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文档简介

生化实验讲解第一页，共十一页，编辑于2023年，星期三第二页，共十一页，编辑于2023年，星期三实验分为两大块：第一块单元操作验证性实验含实验1～7独立操作。第二块系列实验综合性设计性实验含实验8（1～5）要求成立合作小组分工合作实验方案讨论决定。第三页，共十一页，编辑于2023年，星期三注意事项1.填写实验预定表，1人1组1个操作台。2.利用实验教材、实验软件（演示、网络）认真预习。3.认真撰写实验预习报告，添上记录和计算结果就是实验报告，报告要图（表）文并茂。4.携白大褂、实验预习报告、实验教材、文具（铅笔、直尺、坐标纸等）按时到实验室做实验。5.当场完成实验报告，搞好桌面卫生，经教师检查批准后才能离开实验室。6.班长安排值日生打扫实验室卫生。第四页，共十一页，编辑于2023年，星期三生物化学实验考核1.实验报告：50%-60％，含预习报告、实验表现、实验报告写作、结果合理性等方面。2.理论笔试：40%-50％，明确实验目的、掌握实验原理、熟悉实验操作。第五页，共十一页，编辑于2023年，星期三实验二.粗脂肪的定量测定——索氏（SOXhlet）提取法

滤纸斗:不高于虹吸管花生碾碎去皮，电子天平称重，2g左右。空平底烧瓶洁净无水，电子天平称重。抽提结束（不再有溶剂滴下）后的空瓶在水浴锅上放3分钟后，烘箱烘干。手套拿出，立即电子天平称重。整个装置在一条直线上。用后的平底烧瓶用热水和洗涤剂洗净。第六页，共十一页，编辑于2023年，星期三实验三.氨基酸的分离鉴定—纸层析法

先平衡，再戴手套取滤纸操作；点样前铅笔标注点样顺序；点样斑点直径不超过0.5cm,少量多次，吹干再点。斑点间距离2cm左右。1.2~1.5cm第七页，共十一页，编辑于2023年，星期三四个同学一组，微量注射器最好专用；如用同根注射器取不同样品，蒸馏水清洗5遍以上，以点样样品润洗后，再取样点样。层析过程中观察层析距离和展层时间间的关系，绘图；展层距离为滤纸总长度一半以上时，即可停止层析。显色：热风吹干时在点样侧吹。铅笔标注溶剂前沿和层析斑点的中心，计算Rf值。凡跟滤纸接触的操作皆带手套。第八页，共十一页，编辑于2023年，星期三实验四.血清蛋白的电泳

将粗面朝上放在缓冲液中浸泡20分钟。

熟悉点样器操作：粗细均一的一条线。电泳前混匀电极液；滤纸桥要平。染、脱色要摇晃培养皿。条带要分析。第九页，共十一页，编辑于2023年，星期三实验五.微量克氏（Kjeldahl）定氮法消化：浓酸下把蛋白中1摩尔有机氮转化为1NH3→1/2(NH4)2SO4

蒸馏：浓碱可使消化液中的1/2硫酸铵分解，游离出1氨，氨使硼酸溶液中1氢离子浓度降低。标准酸滴定，回复硼酸原来氢离子浓度为止。即标准酸的摩尔数＝蛋白中氮的摩尔数。注意：不要干烧。夹层水保持3/4～满球水。第十页，共十一页，编辑于2023年，星期三实验六、七.标准曲线法求蛋白和核酸含量

标准曲线法，作图求。试管要清洗干净，无

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