苛养菌及人畜共患详解演示文稿

苛养菌及人畜共患详解演示文稿当前第1页\共有45页\编于星期一\14点（优选）苛养菌及人畜共患当前第2页\共有45页\编于星期一\14点第一节嗜血杆菌属(Haemophilus)嗜血杆菌属为一群无动力、无芽胞、菌体呈球杆状的革兰阴性小杆菌，生长营养需求高，培养时需人工加入新鲜血液(X因子和V因子)才能生长，故称嗜血杆菌。对人类有致病意义的种有:流感嗜血杆菌(H.influenzae)、副流感嗜血杆菌(H.parainfluenzae)、杜克雷嗜血杆菌(H.ducreyi)、嗜沫嗜血杆菌(H.aphrophilus)当前第3页\共有45页\编于星期一\14点一、生物学性状形态与染色：菌体短小、两端钝圆、革兰阴性小杆菌。从病灶中新分离的菌株多呈球杆状或双球状，有时可呈短链。在陈旧培养物中呈多形性，有长杆状或丝状体。粘液型菌株有荚膜，有荚膜菌株多伴较强的毒力。痰标本涂片革兰染色（流感嗜血杆菌）当前第4页\共有45页\编于星期一\14点培养特性:需氧或兼性厌氧，初次分离需5～10%CO2才能生长良好，营养要求苛刻，在加入新鲜血液（含X因子和V因子）的巧克力培养基上经24h培养，见灰白色、圆形、光滑、半透明、直径0.5～1mm小菌落。部分毒性菌株(b型Hi)可见粘液型菌落。当前第5页\共有45页\编于星期一\14点X因子V因子X因子是对热稳定的物质，存在于血红蛋白中的一种血红蛋白衍生物，是一种含铁的卟啉。它是细菌合成过氧化物酶、过氧化氢酶、细胞色素氧化酶的辅基，这些酶类提供细菌氧化还原时进行电子传递。V因子是对热不稳定的维生素B类物质，存在于血液和某些植物组织中。它是一种脱氢酶的辅酶，在细菌的呼吸中起递氢作用。可以根据细菌对XV因子需要的不同进行嗜血杆菌属细菌的鉴定(见P295表19-1)当前第6页\共有45页\编于星期一\14点培养特性:卫星现象：金黄色葡萄球菌和流感嗜血杆菌共同培养，由于金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子，可以促进流感嗜血杆菌的生长，故在平板上可见金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落大，而相对较远处的流感嗜血杆菌菌落较小，此现象称为“卫星现象”当前第7页\共有45页\编于星期一\14点卫星现象当前第8页\共有45页\编于星期一\14点生化反应对流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌的鉴别常使用吲哚、脲酶、鸟氨酸脱羧酶等试验进行(见P296表19-2)，由于嗜血杆菌属细菌生化反应的不稳定性，现多采用半自动化鉴定。当前第9页\共有45页\编于星期一\14点生化反应菌种和生物型吲哚尿素酶鸟氨酸脱羧酶流感杆菌生物型I＋＋＋II＋＋－III－＋－IV－＋＋V＋－＋VI－－＋VII＋－－VIII－－－副流感杆菌生物型I－－＋II－＋＋III－＋－IV＋＋＋V－－－VI＋－＋VII＋＋－VIII＋－－当前第10页\共有45页\编于星期一\14点二、临床意义流感嗜血杆菌：以b型有荚膜株致病为主，以儿童为主，成人较少。在引起肺炎的革兰阴性菌中本菌占第3位，仅次于铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌。副流感嗜血杆菌：在某些地区致病情况与流感相似，甚至超过前者。嗜沫、副嗜沫、溶血嗜血杆菌：上呼吸道常居菌，条件致病。杜克雷嗜血杆菌：软性下疳的病原菌。当前第11页\共有45页\编于星期一\14点三、微生物学检查(一)标本采集根据病变部位采集不同标本。肺部感染患者应尽量减少上呼吸道分泌物的污染。(二)检验程序:见P297流程图当前第12页\共有45页\编于星期一\14点三、微生物学检查(三)检验方法1、直接镜检:多用于脑脊液和脓液标本的检验，对呼吸道标本一般不采用直接镜检方法，总体意义不大。2、分离培养：气体环境、培养基、XV因子需要、抑菌物质(每毫升巧克力琼脂内加万古霉素50ug，杆菌肽300ug，氯林可霉素1ug)、卫星现象当前第13页\共有45页\编于星期一\14点检验方法X因子V因子需要试验菌名生长需要X因子V因子流感＋＋副流感－＋流感嗜血杆菌副流感嗜血杆菌当前第14页\共有45页\编于星期一\14点四、预防措施对Hib感染最有效的预防措施是肌肉注射Hib偶联菌苗。芬兰赫尔辛基于70年代后期在0～4岁儿童中Hib脑膜炎的发病率为43/10万。注射上述菌苗后到1991年发病率降为0。Hib的PRP可与4种蛋白载体（变异性白喉杆菌蛋白－Oligosaccharide–CRM197protein,HbOC、白喉杆菌类毒素－Diphtheriatoxoids,D、脑膜炎双球菌外膜蛋白复合物－Outermembraneproteincompound,OMPC和破伤风杆菌类毒素－Tetanustoxoid，T）偶联，分别构成4种类型的偶联菌苗：PRP-HbOC、PRP-D、PRP-OMPC和PRP-T。目前至少有25个国家将Hib偶联菌苗列入儿童的免疫计划。Hib偶联菌苗价格较昂贵，限制了它在发展国家内应用，因此有人报道了一种经济的接种方案，即是给婴儿接种1/2或1/3三针全剂量的Hib偶联菌苗，借此替代常规3针全剂量免疫的接种方案。以替代方案接种后91％～100％的婴儿仍可达到保护性抗体的浓度30.15mg/ml），与3针全剂量的接种方案所产生的结果相似。若采用替代的接种方案可减少菌苗接种的费用，以利于在发展国家中推广应用Hib偶联菌苗。当前第15页\共有45页\编于星期一\14点补充资料软下疳1:该图为典型的链状排列的杜克雷嗜血杆菌，用人血液培养后取材涂片，革兰氏染色阴性，链状排列。当前第16页\共有45页\编于星期一\14点补充资料软下疳3:左侧腹股沟部有一个潜行性较深溃疡，边缘不整齐，略呈蛇形，溃疡基底有脓性渗出物，溃疡周围皮肤呈现紫红色晕。另有三个豆大、一个指头大卫星状溃疡性病损。病损触之疼痛。横痃当前第17页\共有45页\编于星期一\14点第三节鲍特菌属(Bordetella)百日咳鲍特菌(B.pertussis)俗称百日咳杆菌副百日咳鲍特菌(B.parapertussis)支气管败血鲍特菌(B.branchiseptica)鸟鲍特菌(B.avium)当前第18页\共有45页\编于星期一\14点一、生物学性状（百日咳鲍特菌）形态染色：革兰阴性小杆菌，无芽胞，有荚膜。在液体培养基中可呈短链状存在。培养：专性需氧。营养要求高，在鲍-金培(bordet-gengou)养基上需3-5天才能长出可见菌落。生化反应：见P301表19-5对抗生素的敏感性:红霉素首选,其次氨苄青霉素、阿莫西林、利福平、复方SMZ等。当前第19页\共有45页\编于星期一\14点二、临床意义:百日咳鲍特菌是百日咳的病原菌1、疾病分期:卡他期：症状无特异性，与病毒性感冒类似，1-2周，此期传染性最强，采集标本阳性率最高。痉挛期：以阵发性剧烈咳嗽为主，1-4周，日平均发生10-20次（类似鸡鸣），但婴幼儿的咳嗽症状可以不明显，而以合并症为主，如肺炎、出血、神经系统症状等。恢复期：阵咳减轻，完全恢复需数周到数月。当前第20页\共有45页\编于星期一\14点痉咳期:咳嗽由单声咳变为阵咳，连续十余声至数十声短促的咳嗽，继而一次深长的吸气，因声门仍处收缩状态，故发出鸡鸣样吼声，以后又是一连串阵咳，如此反复，直至咳出粘稠痰液或吐出胃内容物为止。每次阵咳发作可持续数分钟，每日可达十数次至数十次，日轻夜重。阵咳时患儿往往面红耳赤，涕泪交流、面唇发绀，大小便失禁。少数病人痉咳频繁可出现眼睑浮肿、眼结膜及鼻粘膜出血，舌外伸被下门齿损伤舌系带而形成溃疡。成人及年长儿童可无典型痉咳。婴儿由于声门狭小，痉咳时可发生呼吸暂停，并可因脑缺氧而抽搐，甚至死亡。此期短则1～2周。长者可达2月。二、临床意义(补充)当前第21页\共有45页\编于星期一\14点二、临床意义:2、毒素(共有3种)百日咳毒素(PT):该菌的主要毒力因子，与阵发性剧咳等临床表现有关。丝状血细胞凝集素(FHA):促进病原体与纤毛上皮细胞粘附。腺嘌呤环酶毒素(ACT):使吞噬细胞内cAMP浓度升高从而抑制其氧化活性，使呼吸道粘膜的抵抗力下降。当前第22页\共有45页\编于星期一\14点三、微生物学检查(一)标本采集：

通常在发病早期(1周内)采集鼻、咽拭子，做床边接种或立即送至实验室，采时间越迟阳性率越低，对小儿也可用咳碟法。(二)检验程序：见P302流程图当前第23页\共有45页\编于星期一\14点三、微生物学检查(三)直接检查（无特异性）DFA直接荧光抗体检查：可见外周黄绿色萤光，中心暗色的球杆菌，5个典型形态者为阳性。抗原检出：用单克隆抗体如ELISA法。PCR法检测核酸：目前缺乏统一的质量控制标准。当前第24页\共有45页\编于星期一\14点(四)分离培养培养基：鲍-金培养基或活性炭-马血琼脂，培养3-5天可检出菌落。当前第25页\共有45页\编于星期一\14点(五)鉴定依据革兰阴性小杆菌，无动力DFA法阳性普通血平板或巧克力平板不生长鲍-金培养基生长缓慢触酶阳性，氧化酶阳性当前第26页\共有45页\编于星期一\14点人兽共患病原菌布鲁菌属(小细菌)鼠疫耶尔森菌(肠杆菌科)土拉热弗朗西斯菌(小细菌)鼻疽假单胞菌(假单胞菌)红斑丹毒丝菌(需氧革兰阳性杆菌)炭疽芽胞杆菌(需氧革兰阳性杆菌)当前第27页\共有45页\编于星期一\14点第二节布鲁菌属BrceullaP298经DNA-DNA杂交证实只有一个种，其它均为生物变种。对人类有致病的生物变种有：牛布鲁菌：流产布鲁菌羊布鲁菌：马尔他布鲁菌猪布鲁菌犬布鲁菌当前第28页\共有45页\编于星期一\14点一、生物学性状形态染色：革兰阴性小球杆菌，革兰染色复染效果不好需延时至3min。培养特性：需氧，初次需5%-10%CO2。营养要求高。生化反应：触酶、氧化酶阳性(对人类有致病者)当前第29页\共有45页\编于星期一\14点二、临床意义该病原菌引起人类布鲁菌病，可以通过皮肤、呼吸道、消化道进入人体感染。感染人群多与动物性食品、毛皮加工或食用未消毒的牛奶感染。患者主要为菌血症表现：发热(波浪热)和其它全身症状。当前第30页\共有45页\编于星期一\14点第五节弗朗西斯菌属FrancisellaP304该属只有一个种：土拉热弗朗西斯菌，引起人类土拉热。病原菌常由野兔携带，又称野兔热杆菌。可因直接接触而感染，也可因动物咬伤、蚊虫叮咬、食入污染食物、吸入等途径感染。感染后表现为发热、剧烈头痛、关节痛，甚至发生衰竭和休克，表现与伤寒类似。局部感染时可出现溃疡，局部淋巴结肿大、坏死等。当前第31页\共有45页\编于星期一\14点第三节红斑丹毒丝菌ErysipelothrixrhusiopathiaeP262本菌为红红斑丹毒丝菌病的病原菌。急性传染，多发于家畜，人也可因接触而引起皮肤软组织感染，称类丹毒。生物学性状：革兰阳性杆菌，厌氧或微需氧，触酶氧化酶均阴性。临床意义：多发生于屠宰工人和鱼、肉加工人员或兽医。类丹毒为一种传染性皮炎，常始于伤口，局部形成病灶，皮肤红肿有水疱，局部淋巴结肿大，可伴有关节炎或全身症状。因可以产生蔓延性水肿，民间俗称“流火”。当前第32页\共有45页\编于星期一\14点丹毒左侧大腿内侧鲜红一片，境界清楚，稍高出皮表，压之皮色变白，放手即红。大腿根部起紫色水泡，水泡破溃，基底色赤，痛如火燎，伴恶寒发热，腿根部有肿大臖核。当前第33页\共有45页\编于星期一\14点丹毒耳郭局部潮红，边缘清晰，与正常皮肤界限分明，皮肤表面有光泽并稍隆起。当前第34页\共有45页\编于星期一\14点第二节炭疽芽胞杆菌BacillusanthracisP256炭疽芽胞杆菌简称炭疽杆菌，引起人或动物炭疽病。宿主广泛，传播方式多样，芽胞抵抗力很强，病死率很高。9.11事件后曾在美国部分地区引起大恐慌。当前第35页\共有45页\编于星期一\14点(一)生物学性状本菌为致病性细菌中最大的革兰阳性杆菌。菌体两端平齐，培养后呈竹节状排列。芽胞多在有氧条件下形成，产毒株有明显的荚膜。需氧或兼性厌氧，普通培养基上形成灰、粗糙型菌落，边缘不整、卷发状。液体培养基中由于形成长链而呈絮状生长，在明胶培养基中可使表面液化呈漏斗状，在深部由于沿穿刺线扩散生长成倒松树状。当前第36页\共有45页\编于星期一\14点炭疽芽胞杆菌在普通琼脂平板培养24小时,长成直径2～4mm的粗糙菌落。菌落呈毛玻璃状，边缘不整齐，呈卷发状，有一个或数个小尾突起，这是本菌向外伸延繁殖所致。当前第37页\共有45页\编于星期一\14点炭疽芽胞杆菌炭疽芽孢杆菌的芽胞：芽胞细胞质（SMp），芽胞类核（SN），芽胞细胞膜（SM），芽胞细胞壁（SW），芽胞皮层（SCt），外芽胞膜（OSM），和芽胞壳（SC）超薄切片，±81000当前第38页\共有45页\编于星期一\14点炭疽芽胞杆菌炭疽芽孢杆菌的芽孢：Ⅰ，发芽中的芽孢，芽胞壳（↑）已崩解；Ⅱ发芽的芽胞，芽胞壳和胞子囊（↑↑）均已崩解；Ⅲ，芽孢已释放，仅存芽胞囊碎片（↑↑↑）超薄切片，×28000当前第39页\共有45页\编于星期一\14点炭疽芽胞杆菌炭疽是炭疽杆菌所致人和畜类都可发生的急性传染病，可分皮肤炭疽，肺炭疽和肠炭疽三型。诊断要点：皮肤炭疽通常发生于面，颈，手和前臂等露出部位的皮肤，往往单发。组织显著肿胀及浸润，由于组织出血坏死，在病灶的中心区可形成明显凹陷的黑色干痂。局部淋巴结肿大且常化脓。病人常有发热，呕吐，头痛，关节痛及全身不适等症状。大部分病例经1-2周后黑痂脱落而成溃疡，愈合成疤。少数严重病例。局部呈大片水肿及坏死。伴有高热和严重的全身中毒症状，可致死亡。当前第40页\共有45页\编于星期一\14点炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌菌落表面的细胞呈曲线排列（↑）金属镀膜，×1500当前第41页\共有45页\编于星期一\14点5、抗原结构①荚膜多肽抗原，能抑制调理作用，与细菌的侵袭力有关，也能抗吞噬;由D～谷氨酸多肽组成，抗原性单一，若以高效价抗荚膜血清与具荚膜炭疽杆菌作用，在其周边外发生抗体的特异性沉淀反应，镜下可见荚膜肿胀。②菌体多糖抗原，由等分子量的乙酰基葡萄糖胺和D～半乳糖组成，能耐热，与毒力无关。这种抗原没