机制1病毒在机体里的生命活动对宿主细胞的影响3病毒在机体里为了生存而采取的免疫逃逸策略2感染病毒后，机体免疫防御造成的免疫损伤

1、病毒对宿主细胞的致病作用稳定感染状态细胞凋亡包涵体形成243基因整合/细胞转化51杀细胞效应1.1杀细胞效应（cytocidaleffect）又称“杀细胞感染”（cytocidalinfection），无包膜病毒/杀伤性强病毒C.影响细胞溶酶体：释放溶酶体酶——细胞溶解

(又称溶细胞性感染)

A.阻断细胞大分子合成：早期蛋白

B.某些病毒衣壳蛋白的直接杀伤作用Question病毒的杀细胞效应可以观察到吗？细胞病变作用（cytopathiceffect,CPE）1.2稳定感染状态（steadystateinfection）多为有包膜病毒，如流感病毒、疱疹病毒等膜表面有病毒抗原细胞融合病毒感染后，形成多核巨细胞宿主细胞膜发生变化1.3包涵体（inclusionbody）形成

病毒复制或转录过程中形成的复合物、病毒装配过程中出现的中间体，以及核衣壳等均可在宿主细胞的某一部分积聚形成包涵体。内基小体（Negribody）1.4细胞凋亡（appotosis）细胞凋亡是由基因控制的程序性细胞死亡，为正常的生物学现象。病毒编码蛋白可间接诱导、调控宿主细胞凋亡程序。1.5基因整合和细胞转化

嗜肝DNA病毒、逆转录病毒，在其复制过程中，可将病毒DNA整合至细胞染色体中，导致细胞转化。

这种转化往往与肿瘤的形成密切相关。如EBV、HBV、HHV-2和-8、HPV-6、11、16和18、HTLV-1等可诱发15%的人类肿瘤；

至少100种病毒能引起动物恶性肿瘤。2、病毒感染的免疫病理作用炎性因子的病理作用31抗体介导的免疫病理损伤细胞介导的免疫病理损伤2免疫抑制作用42.1抗体介导的免疫病理作用Ⅱ型变态反应

病毒侵入细胞诱发细胞表面出现新抗原与特异性抗体结合+补体参与

细胞破坏Ⅲ型变态反应2.2细胞介导的免疫病理作用1细胞免疫也损伤宿主细胞，造成功能紊乱2与宿主细胞有共同的抗原，造成自身免疫疾病

Ⅳ型超敏反应致敏T细胞(CTL)机体产生的抗体

共同抗原自身免疫病2.3致炎性细胞因子的病理作用INF-γ,TNF-α,IL-1

血管活化因子

休克、DIC等2.4免疫抑制作用病毒感染抑制免疫功能激活潜伏的病毒促进肿瘤的生长病毒持续性感染3、病毒的免疫逃逸（escapeofimmuneresponses)反应病毒毒力的重要因素免疫逃逸机制：

细胞内寄生，或者形成合胞体抗原结构多态性和变异损伤免疫细胞，或特异性抑制免疫反应降低抗原的表达病毒的免疫增强作用

病毒进入机体后，凭借其生命活动对宿主细胞、免疫系统造成各种各样的损伤，同时，又不断的进化着自身的抗宿主免疫机制的能力，总之，其目的是为了保存它的生命力！而病毒能否对宿主造成实质性的影响取决于：病毒株的毒力、病毒感染剂量、感染途径以及宿主的免疫状态！Question病毒进入机体后会有怎样的结局？三、病毒感染的类型病毒感染的类型流产感染：SV40－小鼠限制性感染：细胞暂时性感染，随后不感染是否有临床症状感染感染部位滞留时间★隐性感染（亚临床感染）：不引起临床症状；病毒携带者不产生免疫力，可成为重要传染源。

显性感染（临床感染）：病毒在宿主细胞内大量增殖引起明显的临床症状。1、按是否有临床症状：2、按感染部位：局部和全身性感染（局部增殖→血流→单核吞噬细胞系统增殖→血流→靶器官）3、按滞留时间急性病毒感染（actueviralinfection）

潜伏期短,发病急,病程短,病后体内不留病毒，又称病原消灭型感染。★持续性病毒感染病毒持续存在体内,可有或无临床症状而长期携带病毒,为重要传染源。

持续性感染的原因机体免疫力弱1病毒隐蔽逃逸免疫2抗原性弱难以免疫3与宿主基因组整合5缺损性干扰颗粒4慢性感染(chronicinfection)

病程长病毒可检出如HBV潜伏感染(latentinfection)经感染后，病毒存在于组织细胞中，可反复激活，急性发作病毒只有在急性发作时才被检出如VZV（水痘－带状疱疹病毒）慢发病毒感染(slowvriusinfection)潜伏期长，发病后为亚急性进行性直至死亡寻常病毒：非寻常病毒：

盶粒

HIV、麻疹病毒持续性感染

病毒复制与机体免疫应答

病毒感染类型病毒入侵数量大且大量复制重症临床发病及死亡病毒侵入机体，大量复制和产生强免疫应答，明显病理反应典型临床感染轻型临床症状病毒侵入机体复制和免疫应答，但未引起明显的病理反应隐性感染或亚临床感染病毒侵入机体清除且无免疫应答暴露后未感染病毒感染结局的示意图四、病毒与肿瘤病毒与肿瘤病毒与人类肿瘤发生关系密切。致肿瘤病毒：人乳头瘤病毒HPV（良性人疣）人类嗜T细胞病毒HTLV（人T细胞白血病）肿瘤相关病毒：

HBV、HCV、EB、HPV、HSV-2、HHV-8等。病毒与肿瘤病毒是肿瘤诱导剂，但肿瘤不是病毒感染的必然结果。病毒使细胞生长去调节，细胞转化成致癌表型，可致动物肿瘤，或仅转化，不具备体内致瘤能力。细胞转化并非致瘤的必须步骤。长时间无限增殖细胞比正常细胞更易于突变或基因重排。Question还记得机体免疫系统的组成吗？宿主的免疫防御系统天然屏障非特异性免疫系统特异性免疫系统侵袭性病原体五、抗病毒的固有免疫非特异性天然免疫-干扰素(interferon,INF)

在诱生剂和某些细胞因子的作用下，由宿主基因编码产生的一组糖蛋白，具有高度的活性和多种功能。INF的生物活性作用

①抗病毒作用★种属特异性

★广谱

★产生早

②免疫调节作用

★活化NK细胞、Tc细胞③抗肿瘤作用★抑制细胞分裂INF种类干扰素(interferon,INF)

编码基因位于人细胞中，Ⅰ型位于第9对染色体短臂上，Ⅱ型位于第12对染色体长臂上；正常处于抑制状态。

病毒、细菌内毒素、人工合成的双链RNA等诱生剂可诱导INF的产生。INF的抗病毒作用机理

不直接作用于病毒，而作用于宿主细胞基因，合成抗病毒蛋白，抑制病毒蛋白合成。

抗病毒蛋白抑制病毒作用示意图NK细胞

无特异性，无MHC限制，不依赖抗体，分泌穿孔素(perforin)。六、病毒感染的适应性免疫适应性免疫-彻底清除病毒体液免疫抗体中和病毒；血凝抑制抗体、补体结合抗体；预防病毒感染和再感染中起重要作用；细胞免疫毒性T淋巴细胞（CTL）；CD4+Th1细胞；在病毒感染中起重要作用；

1、中和抗体中和抗体(virusneutralizingantibodies):由病毒衣壳或包膜抗原刺激产生；与病毒结合（封闭抗原表位或改变表面构型），阻止吸附，保护细胞免受感染,防止病毒随血流播散。

中和抗体的保护作用▲不能直接灭活病毒

▲起预防而非治疗作用▲对细胞内病毒无效血凝抑制抗体(haemagglutinationinhibitionantibodies，HIAb):含血凝素抗原诱发，如流感和乙脑病毒HIAb可中和病毒的感染性补体结合抗体(complementfixationantibodies):病毒内部抗原或表面非中和抗原诱发，调理作用增强巨噬细胞的吞噬作用，辅助诊断。

其他抗体的作用2、细胞免疫针对细胞内病毒细胞毒性T细胞(CTL)直接作用：识别病毒抗原的同时必须识别细胞膜上的MHC抗原，分泌细胞因子(cytotoxin)淋巴毒素,趋化因子，IL-2，γ-IFN，TNF等，杀伤靶细胞。CD4+Th1细胞：释放细胞因子IL-2，γ-IFN，TNF等七、抗病毒免疫持续时间持续时间的影响因素有病毒血症的全身性病毒感染：二次病毒血症，病毒广泛接触免疫系统，病毒免疫牢固，持续时间长，如水痘、麻疹；只有单一血清型的病毒感染，免疫力牢固，时间长，如乙脑，而鼻病毒相反；易发生病毒抗原变异，短暂免疫；24病毒感染的检查方法与防止原则第章一、病毒感染的检查方法病毒感染的诊断原则原则：特异、敏感、快速、简便

首先根据流行病学和临床特点，初步判断可能感染的病毒。然后根据可疑病毒的生物学特点、机体免疫应答和临床过程，以及病人当前所处的时机，确定实验诊断方法。标本的采集与运送1、标本的采集与送检:检查成败的关键。2、标本采集：急性期标本标本处理：使用抗生素标本送检：冷藏、快速送检

血清学检查应采双份标病毒的分离病毒的人工培养必需在活细胞内增殖。动物接种：早期对病毒生物学特性研究的主要方式，现仅限于研究病毒或毒株的致病性或为确切诊断病原体为病毒。鸡胚接种细胞培养

登革病毒对新生乳鼠的致病作用1-3日龄乳鼠接种病毒6日后，小鼠陆续出现体弱、弓背、行动迟缓等症状。动物接种

9-14day，受精鸡胚(embryonatedeggs)①绒毛尿囊膜接种(allantocherioninoculation)②尿囊腔接种(allantoiccavityinoculation)③羊膜腔接种(amnioticcavityinoculation)：流感病毒初次分离④卵黄囊接种(yolksacinocaulation)鸡胚接种细胞培养是目前分离病毒及了解病毒生物学特性和病毒疫苗生产的主要工具。原代细胞培养：来自动物或人组织直接用蛋白酶消化所获得的细胞，经培养后可贴壁或悬浮生长。对病毒易感性高，主要作为从标本中分离病毒的工具。二倍体细胞株：在体外连续50-100代后仍保持其二倍染色体数目的单层细胞。传代细胞株：可连续传代的细胞系或来自肿瘤组织或来自发生自动转化的原代细胞系。

病毒在细胞内增殖的检查与鉴定1、增殖指征：

细胞变化

红细胞吸附

细胞代谢改变

Question细胞感染病毒后会有哪些变化？1、细胞病变效应

(CPE)：细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等；2、多核巨细胞或称融合细胞：如麻疹病毒作用于细胞膜，可使邻近的细胞相互融合；3、包涵体：如狂犬病病毒、麻疹病毒等可在培养细胞中形成胞浆或核内的包涵体；细胞的变化病毒包涵体的类型

红细胞吸附流感或副流感病毒等感染细胞后，由于细胞膜上出现了血凝素，具有吸附脊椎动物(豚鼠、鸡、猴等)红细胞的能力，这一现象称红细胞吸附。测定正粘病毒与副粘病毒的增殖。若有相应的抗血清，则能中和细胞膜上