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文档简介
桑树病虫害防治学实验指导书陈仁方肖伟何诗明西南农业大学蚕学与生物技术学院蚕桑学教研室200实验规则为了使同学们能够充分的运用实验时间,提高实验效率,保证实验课的质量,避免在实验中发生事故,制订以下实验规则,要求参加实验课的同学共同遵守。1.每次实验前,预习实验指导书,初步了解实验内容,以保证实验顺利进行。2.上实验课前,必须做好实验用具准备和检查工作,避免因临时缺少用具延误实验。3.实验进行中,严格遵守课堂秩序,不得高声交谈和随意走动,遇到问题,可直接请老师指导。4.实验结果记录和观察绘图应首先按指导书指定的方法进行不准抄袭,养成实事求是的科学态度。5.要爱护实验仪器,用具和节约使用药品。遇有故障及时报告指导老师,如有物品损坏,应报告登记。借用的仪器用具,用后要清洁归还。6.切实注意实验室安全,使用易燃易爆,有毒物品要当心,严格按照操作规程进行。禁止用酒精灯相互接火。7.离开实验室前,将实验桌整理好,负责清洁的同学,把实验室打扫干净,关上水电和门窗。目录实验一桑树主要病害症状观察。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。4实验二显微镜的使用和桑树病原玻片简易制作。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。15实验三桑病毒及类菌原质体病诊断及桑花叶型萎缩病内含物检查。。。。。。。。。。。。。。。。18实验四桑树细菌、真菌病原的分离、纯化及接种。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。20实验五桑树主要虫害的识别。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。26实验六桑树病虫标本采集与制作。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。34实验七桑园常用农药品种的识别、稀释、药效测定及残毒试验。。。。。。。。。。。。。。。。。。40实验八桑树抗病性鉴定。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。46实验九桑树病虫的田间调查、测报与损失估计及综合治理。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。47实验一桑树主要病害症状观察一.实验目的通过观看桑树主要病害实物幻灯片,观察病害标本,认识桑树病害各种类型,症状,初步掌握描述桑树病害症状的方法,加深对桑树主要病害对象的感性认识。二.实验材料及用具1.实验材料:桑树主要病害标本2.实验用具:手放大镜、体视显微镜、解剖针、镊子等。三.实验内容及作法植物在生长发育过程中,常常受到各种病原物侵袭,植物在受到病原物侵袭后,其内部生理过程受到扰乱,并在外部形态上出现不正常状态,称为病状。在受病植物的侵染部位常常可以看到一些病原物结构,这些结构叫病征。如菌丝体、菌索分生孢子盘、菌核、菌脓等。植物受病后表现出来的不正常的综合症状,称之为病害症状。病害症状的主要类型有:1.变色:感病后失去正常的绿色。变色又分两种,形成的症状明显不同。(1)整株、整叶或部分叶片均匀变色、褪绿、黄化,如桑树黄化型萎缩病,桑树萎缩型萎缩病;(2)变色不均匀,形成浓绿和淡绿相间的花叶,如桑花叶型萎缩病。2.坏死:因受病部位不同表现各种症状,在叶片上常表现为叶斑和叶枯,如桑树褐斑病,桑树叶枯病;叶斑坏死组织如果脱落,即形成穿孔,如褐斑病,有的叶斑有轮纹则称为轮斑如桑炭疽病。幼苗近土面的茎组织坏死,但植株不倒则形成立枯病,(如桑苗立枯病),若幼菌猝倒而叶片仍绿色,则称猝倒,如桑幼菌猝倒病。若茎枝坏死,则称为枝枯,如桑芽枯病、桑拟干枯病。3.腐烂:受病部位细胞组织较大面积的分解和破坏,受病部位可以是根、茎、花、果等,如桑树褐斑病,桑紫纹羽病,桑根腐病,桑椹菌核病等。含水较多的柔嫩组织分解和破坏,细胞的中胶层破坏,组织崩溃形成软腐。含水较少的组织腐烂后,水分很快蒸发形成干腐病,如桑干枯病,拟干枯病;相反如果细胞消解很快,腐烂组织不能及时失水则形成湿腐。4.萎蔫:整株或部分枝叶、萎垂死亡,剖视病株,茎、根常见维管束组织变黑、变褐,植株迅速萎蔫死亡,而叶面仍保持绿色的称青枯病(如桑青枯病)。5.畸形:部分细胞组织受抑制或残缺或生长过度植株的生长成比例受抑制,病株比健株矮小得多,称为矮缩。枝条不正常的增多,形成族生状,称为丛枝。叶面产生高低不平的皱缩,如桑萎缩病;叶片向上或向下卷,称为卷叶,如桑叶枯病。根、茎、叶上形成大小不等的瘤状物称肿瘤,如桑根瘤线虫病。先看幻灯片实物照片及症状描述,然后仔细观察实物标本,必要时用放大镜观察,或用双筒显微镜、显微镜制片观察。1、桑黄化型萎缩病桑黄化型萎缩病又叫萎缩病,俗称癃桑、猫儿朵、塔桑,是我国主要的桑树病害。本病主要发生于我国江苏、浙江、安徽、湖北、湖南等省。70年代以来,不少地区曾暴发成灾。本病大都在夏伐后发生,早的在5月上旬出现症状,6-8月发生最烈,病树很快衰亡,致使成片桑园被迫挖毁,成为一些蚕区蚕桑生产上严重威胁。发病轻的,桑枝顶端的桑叶缩小变薄,叶脉变细,稍向背面卷缩,叶色黄化,腋芽早发。发病中等的,叶形更加缩小,叶片向背面卷曲更甚,色黄质粗,节间变短,叶序混乱,侧枝多而细小,不生桑果。发病重的,叶瘦小似猫儿朵,腋芽不断萌发,细枝丛生成簇,似帚状。从整株的病情发展来看,先由单枝发病,逐步蔓延至全株。植株上还没表现症状的枝条仍能长出花椹,次年经过夏伐,往往枝条顶端逐叶萎缩,下部叶片仍正常,看似宝塔状。病枝越冬有枯梢现象,病根色泽不鲜明。2、桑萎缩型萎缩病桑萎缩型萎缩病也叫萎缩病、癃桑、龙头桑、糜桑、虾桑,是桑树萎缩病的类型之一。该病主要分布于我国浙江、江苏、安徽等省。本病也是在桑树夏伐后发病,其特点也是来势凶猛、蔓延快,严重的地区3—4年间发病率可达80%,减产50%以上。严重影响蚕桑生产。发病轻的,叶片缩小,叶面皱缩,裂叶品种的叶形变圆、枝条细短、叶序混乱、节间缩短;发病中等的枝条顶部或中部的腋芽早发,生出许多侧枝,全叶黄化,质粗糙,秋叶早落,春芽早发,无花椹;发病重的,枝条生长显著不良,瘦枝徒长,病叶更小,最后枯死。整株发病情况是先局部、后全株,逐步蔓延加重。3、桑花叶型萎缩病桑花叶型萎缩病又称癃桑、癞头皮桑、鬈桑、惊桑,也叫花叶卷缩病,是桑萎缩病的一种。该病主要分布于我国江苏、浙江、安徽、四川等蚕区。严重田块的发病率可高达90%左右。本病主要在春季及晚秋发生,病株桑叶卷缩、发皱、硬化,影响春叶及夏秋叶的产量及质量。叶片侧脉间出现淡绿色或黄绿色斑块,叶脉附近仍为绿色,形成黄绿相间的花叶。叶背脉侧常生小瘤状突起,细脉变褐,病枝稍细、节间略短,春末、初夏及秋季,同一病枝上的叶片常有表现症状与不表现症状的间歇现象。叶形不正,叶缘常向叶面卷缩,裂叶有时半边无缺刻,病叶小而叶面卷起显著,后期质地粗硬,叶脉明显变褐,瘤状或棘状突起更多,腋芽早发,病株极易遭受冻害,桑根不腐烂,病株逐渐衰亡。4、桑细菌性青枯病桑细菌性青枯病又名“枯萎病”,细菌性枯萎病,俗名“瘟桑”、“疽桑”。本病是广东蚕区常发的一种细菌性病害。具有发病急、蔓延快等特点,对蚕桑生产造成的威胁很大。1978年广东顺德地区不少桑园发此病后不得不另种其它作物。除广东省有本病的分布外,广西及其它引进广东桑品种的蚕区也有本病的发生。本病在田间具明显的发病中心,如果桑园出现多个发病中心,则病害很快蔓延,致使整片桑树青枯死亡,病地虽补植桑树,仍然发病。本病是典型的维管束病害,无论是多年生的根刈桑、大树尾,或是当年的定植桑、实生苗,均能受害。地上部的症状表现为青枯,全株叶片尚保持青绿而失水凋萎;有些是从桑株的上、中部叶片的叶尖、叶缘先失水,然后变褐、干枯,逐步扩展全叶。地下部的初期症状外观并不明显,但剖开根部皮层可见木质部有褐色条纹,随病情进展可延及茎枝,严重时根部的木质部全部变褐、变黑,病枝或病根切口很少或没有白色乳汁分泌,却有污白色的菌脓溢出,久病的根部皮层呈湿腐而脱落,木质部变黑腐烂。5、桑疫病桑疫病过去称细菌病、烂头病。有黑枯型、缩叶型两种病型,都是桑树重要病害。该病分布很广,各大蚕区都有,浙江、江苏、山东、广东、四川各地更为普遍而严重。本病为害叶片、新梢,使叶片呈现黄褐色斑点,甚至整片枯黄;同时引起枝条梢端芽叶黑枯腐死,使枝条不能继续生长,影响产量极大。本病两种病型的症状不同。黑枯型桑疫病:侵染桑叶时,叶片呈现褪绿转黄的不规则多角斑。侵染新梢时,发生烂头症,并沿枝条向中下部蔓延,在枝条表面形成粗细不等稍隆起的点线状黑褐色病斑。枝条内部呈现比外部更鲜明的黄褐色点线状病斑。有症状的病斑可穿过木质部深达髓部,木质部和髓部受害后发生畸形病变。有时病斑相连成块,在中央形成空洞,空洞周围的表皮组织向外突出呈隆起状。有的病斑能蔓延到桑芽的中轴组织、支干和潜伏芽内。缩叶型桑疫病:发生在嫩叶和嫩梢上,若病原菌从气孔侵入叶内,则叶面散生油浸状圆形病斑,病斑逐渐扩大变为黄褐色,周围稍退绿变黄。随着嫩叶长大,病斑部坏死穿孔,叶片皱缩,进而脱落。若病菌从叶柄、叶脉处侵入,则通过维管束扩展至叶脉,常在叶背的叶脉上形成病斑,初呈褐色,后变黑色,使叶片不能展开,叶面反向卷曲。病菌从嫩梢侵入时,枝条表面形成大小不一的纵裂病斑。不论是黑枯型或缩叶型,在高温多湿条件下,病斑部溢出淡黄色粘附物,是为病菌聚集而成的“溢脓”,干燥时溢脓常凝结成为有光泽的小珠或菌膜状。6、桑里白粉病桑里白粉病又称白粉病,寄生桑及臭椿。本病在我国分布极为广范,长江流域多在9—10月分盛发。主要对晚秋叶造成为害。受害桑叶虽不致引起急速萎凋,但因养分消耗,影响桑叶品质,使桑叶提前硬化,采摘后容易干燥。用病叶饲蚕由于叶质劣,营养价值差,蚕食下量减少,造成蚕体虚弱,容易诱发蚕病,全茧量、茧层量、茧层率均降低。桑里白粉病症状开始时散生白色细小霉斑,逐渐扩大并常连成一片,终至布满叶背。霉斑表面呈白粉状,是病菌的菌丝体和分生孢子。至后期(一般在10月上旬)在白色霉斑上出现黄色小颗粒,并逐渐增多,由黄色转橙红变褐,最后成黑色。这种颗粒是病菌的闭囊壳。在病斑相应处的叶表则可看到微黄至淡黄褐色的斑块。桑里白粉病通常发生在枝条中、下部较老的叶上,枝条上部的嫩叶一般不受侵害。7、桑污叶病本病也是夏、秋季桑叶常见病害之一,常与桑里白粉病同时发生。桑污叶病在我国分布也很广,病叶背面蒙上一层黑色煤污状物,使叶质变劣,提早硬化,容易萎凋,不适于饲蚕。桑污叶病发生在较老的桑叶叶背(嫩叶上很少发生),开始时发生小块煤粉状黑斑,随着病势发展,病斑逐渐扩大,在相应的叶表面呈现同样大小的黄灰色或暗褐色变色斑。当病斑继续扩大,相互连接时,往往布满叶背,整张叶片表面也随之变色,与桑里白粉病并发时,常在叶背形成黑、白相间的混生斑。8、桑叶枯病桑叶枯病又叫桑卷叶枯病。也是桑树重要的叶部病害。主要分布在江苏、浙江蚕区,近年来山东、四川也有发生。发病后桑叶卷枯或干枯脱落,有时整个桑园无可用之叶,影响桑叶产量。为害叶片,以嫩叶为主,故枝条顶端4—5片叶发病为多。春季发病时,被害叶边缘发生深褐色连片病斑,随着叶片的生长,叶身前面卷缩,严重的全叶发黑脱落,致使整枝只剩新梢顶端嫩芽。夏秋期发病较多,枝条顶端叶片受害的则叶尖及附近叶缘变褐,后扩大至前半张叶片,成为黄褐色大枯斑;下部叶片受害,则从叶缘向叶脉间发生黄褐色或灰褐色的梭形大病斑。在病叶上病、健组织界限分明。病斑吸水易腐败、干燥则开裂。当天气潮湿时,病斑上往往产生暗蓝褐色的霉状物,为病原菌。9、桑褐斑病桑褐斑病俗名烂叶病、焦斑病,是桑树叶部的主要病害之一。主要分布于浙江、江苏、山东、四川、云南、新疆等省。此病发生期很长,为害严重,可使桑叶减产30%以上;一般4月下旬即开始发病,5月上、中旬到达发病盛期。发病初期,病斑少而小,病叶尚可饲蚕,受害重的桑叶,病斑多而大,往往连接成片,使病叶枯萎,提早脱落或整叶腐烂,严重影响桑叶的产量和质量。症状病斑呈现于叶片的正背两面。最初为淡褐色、水渍状的小斑点,病斑周围叶色稍变黄,迎光看轮廓十分明显,随着病情的发展,病斑逐渐扩大,形成近圆形的茶褐色或暗褐色病斑。(有时病斑受叶脉的限制而呈多角形或不规则形,)病斑边缘色较深呈暗褐色或茶褐色,中央淡茶褐色或灰色,其上环生白色或微红色的粉质块。这种粉质块在同一病斑的正反两面都有,后期变成黑褐色残留在病斑上。晚秋发病的病斑周缘常有紫褐色晕环,叶脉被侵染亦变紫褐色,叶背更为明显。阴雨连绵时,病斑吸水膨胀,腐败穿孔;遇干燥天气,病斑中部往往开裂。严重发病的叶片上,许多病斑相互连接成大病斑,不久叶片枯焦,形成“焦斑”、“烂叶”而脱落。叶柄、新梢发病时,则呈暗褐色、长形略凹陷的病斑。10、桑炭疽病桑炭疽病主要分布于华东、西南地区。本病为害叶片,多在夏秋季发生,发生严重时,多数病斑连接形成不规则大枯斑,叶尖叶缘更多,使叶片枯黄,提早硬化,中下部叶发病多,严重影响秋蚕饲养。症状开始发病时,叶上散生黄褐或红褐色不清晰小点,后逐渐扩大,呈暗红色,不规则或近圆形的病斑,病斑部正反面均可散生由棕褐色到黑色的疹状小颗粒,即病菌的分生孢子盘。病斑扩大,联在一起,则病部或全叶枯焦。11、桑赤锈病桑赤锈病又名赤粉病、金桑。可寄生桑及数种与桑近缘的植物。本病分布也很广,但主要分布在江苏、浙江、山东、云南、广东等省。主要为害嫩芽和叶片,叶柄及新梢,病叶饲蚕虽无中毒现象,但感病芽叶畸形卷缩,布满金黄色病斑,引起叶质低劣,产量下降,导致蚕茧歉收。桑赤锈病以春季到初夏发生多,至炎热的夏季停止,秋季也有发生。江苏、浙江每年春季发芽时发病;广东则4—6月、9—11月有两次发病高峰。症状嫩芽被害后局部肿胀、弯曲畸形,其上布满微隆起的小点,即病菌的锈子器;新梢受害后,顺着维管束方向呈纵长形发展,呈弯曲畸形,表面均生有橙黄色锈子器,叶片被害后,起初正反两面散生圆形有光泽小点,逐渐肥厚隆起,颜色逐渐转黄,还侵及叶脉、叶柄,最后表皮破裂散出橙黄色粉末状的锈孢子,布满全叶,故有“金桑”之称。新梢、叶柄、叶脉受害后,顺着维管束方向呈纵长形发展,呈弯曲畸形,表面均生有橙黄色锈子器,新梢上的病斑逐渐变黑,椭圆形稍凹陷。桑花被害呈不规则膨大,桑椹则失去固有光泽、变黄,后期布满橙黄色粉末。12、桑芽枯病桑芽枯病是桑树枝干上的重要病害之一,为害冬芽,常与拟干枯病并发,影响春蚕生产。本病主要分布在北方蚕区。被害株轻者枝梢1/3以上枯死,重则整株全枯,影响春蚕饲养。本病病原除寄生桑外,还寄生合欢、刺槐、构树等。症状:冬末至早春,在枝条中、上部的冬芽附近,开始出现油浸状暗褐色略下陷的病斑,以后逐渐扩大,并密生略隆起的小粒,突破表皮后露出红褐色小疹状的分生孢子座。以后数个小病斑愈合成一个大病斑,当包围枝条后,截断树液的流动,上部枝条即枯死,促使病斑以下的腋芽萌发。病部皮层很易与木质部剥离,并放出一种酒精气味。发病3—4个月后,在枯死枝上的分生孢子座,可单独形成一种暗蓝色的小点块,即病菌的子囊壳子座。病斑仅局限于枝干局部,为害并不剧烈时,因患病部周围愈伤组织的形成可限制菌丝的扩展,其上部枝条,即不至枯死,但被害部显著变形,呈癌肿状,外皮常常破裂,在其上露出黑褐色的纤维。13、桑拟干枯病桑拟干枯病又名拟胴枯病,本病是一类引起枝干枯死、病状比较相似的病害,病原菌种类很多,分布也很广,但以北方蚕区发生较多。病原寄生在枝干部,伐条后留下的枯桩、半截枝上,以为害一年生枝条最重,可致枯死,不能发芽。常与芽枯病并发,导致春叶减产,直接影响到春蚕饲养。桑拟干枯病大多发生在枝条中、下部,或在伐条后的残桩上。在病部表面生水渍状的褐色病斑,以后逐渐扩大,并可相互愈合成大病斑而连成一片,大的往往长达尺余。湿润时呈水肿状,干燥后皱缩凹陷,病健组织界限分明,在病斑环绕枝条一周时,截断养分流通,上部枝条即枯死。被害枝条在春季发芽前后最为醒目。症状病部皮下密生并不突起的黑色小疹,外皮平滑易剥落,树皮及木质部均极脆。常见的有五种。桑平疹干枯病本病寄生于枝条,病斑可长达30多厘米,呈黄褐色,皮下密生黑色小疹,表面平滑无突起。桑腐皮病本病在鲨鱼皮状小疹中,用放大镜可看到灰色子座中有一至数个黑点(子囊壳嘴)。桑丘疹干枯病本病大部分在冬芽周围出现病斑,病斑上布满黑色小疹,枝条上病健组织界限明显,病斑暗色,稍凹陷,外皮龟裂。桑小疹干枯病枝条上病斑生小疹状黑色病斑。桑枝枯病本病多发生于桑苗及幼树,发病部在近地面枝条基部2—3厘米处,病斑黑褐色,皮层坏死脱落,显著凹陷。其周围发生许多小疹,小疹暗黑色。14、桑膏药病桑膏药病又称“烂脚癣”。是桑树的枝干病害。主要分布在四川、江苏、浙江、安徽、山东等省,各蚕区。四川川南蚕区因土壤地下水位高,空气湿度大,高干乔木多,故发生特别严重。本病在病树枝干上可见膏药状病斑,菌丝体在枝干上形成厚而致密的菌丝膜,紧缠枝干,产生机械压力,阻碍枝干加粗生长,使病斑部呈凹陷。尚有部分菌丝侵入组织内吸取养分水分,使树势衰弱。本病除为害桑树外,还为害茶树、桃、李、杏、梅、樱桃、柑桔、冬青等。症状本病多发生于主干中、上部或枝干基部表面。桑树感病后,由于菌丝相互密集,形成菌丝膜,围绕于枝干上,形成圆形或不规则形灰色或褐色斑块,紧贴树皮,如膏药一样而得此名。桑树上常见的有两种:1.灰色膏药病2.褐色膏药病15、桑紫纹羽病桑紫纹羽病,又叫烂蒲头、泥龙,是桑树重要的根部病害。主要分布于江苏、浙江、安徽、四川。感病桑株春季不能发芽,或发芽较差。发芽开叶后,遇较高气温,芽叶即迅速萎凋,随即全株枯死。苗木及幼龄桑受害后只需2—3个月即可枯死,成林桑较慢,感病后一年至数年才枯死,乔木桑最慢。发病严重时成片死亡,对蚕茧生产威胁极大。除桑以外,本病还为害山芋、马铃薯、花生、大豆、胡萝卜、茶、梨、桃、苹果、槐等百余种植物。症状初发病时,病菌首先侵入桑株的幼嫩新根上,被害根渐变黄色,失去光泽,根的表面有细丝状紫红色菌丝,随着病情发展,菌丝体纠结成根状菌丝束,纵横交错成网状布满桑根,以后蔓延在根部及树干基部,形成紫红色菌丝膜。病菌逐渐侵入支根和主根的形成层后,根部皮层转黑色而腐烂,栓皮和木质部彼此分离,致使病株容易拔离土壤。在腐朽的根部或病株附近土壤中还有紫红色颗粒状的菌核。地上部分,初呈缺肥状,生长缓慢,病株逐步衰弱,枝细叶小,叶色发黄,下部叶先脱落,枝梢停止生长,芽叶枯萎,最后整株枯死。广东蚕区3月间即开始表现症状,4、5月最多。江苏、浙江一带5月间才陆续出现,梅雨季节,菌丝膜上常产生子实体,表面产生白色粉质块,即病菌的担子和担子孢子。16、桑根结线虫病桑根结线虫病又叫桑根瘤线虫病。我国各蚕区均有发生。桑苗和桑树得病后根的正常生长机能受到阻碍,致使地上部表现衰弱矮小,逐渐枯黄,严重时可引起病株凋萎死亡。线虫除为害桑树外,还寄生多种经济作物和杂草。主要的寄主如花生、烟草、黄豆、绿豆、马铃薯、番茄、瓜类、红麻、黄麻、蔬菜等。本病是由根结线虫侵入桑的根系组织而引起。线虫入侵后,不断吸取根系营养物质,在吸食过程中,线虫分泌出一种分泌物(唾液)刺激根部细胞变形增大(形成巨形细胞),使根部组织过度生长,形成大小不等的瘤状物(根瘤)。根瘤多数呈球形,小如豆粒,大如鸡蛋,外表不规则。根瘤初形成时呈黄白色,表面光滑,较坚实;剖开根瘤,肉眼可见乳白色、半透明粒状物(雌成虫),以后根瘤渐变褐色,最后成黑色而腐烂,致使病株的地上部表现近似缺肥等症状。病株短小,生长迟缓,枝条少而纤弱,叶薄而少,顶叶难开,严重发病时,叶色发黄,叶缘卷褶甚至干枯脱落,枝条终致枯萎,整株死亡。在一般发病情况下,桑树栽种2—3年后明显减产,4—5年频于死亡;在严重发病情况下,栽种2—3年后,长势衰退以至死亡。17、桑肥大性菌核病18、桑椹缩小性菌核病19、桑椹小粒性菌核病20、桑断梢病21、桑干枯病22、桑白绢病23、桑根朽病24、桑灰霉病25、桑粗皮病(生理病害)26、废气污染-氟化物严重中毒氟化物为害严重时叶缘显现褐色,随污染加重周缘褐色更加扩展。氟污染主要是砖瓦厂、水泥厂、磷肥厂等排放的氟化氢、四氟化硅等含氟废气。属生理病害。27.废气污染-二氧化硫为害状二氧化硫为害叶片,叶片发育不正常,出现斑点。二氧化硫多发生在铜、锌冶炼厂周围。28.药害-农药浓度过大引起的药害全株性的,先在叶片周缘变褐,后迅速干枯卷缩。29.缩二脲中毒外观皱缩,症状似桑萎缩病。引起的主要原因:尿素质量低劣(含缩二尿超标)。22.草甘膦积累中毒本病症状与桑花叶型萎缩病相似,极易混淆。四作业将观察结果记录于下表病害名称为害部位症状特点所属病源分类地位黄化型萎缩病萎缩型萎缩病桑疫病青枯病桑里白粉病桑片枯病桑叶枯病桑疽病桑褐斑病桑赤锈病桑芽枯病桑拟干枯病桑膏药病桑紫绞羽病实验二显微镜的使用和桑树病原玻片简易制作一实验目的了解显微镜的结构,正确掌握,显微镜的使用方法,学习病原玻片的简易制作方法。二实验材料和用具显微镜、盖玻片、载玻片、擦镜纸,沙布,镊子,解剖针,蒸馏水。三实验内容及作法(一)显微镜的结构显微镜的种类很多,有的简单,有的复杂,而且各有专门用途。这里只介绍一般的光学显微镜、它的结构主要包括。光学部分:物镜,目镜,镜筒,聚光器和反光镜。(1)物镜:即接物镜,是显微镜上最重要的光学部分,也是最重要的部分。物镜分:低倍,中倍,高倍镜和油浸镜,物镜上都标有放大倍数,如8×,10×为低倍镜,15×,20×为中倍镜,40×,45为高倍镜,90×,100×为油浸镜。油浸镜是指物镜和盖玻片之间须用香柏油或液体石蜡等为介质、除油浸镜外,其它物镜与盖玻片之间是以空气为介质。(2)目镜:即接目镜、目镜上同样标有放大倍数。如5×,10×,15×,25×等。观察物体的放在倍数=目镜的放大倍数×物镜的放大倍数(3)聚光器:位于载物台,通光孔的下方,它的作用是聚集反光镜反射来的光线,并将其射入物镜和目镜,增加观察物的亮度。聚光器可以通过螺旋上下调节,向上调亮度加强,反之侧减弱。聚光器下部有虹彩光圈,推动把手,可以控制聚光器口径大小和照射面,达到调节光的亮暗。当自然光或照明用具光强时,缩小光圈,光弱时增大光圈。虹彩光圈下部有一金属圆圈,可以置放滤光玻片,以改变日光源的色调。(4)反光镜:是显微镜下部的一个圆镜,它可以朝任何方向转动,用镜面收集光线、通过聚光镜将光线反射到物镜。反光镜有平凹两面,凹面反光强于平面。2.机械部分:包括镜头转换器,粗细焦距调节螺旋、载物台、镜臂、倾斜关节、镜座。(1)镜头转换器:上按镜筒,通过镜头转换器,上的螺纹圆孔可以安放不同放大倍数的物镜,转换器可以旋转以便根据需要利用其上面的不同物镜。(2)粗、细调节螺旋:粗调节螺旋是镜臂上方的一对大施扭,用于较大幅度升降镜筒,以调节物镜与标本之间的距离,确定合适的焦距。细调节螺旋是镜臂上方的一对小旋扭,用以调节微小焦距。有的显微镜的调节螺旋,是控制镜筒的升降,有的则是控制载物台的升降,所以使用时要特别注意旋扭的方向。(3)倾斜关节:镜座与镜臂连接处的活动关节,可以调节显微镜的倾斜角度,以便观察,但使用临时玻片时,禁止镜座倾斜,防止损坏显微镜。(二)显微镜的使用及注意事项:1.显微镜的取用:显微镜平时存致在柜和箱中,用时取出,取时做到一手紧握镜臂,一手托住镜底座,使镜身直立,不可单手倾斜提携,防止摔落目镜或反光镜。2.显微镜的安放:应放在身体正前略偏左方,距实验桌的边缘至少有2-3cm的距离,以防显微镜掉下。3.玻片的放置:将观察玻片放于载物台上,使观察部位,置于载物台上的圆孔之上,卡紧。4.镜头的使用(1)低倍镜的使用:观察任何标本,首先一定要从低倍物镜观察起。因为低倍镜的视野大,容易发现标本和找到需要观察的位置。使用低倍镜时,在观察之前,先转动粗调螺旋,使镜头下降,逐渐接近盖片,但应注意不能按触盖片,然后用左眼注视目镜(右眼同时要睁开),再转动粗调螺旋,使镜筒逐渐上升,不久即可看到观察标本。如果物象不够清晰时,可调节细螺旋至清晰为止。(2)中、高倍镜的使用:需要用中,高倍镜观察的标本,也必须先用低倍镜找到,并且把要观察部位移到视野的中央,然后转动转换器,用中、高倍镜观看,在一般的情况下;在转换中、高倍镜头后,在视野内即可显示出物象,旋转细调螺旋至物象清晰。如果在转成高倍镜后,未见到物象,则须将物镜下降到几乎与玻片相接的程度,然后转动细微调节螺旋,使镜筒慢慢升起,就可找到观察物。(3)油浸镜的使用:把高倍镜下观察到的标本部位移至视野中央,转动转换器,移去高倍镜,在标本的玻片上滴上一滴香柏油或石蜡油,然后换用油浸镜,使镜头浸埋在油中,观察时,只需略微调节细螺旋,即可看清物象。观察后,需将镜头升起,用擦镜纸轻轻地擦去镜头上的香柏油,用一块擦镜纸,滴一滴二甲苯,擦镜头,最后用干净的擦镜纸将镜头擦至清洁。5.光线亮度调节:显微镜主要是利用自然光和灯光,这两种光源的强弱直接影响聚光器和反光镜的使用。当光源强时,聚光器向下降,并缩小虹彩光圈的口径,使用平面反光镜。当光线弱时,聚光器向上升,开大虹彩光圈,反光镜用凹面。在观察标本时,一般来说,使用低倍镜时,聚光器下降,并缩小虹彩光圈,随着物镜放大倍数的增加,聚光器逐渐上升,并开大虹彩光圈。使用油浸镜时,光度须调至比高倍镜时更强。6.显微镜的还放:用毕显微镜后,将载物台上的玻片拿掉,把物镜移开,使两个物镜以“八”字形同时搁在镜台上,然后放回箱柜中。(三)临时病原玻片简易制作方法植物病原(真菌、细菌)的个体比较小,在显微镜下才能观察清楚。因此,必须把病原制成玻片标本,在实际工作中,常常是制做临时玻片标本。方法如下:1.用镊子从酒精瓶中取出盖玻片与载玻片,用清洁沙布擦干净。载玻片平放在桌上。2.用吸管乳酚油或蒸馏水,滴一小滴在载玻片中央。3.将需要观察的病原或病组织材料。用解剖针挑取放于载玻片的乳酚油或蒸馏水中。4.取盖玻片,以其一边先按触载玻片,用解剖针托住盖片,慢慢放下,使乳酚油成蒸馏水在盖玻片内铺满。乳酚油等浮载剂不能滴太多,以加盖玻片后刚刚均匀铺开,而盖玻片边缘无多余浮载剂外溢为宜,如浮载剂过多,应用吸水低从盖片边吸取外溢的浮载剂。制片中,为了减少气泡,要求在盖盖片时动作要缓慢,如果临时盖片上有气泡,可以将载玻片底面即没有盖玻片的一面置于酒精灯火焰上稍加热,排除气泡。四、作业制作一张合格的临时玻片,并使用各种放大倍数的物镜观察。实验三桑病毒及类菌原质体病诊断及桑花叶型萎缩病内含物检查目的要求桑树病毒及类菌原质体病害,有黄化型萎缩病、萎缩型萎缩病、花叶型萎缩病,一般认为黄化型、萎缩型萎缩病为类菌原质体病害,花叶型萎缩病为病毒病害。均是全株性病害,对蚕桑生产威胁很大,可使一个地区桑园全军覆没,必须及时诊断采取措施。通过本实验认设识桑树病毒及类菌原质体病害主要症状,掌握病毒内含体观察的基本技术,为桑树病毒及类菌原质体(桑花叶型萎缩病)的诊断打下基础。二.实验材料用具三种病毒及类菌原质体标本,显微镜,载玻片,盖玻片,尖头镊子,安置液,鲁戈尔氏碘液。三、实验内容及做法1.症状观察桑树病毒及类菌原质体病害的症状识别,是诊断病毒及类菌原质体病害的一个重要方面。1).黄化型萎缩病2).萎缩型萎缩病3).花叶型萎缩病4).其它病毒病害取三种萎缩病标本,仔细观察主要症状区别,记载于下表病型黄化型萎缩病萎缩型萎缩病花叶型萎缩病症状叶枝侧2.大田观察桑树黄化型萎缩病,萎缩型萎缩病,花叶型萎缩病的症状,与一些非浸染性病害及药害相似,必须按一定程序进行诊断和鉴定。首先必须进行田间观察:一般来说,患病毒及类菌原质体的桑树在田间的分布是分散的,在病株周围可以有完全健康的桑树,而非侵染性病害通常成片发生,而且发病的地点与特殊的土壤条件及地形有关。如果初次侵染来源是两种菱纹叶蝉,那就可以能首先在田边的桑树上先发生。在症状上,患病毒及类菌原质体病害的桑树,往往表现出某一类型的变色、褪色和器官变态,变色褪色发生在叶片局部器官组织,相间发生即形成驳斑状的花叶。典型的花叶症状是,先表现在叶脉透明,以后表现叶色的深浅不一,浓绿与淡绿相嵌,叶面皱缩不平。如果变色在整张叶片上全面褪色即成为黄化。这些症状在田间的表现,是先从桑树顶端生长点出现,然后扩展到全株的其它部位。随着气候变化,较均匀的分布,不象真菌与细菌病那样引起的斑点分布不均匀。此外大多数细菌与真菌病害的发生与发展与温度成正相关,而桑树病毒及类菌原质体病害没有这种相关性,有时干燥反而还有利于两种萎缩叶蝉繁殖活动、加速病害的发展。证明其传染性是诊断桑树病毒及类菌原质体病害的关键,进行田间观察后,还必须取病枝进行嫁接,嫁接后如表现出萎缩的症状。才能最后确诊。3.桑花叶型萎缩病内含体检查桑树病毒及类菌原体病害病原均在细胞内寄生,外表看不到病征,但桑花叶型病毒病在受浸染的细胞中常常形成病毒的内含体。病毒的内含体分结晶状与非结晶状,桑花叶型萎缩病属无定型内含体,即非结晶状的X—体。桑花叶型萎缩病内含体多存在于有明显症状的叶片中,尤以叶片表皮细胞和表皮毛为多。检查方法如下:1).取典型花叶型萎缩病病叶(表皮及表皮毛),用尖头镊子从褪绿部位撕下一小块表皮,放于载玻片上水滴中,加盖玻片,先在低倍镜下观察,再在高倍显微镜下观察。2).取材相同,放于载玻片上,用碘液染色(碘1g、碘化钾2g、蒸馏水300ml)桑树黄化型萎缩病媒介昆虫观察:取两种菱纹叶蝉标本,仔细观察体色、体型菱纹斑及花纹。四作业1.完成完成症状观察表;2.简述两种菱纹叶蝉的形态特征;3.以组为单位选取制作好的桑树花叶型病毒内含体标本拍摄。实验四桑树细菌、真菌病原的分离、纯化及接种一.实验目的了解病原物物分离的基本原理,掌握组织分离法、单孢分离法、培养皿稀释法和平板划线分离法等细菌、真菌分离技术;接种技术,了解接种实验在植物病理上的意义。二.实验材料及用具1.材料;供分离的桑树真菌、细菌病害新鲜标本、菌种(桑小粒性菌核病新鲜子囊盘、桑细菌病斜面培养纯化菌种)清水——琼脂培养基(三角瓶装,真菌分离用)马铃薯——葡萄糖培养基(三角瓶装,试管斜面真菌分离用)牛肉汁——蛋白胨培养基(三角瓶装,试管斜面、平板细菌分离用)灭菌水(三角瓶装)药品:75%酒精、95%酒精、0.1%升汞液。2.用具:灭菌培养皿、试管、吸管、吸水纸、移植针、移植镊、小刀、小剪、纱布、酒精灯、玻棒、铅笔、标签、棉花、电炉、高压锅、塑料袋、金钢砂、显微镜、解剖针、喷枪。三.实验内容及作法在受病组织的各个部位和其它基物中,病原真菌、细菌常常是和其它微生物混杂在一起的,为了获得纯的植物病原真菌、细菌,必须将病原菌和其它微生物分离,再将分离出来的病原物进一步纯化,就可以得到纯培养的病原菌。植物病害的鉴定、病原菌的特性、分类等研究都必须经分离而获得纯培养菌。(一)桑树病原真菌的分离和纯化1.分离前的准备工作(1)分离工作是在清洁无菌的不环境下进行,一般是在消毒的灭菌操作室或超净工作台。在无上述条件和设备时,在清洁而空气比较静止的房间内也可以进行分离工作。要求把工作台上的其它物品拿走,擦净工作台,放一张湿纱布,地面洒水,使其潮湿,工作所需一切物品都应放在工作台上,工作前应用肥皂水洗手,再用酒精消毒,分离时避免在室内走动。(2)制作平板:将三角瓶内的清水——琼脂培养基熔化,倒15ml在灭菌培养皿中,轻轻摇动培养皿,使培养基在培养皿内分布均匀。培养基冷却后,即成平板。2.组织分离法的步骤(1)选择新鲜病斑,在病健组织交界处,切取适当大小一块组织,一般是叶片组织切取4~5mm2,其它厚肥组织切取3~4mm2。(2)将切取的分离材料浸于75%酒精中,2~3s(湿润组织表面或表皮毛),然后把材料移入0.1%升汞液中,处理0.5~2min。(3)用在酒精灯上火焰灭菌的镊子,将材料从升汞液中取出,放在装有灭菌水的培养皿中清洗,按顺序连续在三个培养皿中洗三次。(4)用灭菌的镊子从第三培养皿中取出材料,放在装有数层灭菌吸水纸的培养皿中,吸去附在材料上的水分。(5)用灭菌的镊子从吸水纸中取出材料,移入平板培养基上,每个培养皿内放3~5块材料,呈三角形或五梅花形。(6)将材料放好后,贴上标签,将培养皿翻转,放在25℃恒温箱内培养。(7)当培养皿中的材料长出菌丝,用移植针挑取边缘菌丝并连带菌丝下少量培养基,将其转移到斜面试管内再培养。如此转管2~3次,能够起到菌种纯化的作用。操作过程应注意:倒平板培养基,倒灭菌水入培养皿中,分离步骤(3)(4)(5)(7)都要求在无菌状态下操作。主要应注意:三角瓶试管的口火焰灭菌,镊子的火焰灭菌、培养皿的开闭要有灭菌意识。3.真菌的纯化——单孢子分离法采用组织分离法分离的真菌,如果分离材料和操作都很好,不难得到纯培养的菌种。但是即便有这些有利条件,也不能排除分离到的菌种混杂有其它真菌和存在不同菌系的可能性。因此对于一种真菌进行深入研究以前菌种的纯化是必要的。单孢分离法是重要的真菌纯化方法。主要步骤:(1)把清水——琼脂培养基溶化后,取10ml在灭菌培养皿中做成平板,放在温箱内,待冷凝水蒸发掉后再用。(2)将分离得到的真菌配成孢子悬浮液,用移液器把少量孢子悬浮液涂于平板培养基表面,在25℃(3)将平板翻转,用低倍显微镜在培养皿底部寻找孢子。如果发现视野内只有一个孢子且已有芽管,就用墨汁把孢子圈住。(4)用切取器将带有孢子的小块培养基切下,切取范围不得超过墨汁圈,再用移植器把孢子移到适当的培养基上培养。4.真菌分离中,排除细菌污染的方法在真菌分离时,经常有细菌污染,特别初学者更是如此,这对分离纯化菌种带来很大影响。排除细菌污染可以采用如下方法:(1)先将真菌接种于水——琼脂平板培养基上,然后将一管熔化,冷却至45℃(2)把玻璃环浸入75%酒精中,用镊子夹起在火焰上灭菌,然后将环一端陷在水——琼脂平反培养基内,把污染的菌种接种于玻璃环中央的培养基上,真菌菌丝自玻璃环底部穿过培养基而达到培养基表面生长,细菌则限于在玻璃环内生长。(3)调节培养基的PH值,使其呈酸性,绝大多数细菌不能在PH值小于4的酸性培养基上生长,因此可以在培养基内加入几滴乳酸,抑制大部分细菌的生长,而不影响真菌的生长。(二)桑树细菌病原的分离和纯化1.分离前的准备工作(同真菌)2.稀释分离法的步骤(1)选取新鲜病斑,在病组织和健组织交界处,切取适当大小的组织材料,一般取4~5mm2,然后用蒸馏水冲洗干净。(2)材料浸入75%酒精2~3s,湿润组织或表皮再移入0.1%升汞液中处理0.5~2min。(3)用在酒精灯上灭菌的镊子,把材料从消毒溶液中取出,放入装有灭菌水的培养皿中清洗,按顺序连续在三个培养皿中冲洗三次。(4)取三个灭菌培养皿,在皿盖边缘上标1,2,3号,每个培养皿内倒入1ml灭菌水。(5)用在酒精灯上灭菌的镊子,将已消毒水洗的分离材料,夹一块放入第一号培养皿内,用火焰灭菌的玻棒将分离材料捣碎,呈悬浮液状。(6)用灭菌移植镊从第一皿中取一镊悬浮液移入第二号培养皿中,将移植镊重新灭菌后,再从第二皿中取一铒移入第三号培养皿中。(7)将牛肉汁蛋白胨培养基先熔化,待冷却至45℃,分别倒入上述三个培养皿中,立刻小心摇动培养皿,使悬浮液与培养基均匀混合。冷凝之后将培养皿翻转,置28注意从步骤(3)~(7)都应在无菌状态下进行,随时注意避免污染。3.平板划线分离法(1)将培养基熔化,倒入培养皿中制成平板,翻转置于30~35℃(2)取材,分离材料的表面消毒和清水洗(同稀释分离法(1)(2)(3)步骤)。(3)取一个灭菌培养皿倒入1ml灭菌水。(4)用灭菌的镊子,将已经用消毒水洗的分离材料夹一块放入上述培养皿中,用火焰灭菌的玻棒,将分离材料捣碎呈悬浮液状。(5)用移液镊取一镊悬浮液,在平板培养基表面一侧边缘反复涂抹。(6)把移植镊重新灭菌,从上述涂抹处划出2条直线。(7)将平板转动一定角度,用灭菌后的移植镊再次划线,第2次划线应经过第一次划线处。(8)再转动平板,继续划线,基本划满整个平板。参阅图示如下:(9)划线完毕,倒置平板,在28℃4.菌落的纯化象真菌的纯化一样,细菌的纯化在细菌研究中具有重要的作用,无论是进行分类鉴定,还是遗传变异研究都需要纯菌种。细菌的纯化主要是采用平板划线纯化法,其步骤同上述的平板划线分离法基本一致。即:在稀释的2、3号培养皿中或划线分离平板培养皿中选择典型菌落,从单个菌落上醮少许菌液,然后在平板培养基上涂抹,划线,如果长出的菌落一致,就可选一个单菌落移到试管斜面培养基上培养,而获得纯菌种。反之长出的菌落不一致,还应继续划线纯化,直到菌落一致。(三)桑树细菌、真菌病原的接种从病株上分离得到的真菌、细菌是否是致病菌,要通过对寄主植株接种,并透发产生与原来病株相同的症状,才能确定。植物病理的接种技术是病理学最常用的基本技术之一,它可以用来鉴定病原的致病性,选育抗病品种,研究病害发生过程,病害防治试验等。接种方法一般采用与自然条件下发病相似办法,因此,接种类型比较多。在进行病原物接种时,无论采用什么方法,都必须考虑(1)寄主植物的感病性,供试品种应是感病品种,在易感病的发育期接种;(2)病原物的致病性,菌种应具有较强的致病力,生活力强,有一定的接种量;(3)要创造适宜的发病条件,主要是温度和湿度,以利于病原菌的萌发和浸入。桑树上常用的接种方法有喷雾接种、涂抹接种(金钢砂摩擦)、针刺接种、剪叶接种、土壤接种、种子接种等。真菌病害——桑树断梢病病原接种试验接种菌液的准备:取新鲜子囊盘3~5个,自盘柄基部剪下,灭菌,放于灭菌烧杯中,加入5~10ml蒸馏水,用玻棒将子囊盘轻轻捣碎,制成子囊孢子悬浮液供用。接种桑树的选择:选择开雌花的桑树供用。接种:用灭菌毛笔醮取菌液轻涂抹于盛花期雌花柱头上,使每朵雌花都沾上菌液。保湿;接种后套袋保湿3d。以清水同法为对照。细菌病害——桑黑枯性细菌病原田间接种(1)菌液的准备:将斜面培纯的新鲜菌种,试管内加水5~10ml灭菌水,用移液杯轻轻洗下,并适当稀释,一般每ml有5×106个细菌。(2)接种桑树的选择:选择易感染黑枯性细菌病的桑树品种,如桐乡青、湖桑7号、小官桑等,选取数株嫩梢,作好记号。(3)接种:接种方法很多,本实验采用金钢砂摩擦接种法,即接种时,先在选好的嫩叶上,撒上一些金钢砂,用毛笔醮取菌液,在叶面上轻擦,利用金钢砂粉造成的伤口使细菌浸入。(4)套袋保湿:(同上)(5)以清水同法处理为对照。四作业1.分离真菌、细菌病原,并纯化为纯菌种。2.简图表示分离纯化步骤,并回答下列问题:(1)为什么分离材料不能切取过大过小?(2)在分离纯化步骤中,避免污染注意哪些地方?3.以组为单位,每组接种细菌或真菌病原,接种5~10株列表进行观察记载。4.根据以上接种试验的调查结果,分析此项接种成败的主要原因及改进措施写出实验报告。实验五桑树主要虫害的识别一、实验目的通过实验掌握桑树虫害主要形态特征,重点掌握鳞翅目、鞘翅目、同翅目桑树的虫害。二.实验材料及用具1.材料;各类型桑虫2.用具:解剖镜,解剖针,镊子,玻皿等三.实验内容及作法(一)鳞翅目桑树害虫鳞翅目种类繁多,为害重。为害桑树的有十个科1.桑毛虫与灯蛾类桑毛虫属鳞翅目、毒蛾科。本科的主要特点是成虫羽毛状触角,白色蛾子,腹末有黄毛丛,用以保护卵块。幼虫簇生毒毛,体有红黑色毛瘤,第6、7复节脊背面有毒腺(翻缩腺),幼虫结茧化蛹,茧上附有毒毛,蛹体殿棘末端有刺一根。灯蛾类:属鳞翅目、灯蛾科。为害桑树灯蛾科的种类较多,但主要是红腹灯蛾和黄腹灯蛾。该科的主要特点是,成虫多为白色或黄白色蛾子,成虫触角栉齿状,以腹部的颜色分为红腹灯蛾和黄腹灯蛾,背线为黑色,卵聚产,平铺。红腹灯蛾卵水绿色,黄腹灯蛾卵黄白色,幼虫毛瘤上生棕褐色或棕色长毛,长短一致,其中以红腹灯蛾毛色浅,而黄腹灯蛾毛色深。(无毒腺与桑毛虫的区别),土中化蛹,结土黄色茧。先取桑毛虫与红腹灯蛾的世代标本,比较成虫、翅色、纹、腹、斑纹、腹末有无毛丛,产卵方式、幼虫体毛、颜色、长短是否一致。再用解剖镜观察幼虫6、7腹节背面有无红色圆形的翻缩腺,以及蛹、茧颜色、臀棘差异等。然后取红腹灯蛾世代标本比较成虫、翅色腹部颜色、卵色、幼虫毛色、蛹体尾端刚毛数有何差异。2.桑螟与卷叶蛾桑螟与卷叶蛾的为害症状、幼虫极为相似。桑螟属鳞翅目螟蛾科。特点是成虫体瘦小,腹部光滑,腹末尖削,前翅成三角形,静止时呈展翅状,鳞片细密,紧贴,前翅银白色,具紫色反光,有5条荼色横带,后翅一条,卵小,具蜡质反光,幼虫水绿色,上有黑色毛片,其上生短毛1-2根,趾钩双序缺环。蛹瘦削,臀棘细长,上有8个钩刺。为害:幼虫叠叶,食叶,开天窗,排粪污染下部桑叶。卷叶蛾:属鳞翅目、卷叶蛾科,主要特点,成虫前翅成长方形,静止时成吊钟状,鳞片细密,其中黄卷叶蛾黄褐色,有3条褐色横带。花卷叶蛾灰白色翅基部有兰黑色阔带。休止时,前翅合拢成屋脊状。幼虫水绿色(与桑螟不同之处:具前胸背板,无黑色毛片,趾钩单序或双序环式,幼虫活泼)。为害:也是以幼虫为害,多为害顶芽,嫩叶,造成顶芽枯死,侧芽萌发或卷叶为害。先取桑螟与黄卷叶蛾的世代标本,重点在成虫、翅型、翅色、横带、幼虫前胸背板和黑色毛片的有无上进行比较,然后取两种卷叶蛾的成虫与幼虫标本进行比较,找出两者在成虫、翅色、斑纹、幼虫头部颜色、以及臀板有无差异。3.桑尺蠖桑尺蠖属鳞翅目尺蠖蛾科。本科的主要特点是,成虫翅大而薄,三角形,前后翅斑纹相似,体躯较瘦,休止时翅平放,幼虫腹足仅存于第6、10腹节,运动时首尾相就,曲屈前进,好象量地,故称尺蠖。为害:为害桑树芽叶,越冬幼虫吃冬芽心,留芽苞,桑芽开叶后,又食叶片,以早春为害冬芽严重。取桑尺蠖、绿尺蠖世代标本,观察成虫翅色斑纹,幼虫颜色、斑纹、腹足对数、以及蛹体臀棘状和钩刺数目。4.桑蛀虫桑蛀虫属鳞翅目透翅蛾科,本科主要特点,成虫翅狭长,多透明,似胡峰,幼虫黄白色,具棕黄色斜置的前胸背板和臀板,腹足退化,但趾沟明显,二横带式。为害,蛀食性害虫,幼虫蛀食一年生枝条中上部,蛀孔排成一直线,造成枯枝,类便圆柱形。在桑园中为害状极易与桑无牛混淆。(枝中上部为害,桑天牛枝中下部为害)取桑蛀虫世代标本和被害枝与桑天牛的世代标本及被害枝,从成虫翅型,口器类型,卵型,幼虫类型,前胸背板和臀板有无,蛹型来区别不同点。再在显微镜下观察其幼虫的趾钩形式。同时,从被害枝有无产卵痕,被害部位,排粪孔的位置等来区别其被害状。5.桑白毛虫,小地老虎桑白毛虫,小地老虎均属鳞翅目,夜蛾科。本科的主要特点:体色深暗有保护色,很少是鲜艳的,体粗状少毛,翅比前翅阔,触角丝状,有时前胸具竖立鳞片,前翅中室后缘脉纹四分支,后翅第一条脉纹在近翅基部处与中室有一点愈合,前翅翅面常有楔形,圆形成肾形纹,休止时双翅呈屋脊状,成虫均在夜间活动。幼虫不具毛瘤,少数种类只有2-3对腹足,似尺蠖,一般4对(肛足除外)。趾钩单序,中列式或缺环,很大,食叶,蛀食茎秆或切根,如桑白毛虫,小地老虎。为害:桑白毛虫,秋季为害桑叶,小地老虎为害桑苗,属地下害虫.取桑白毛虫、小地老虎的成虫和幼虫标本比较两者的翅色,翅纹以及幼虫体色,体毛,臀板等形态。6.桑蟥、野蚕桑蟥,野蚕属鳞翅目,蚕蛾科。本科的特点:体中型,粗状,触角短,双栉齿状。前翅项角外方外缘略向内凹陷,前翅5条经脉相连,幼虫有一尾角,各节最多只分2-3个环,腹足趾钩为双序中带,蛹有茧。如野蚕,桑蟥。为害:均以幼虫取食桑树叶片,夏秋期为害严重。取桑蟥,野蚕的世代标本,进行观察。7刺蛾,蓑蛾(1)刺蛾属鳞翅目,刺蛾科,本科的特点是:体型中等大小,短而粗状,触角雌为丝状,雄为羽状,口器不发达。翅上鳞片较松厚,有黄色,绿色,褐色等简单的斑纹。前后翅中室内有中脉的主干存在。幼虫体短而肥,蛞蝓形,头小,常缩入前胸,具3对不发达的胸足。腹足多退化,成吸盘,体色常鲜显,体被分枝毒刺,老熟后结茧于树上或土中。雀蛋状,为害桑树的刺蛾,主要有黄刺蛾,扁刺蛾,褐刺蛾,扁刺蛾,绿刺蛾等。为害:均以幼虫取食桑树叶片,取褐刺蛾世代标本,首先认识本科特征,然后分别与其它几种刺蛾标本相比较,找出成虫,翅色,班纹幼虫体形,体色,刺突颜色及着生位置上的差异。(2)蓑蛾:属鳞翅目蓑蛾科(又名袋蛾科)。本科的特点:体小型至中型,雌雄异态。雄蛾翅上鳞片稀少,触角双栉齿状,前翅有3条臀脉,在端部合并为一条,雌虫无翅无足,似幼虫。雌成虫终身在蓑袋中,并在其中交尾产卵,幼虫从蓑袋中孵化外出,能吐丝缀中,成袋。为害:均幼虫食害桑叶。取蓑蛾观察其形态。(二)鞘翅目桑树害虫鞘翅目桑树害虫种类不多(仅5个科)但为害普遍而严重,往往造成灾害。1.天牛科:为害桑树的天牛有桑天牛,黄量天牛,虎天牛,云斑天牛,黄天牛等,本科的主要特点:触角鞭状特别长,伸向体后,复眼肾形,围绕在鞭状触角基部,附节为隐5节,幼虫钻蛀型。为害:成虫咬食桑树枝皮,产卵于新梢基部6-10CM处,使枝条易被风吹断,幼虫蛀食桑树木质部心材,吃成空洞,常造成桑树缺株。取桑天牛,黄量天牛,虎天年,云斑天牛成虫和幼虫比较体型,体色,前胸背板颜色,形状,有无刺突和鞘翅颜色,斑纹,触角长短等有何差异。2.金龟子科:本科为害桑树的种类有褐金龟(暗黑鳃金龟)、黑绒金龟子(又名东方金龟子,天鹅绒金龟子)、铜绿丽金龟。本科的最大特点是触角鳃叶状,前足为开掘足(可根据胫节外方齿的数目及爪上齿的有无鉴别到种。幼虫蛴螬型。为害:成虫为害,幼虫不为害,成虫咀食桑叶,吃成缺刻,严重时可将整个桑树上的桑叶吃光。取暗黑鳃金龟(褐金龟)、铜绿金龟子、黑绒金龟子观察成虫足、胫节外方齿数和爪上齿的有无及数量,以及幼虫尾端肛门裂缝状及肛门前方刚毛排列方式,进行种的鉴定。3.叶甲科:为害桑树的叶甲科种类有蓝尾叶甲、夏叶虫(鞘翅翠绿、深绿黑褐色等)、桑叶虫(翅蓝色其余为黄色)、蓝叶虫(体蓝色、腹末黄色)。本科的特点是鞘翅有金属反光,触角线状,伸向前方,复眼圆形,靠近前胸(与桑天牛的区别),附节隐5节(与天牛一样)。在四川一般为害较严重的是蓝尾金花虫和夏叶虫。为害:为害桑叶,吃成缺取蓝尾金花虫,夏叶虫,观察其卵,幼虫,蛹、成虫的形态特点,并与夏叶虫成虫进行比较有何异同。4.象甲科:本科为害桑树的种类有桑象虫,桑大象虫,大灰象虫,小灰象等,本科的主要特点是成虫头的一部分延伸如象鼻子或喙管状,故又统称为象鼻虫。咀嚼式口器。生在喙管端部;触角弯曲成膝状,末端三节膨大成锤,体柔软、肥胖,幼虫无足,新月形,称为象虫型幼虫。为害:成虫在春季食害冬芽及萌发后的嫩蕊,有时也吃叶片,叶柄及嫩梢基部,降低发芽率影响春叶产量.取桑象虫,小灰象虫,大象虫,观察体型,体色,鳞有无,头部喙管形状,触角节数,体色,前胸背板的形状,(长、宽、心),纵沟刻纹的特点,以及鞘翅颜色形态、有无后翅等。5.小蠹虫科:本科为害桑树的目前只有桑梢小蠹虫,本科特点是,头小,前胸大,盖着头,为体长的1/3,与翅等宽,触角锤状,前足胫节处有小齿,幼虫象虫型。为害:成虫蛀食桑芽基部及皮层,幼虫在半枯枝皮下作遂道为害。取桑梢小蠹虫的被害枝,(半枯枝),用解剖针拨开皮层,观察其母子坑道(用水冲刷)有无幼虫、蛹、成虫,并在解剖镜下观察其形态。(三)同翅目及其它桑树害虫同翅目桑树害虫都是允吸式害虫,主要有桑白蚧,桑粉虱、桑木虱、桑叶蝉、大青叶蝉、桑虱等。半翅目桑树害虫,只有一个绿盲蝽,主要是棉花害虫,在棉、麻区为害严重。缨翅目桑树害虫主要是桑蓟马。双翅目桑树害虫主要是一些瘿蚊类,如桑橙瘿蚊、桑吸浆虫,桑叶瘿蚊、桑根瘿蚊。直翅目:蝼蛄其它非昆虫纲害虫:蜘蛛:蛛形纲桑树螨类。腹足纲、柄眼目:灰蜗牛1桑白蚧:别名桑盾蚧,又叫桑蚧壳虫、黄点蚧壳虫、树虱。属同翅目、盾蚧科。成虫、若虫成群寄生桑枝干,以针状口器插入桑树内皮吸食汁液严重时整株盖满蚧壳,层层叠叠,不见树皮,被害桑发育不良,此虫殖力大,蔓延快,虫口密度大时,分泌物还易引起桑膏药病,除危害桑外,还危害茶、桃、棉、橄榄、苦楝、山椒、梧桐、丁香、枫、槭、榉、杏、梅、李、苹果、葡萄等树种。主要特点:雌雄异体,雌无翅,梨叶形,大小1.4mm,橙黄色,瘤状触角,头胸愈合,胸喙细长,上有蜡质的笠帽状蚧壳覆盖,白色。雄具有前翅一对,体长0.65mm,橙黄色,后翅退化为平衡棒蚧壳长椭圆形、茧形白色,大小0.65mm,环毛状触角,较长,口器退化,腹末有针状交尾器。取桑白蚧被害忮,用解剖针挑取雌成虫在解剖镜下观察,再取雄成虫和蛹在显微镜下观察,同时取卵和若虫的标本观察。2.桑粉虱:又名白虱、杨梅粉虱。属同翅目粉虱科。气候型间隙爆发昆虫,在一些地区,如浙江,四川,云南,在某些年份,夏秋季暴发成灾,成片栽植桑园、苗圃地更为严重。成虫群集桑树嫩梢产卵,卵孵化后吸食汁液,出现许多小班点,并分泌蜜露污染桑叶,诱发污叶病,拟青霉菌滋生引发灰僵病。主要特点:成虫黄色,翅透明,上覆白粉,前翅1-2条脉,后翅一条脉,头小球形,复眼肾脏形,腹部第一节细,成柄状,一龄若虫扁平,椭圆形,体背有半透明腊质覆盖,触角、足发达,仅一龄爬行活动,2-4龄触角、足退化,固定取食。在四龄蜕皮壳内化蛹。取桑粉虱成虫,幼虫,蛹,观察其特点。在观察中注意蛹壳末端背面或成虫腹末,一凹入孔(皿状孔),皿状孔的形态是分种的依据,桑粉虱皿状孔两侧各有一刺,上具二毛,幼虫和蛹同态,乳白色,半透明,复眼红色,其区别是,幼虫两侧排着36根硬毛,,而蛹具一对鲜红复眼。3.桑木虱:属同翅目,木虱科。在四川一直称为历史性害虫,主要在川北桑柏混栽区为害,桑木虱成虫、若虫均能为害,吸食嫩梢芽叶,使桑叶卷曲,呈“耳朵叶”或筒状叶,蜡丝污染下部桑叶及间作物,易诱发煤病。主要特点:微体昆虫,成虫似蝉,头短阔,触角长,丝状,10节,末节有刚毛两根。复眼红色,半球形。翅长圆形,半透明,从基部发出一条纵脉,到中部分三支,每支又两分叉。前翅有咖啡色斑纹,若虫黄绿色,触角短,腹末有很长的蜡丝。取桑木虱成虫标本,在体视显微镜下观察体色(黄褐),体形、复眼,翅,触角节数及末端刚毛数。再取若虫标本观察体色(淡黄)体形扁型,复眼(红色球形),翅芽(肥大),触角节数(比成虫少)。4.叶蝉类:危害桑树的叶蝉有桑叶蝉、菱纹叶蝉,(凹缘和拟菱纹叶蝉)、大青叶蝉等。均属同翅目、叶蝉科。成虫,若虫均为害,桑叶蝉吸食桑叶汁液,造成叶质老化,大青叶蝉除吸食汁液外,还在枝条上产卵(晚秋),形成无数星月形产卵痕,致使桑树水分大量蒸发,降低抗寒能力。两种菱纹叶蝉,除吸食汁液外,都能传带桑树类菌原体病毒,为典型的媒介昆虫。本科的特点,微小型昆虫,前翅革质,后翅、头部、颊胀大,跗节3节,后足基部横向膨大,刚毛状触角,善跳跃,胫节有刺二列,卵均产于植物组织中。桑叶蝉头顶有两个红斑,前胸两条红斑,前翅散生红线纹,若虫淡绿色,散生黑线纹。取四斑叶蝉(桑叶蝉)成虫、若虫,观察体色、斑纹、触角、头喙以及附节数目。菱纹叶蝉,头部红色或绿色,前胸红褐或单绿。翅:前翅后缘有三角形褐纹,静止时两翅合拢成菱形斑。5.其他桑树害虫(1.)桑蓟马:桑蓟马属缨翅目蓟马科,微型昆虫,以成虫、若虫,锉吸桑叶汁液,造成许多褐色小点,使桑叶老化,夏秋季危害严重。其特点:成虫体细长,淡黄色,两对翅狭长,端部尖锐,边缘有整齐的缨状缘毛,口器锉吸式,单眼成品字型排列,红色,在两复眼间(单眼丁状、角状,其形态是分种的依据,触角6——8节,念珠状,1-2节形成端刺,3-4节上有感觉器,跗节2节,中垫变为可伸缩的泡足,两爪末退化,腹末圆锥形,雌腹面有锯齿状产卵管,产卵管向下弯曲,两侧有齿状突起,若虫与成虫相似,略小,无翅。取桑蓟马成虫、若虫,玻片标本,在显微镜下观察,体形,单眼,触角,缨翅,泡足,雌成虫的锯齿状产卵器。(2)瘿蚊类:为害桑树的瘿蚊有桑橙瘿蚊,桑吸浆虫,叶瘿蚊(黄瘿蚊)、根瘿蚊等,均属双翅目瘿蚊科。桑橙瘿蚊:桑瘿蚊(四川)以幼虫为害桑树嫩芽,使顶芽弯曲。叶瘿蚊:(为害叶片,幼虫在桑叶脉处吸食,刺激寄主形成白色隆起的虫瘿,导致叶片畸形。根瘿蚊:以幼虫集中在幼苗根颈部为害。轻者叶色变黄,重者根腐烂,折断。本科的特点:成虫体纤细,似蚊,触角长,念珠环,毛状(雄),其节数,形态,环毛是分种的依据。桑瘿蚊的触角雌14节,雄26节,哑铃状,有环毛,前翅蜡质,匙形,有四长脉,后翅退化为平衡棒,3~5根翅脉,雌有一条比体长,能伸缩的产卵管。幼虫仿锤形,蛆形,13节,头退化,后端纯,腹部腹板上有Y形剑骨片,是弹跳器官,其形状也是分种的依据。取桑瘿蚊成虫、幼虫标本,在显微镜下观察成虫形态,体色触角形状,节数,环毛,翅形,翅脉,产卵管有无等,然后,取幼虫在显微镜下观察胸部、剑骨片的形态及体形、体色等,并与其它几种瘿蚊标本进行比较,找出形态上的差异。(3)红蜘蛛:为害桑树的叶螨过去统称为红蜘蛛,主要有桑始叶螨、神泽叶螨、朱砂叶螨(红叶螨)、二斑叶螨(棉叶螨)、柑橘全爪螨、侧多食跗线螨(荼黄蜘蛛)。前五种属叶螨科,后一种属跗线螨科。为害:成螨、幼螨、若螨均在叶背取食汁液,沿叶脉为害,被害后并在叶面出现红斑,严重时全叶红褐枯焦,不能饲蚕,远观如火烧状。螨类的共同特点,与昆虫纲的区别是成虫分段不明显,无翅,四对足,其发育经过为卵-幼螨(三对足)-若螨(四对足)-成螨。体椭圆形,由四个段组成。腭体段相当于头部,由口器和一对触须组成。前肢体段,指前面两对足的部分,末体段相当于腹部,有肛门和生殖孔。无翅,无复眼,刺吸式口器,体背体毛排列有序,雌26根,雄28根。先取桑始叶螨被害叶,观察被害状,在显微镜下观察各虫态(卵:球形,淡黄色,幼螨:柠檬色,三对足,若螨:淡黄色4对足,成虫淡黄绿色、暗绿色污斑)。再挑取桑始叶螨在显微镜下观察体背毛序。(4)蝼蛄、蜗牛:为害桑树的蝼蛄属直翅目蝼蛄科,成虫、若虫咬食幼苗、嫩茎或刚播下的种子,还在表土内穿行,形成纵横的隧道,使幼苗根脱离表土而枯死。形态特点:全体成仿锤形,前足为开掘足,前翅短,鳞片状,覆盖于腹部一半,后翅扇形,折叠前翅下,有一对较长的尾须。若虫近似成虫,但无翅,腹肥大,色浅,随着龄期增长,色逐渐加深。灰蜗牛:俗名:蜓蚰螺、蜓蜓螺。属软体动物门腹足纲、柄眼目蜗牛科。春季食害桑树芽叶,初孵幼虫取食叶肉,留一层表皮,稍长后,食成缺刻或孔洞。蜗牛爬过的地方留有白色胶质痕迹及粪便,使叶质降低。形态特点:成体整个身体在贝壳内,贝壳椭圆形,壳顶尖(在体的右侧)自左向右旋转,有的壳上还有不规则的深灰色斑纹。体仿锤形,头部有两对触角,前触角较短,后触角较长,端部有眼。生殖孔在头部右后下侧,呼吸孔在体背中央右侧与贝壳连接处,稍后方即为排泄孔。卵:圆球形,乳白色,有光泽,通常10~20粒以上粘集,成卵堆。幼体:初孵1mm,贝壳淡褐色,一个月后贝壳右旋增大,6个月后贝壳增加4.5~5旋,食量显著增加,7~8个月之后变为成体,贝壳达5.5~6旋。取蝼蛄、蜗牛标本,观察。四作业1.列表说明桑毛虫、桑螟、野蚕、桑尺蠖的的形态特征。2.列表说明天牛,金龟子,叶甲,象虫等触角,幼虫类型,以及口器,复眼形态。3.绘桑天牛,兰尾叶甲,桑象虫,金龟子成虫,幼虫形态图。4.列表说明桑瘿蚊、桑蓟马、桑粉虱的形态特征。实验六桑树病虫标本采集与制作一.实验目的病虫标本是病、虫性状及分布的永久记载,采集、整理、保存质量优良的病、虫标本,对教学、科研、科普宣传、经验交流等都具有重要意义。通过实验,进一步认识和熟悉病虫,掌握病虫标本采集与制作的基本技术。二.实验材料及用具1.材料;普通防腐浸渍液、保色标本浸渍液、酒精、冰醋酸、甲醛、醋酸铜、亚硫酸、樟脑丸、蜂蜡、松香。2.用具:毒瓶、捕虫网、采集箱、标本夹、麻绳、草纸、标本采集记录本、放大镜、铅笔、塑料袋、大小试管、吸水纸、三角纸袋、标签、标本瓶、二重皿、载玻片、盖玻片、昆虫针、展翅板、解剖针、镊子、解剖刀、解剖镜、酒精灯、玻璃缸、电炉、桑刀、桑剪、铲子。三.实验内容及作法1.病虫标本的采集和制作:(1)采集;采集前做好用具及药剂的准备工作。采集中注意:①桑树病虫害标本主要有病根、茎、叶、椹等,要采集典型的,具有代表性的标本,要有各受害部位在不同时期的典型症状,采集数量不宜太少,真菌病害上应有子实体更好。②能产生子实体的真菌病害,应注意采集老叶,(因为老叶上病菌子实体比较成熟),许多真菌的有性阶段只有在枯死的枝叶上出现,而无性阶段大多在活体中可以找到,病毒病害应尽量采集顶梢和嫩叶。③如对病害还不是很熟悉,采集病株和健株进行比较。④每种标本采集的数量不能太少,在制作和鉴定过程中常有损失,并且多余的标本可以交流。⑤应严加选择,每一标本上的病害种类力求单纯,即每一标本只有一种病害。⑥不同种类的病害标本,严禁混放在一起,必须分别包装妥放,以免病原混杂,影响鉴定。⑦采集时对每种标本均需作记录,随即编号初步整理。对于病叶、病梢易枯萎的标本,要随采随压,病根、茎、枝可放入采集箱带回整理。⑧标本采回后,应及时处理,不能久放。(2)蜡叶标本的制作:边采边压,带回室内后,立即进行整理,使叶片平整,新梢上枝叶排列有序,干燥越快,越能保持标本原色,因此,注意未干的标本要勤换纸,特别是最初几天,每天1次,稍干后可隔2~3天换一次。(3)浸渍标本的制作:病根、茎、枝、椹等可制成浸渍标本保存,浸渍标本保存占的面积较大,保存的时间有限,浸渍标本多用于展览、教学示范等。浸渍前用清水轻轻洗去泥沙,脏物、并进行适当修剪,即可投入浸渍液中。浸渍液种类繁多,有专门防腐用的,亦有保持标本原色的,可根据需要选择。下面介绍几种标本浸渍液配方:①一般防腐浸渍液:福尔马林50ml95%酒精300ml蒸馏水2000ml亦可单用5%福尔马林或75%酒精②保色标本浸渍液绿色:硫酸铜及亚硫酸浸渍液:将标本浸于5%硫酸铜溶液6-24小时,或更长,待标本全部转至本色为上,即可取出,用清水漂洗4-5小时,然后保存于亚硫酸液中,(亚硫酸液可用浓硫酸20ML,加水1000ML稀释,然后加亚硫酸钠16g,配好的溶液可以贮存,此法用于保存桑叶,青椹效果较好.但要注意亚硫酸易挥发,须注意密封并口,必要时每年换一次亚硫酸浸渍液.醋酸铜浸渍液此液保存效果较好,特点是保存的标本色泽稍有些偏兰和须要煮过.方法是将醋酸铜结晶逐步加在50%的醋酸溶液中,直至饱和为止.将原液稀释3-4倍使用.稀释度因标本色泽深浅有不同,浅色宜稀,深色可稍浓.将稀释液煮沸,放入标本,继续加热,标本的绿色开始退却,经3-4分钟绿色又恢复,至接近标本原色为止,取出用清水洗净,保存于5%的福尔马林溶液中,也可压制成干燥标本.黄色,桔红色标本浸渍液保持果实的红黄色,可用亚硫酸溶液,方法是将含5-6%.SO2的亚硫酸配成4-10%水溶液(含S020.2-0.5%)作浸渍液,将要保存的标本放入其中,为增强防腐作用,可加少量酒精,果实浸渍若发生崩裂可加少量甘油.真菌色素保存液:真菌色素不溶于水的,可用硫酸锌,福尔马林浸渍液保存,用此液保存时,标本要新鲜,直接浸渍保存在原液中.硫酸锌福尔马林浸渍液:硫酸锌25g福尔马林10ML水1000ML真菌色素溶于水的可用下述浸渍液保存,其原理是利用其中的醋酸铅沉淀花青素.标本洗净后,保存原液中,中性醋酸铅10g冰醋酸10ml醋酸汞1g95%酒精1000ml2.昆虫标本的采集与制作(1)主要用具的制作与使用①捕虫网:是捕捉飞行性昆虫最常用的工具,用纱布或白布作成,捕虫网圈经为32cm,用粗铁丝作口径,袋长66cm,袋宽10cm,柄长100-150cm,制作时,将纱布或白布剪成四块如图,缝合即成.②毒瓶:用于捕捉的害虫杀生用.毒瓶制作方法是选择250~500ml的磨口瓶,在瓶底放一层氰化钾,约1cm厚,压紧,上放1.5cm厚的木屑,压实,木梢上再放一层熟石灰,上放一层滤纸或软纸片.用滴管或毛笔滴几滴水于滤纸上,使所有的石灰都吸足水,但不宜过量,几小时后,石膏结块即可使用.瓶内还可以放一些松软的纸条,以免昆虫在瓶内相互碰撞.毒瓶内的氰化钾剧毒,开盖时注意吸入中毒.昆虫在毒瓶中死亡后,取出,以免昆虫体躯发黑或变硬.临用时毒瓶内也可以用绵花蘸少许敌敌畏于瓶底,上垫纸片隔开.③酒精瓶:用标本瓶或试管内盛75%酒精,保存幼虫、小甲虫或虫卵。④铁盒:内放与盒等大的纸片,将杀死的昆虫投入其中保存。⑤三角纸包:用以暂时保存蛾、蝶类,一般用坚韧的表面光滑的吸水纸制成。⑥试管或小瓶:用来装放各种活的或已毒死的小虫、卵。⑦采集袋:用来装放外出采集时必须带的工具,⑧活虫采集器:用来装放需要带回饲养的活虫,⑨昆虫针:用以固定虫体位置,作针刺标本用。昆虫针有粗细7种,即:1,2,3,4,5,0,00号,以5号最粗00最细,此外倘仅有12MM长的微针,以1,2,3,4号最为常用。⑩三级板(刺虫台):用以固定针刺昆虫的高度,一般分三级,每级高度0.80M,每级中央有一小孔,制作时可将插了虫的针倒过来,放在三级台的第一级小孔中,使虫背紧贴台面,其上部留针的长度便是8MM。⑾展翅板:是用较软的木材制成长约1尺,两边的木条宽三寸,略向内倾斜,其中一条可以活动,以调节板间缝隙宽度。两板间沟槽装软木条,展翅时,把已插在软木上,使虫体背面与两侧木板平行,并调节活动的木板,使宽度与虫体接近,然后用小号昆虫针,插在较粗的翅脉上,将左右前翅向前拉。鳞翅目以两前翅后缘呈一直线为准。蜻蜓目、脉翅目以后翅前缘呈一直线为准,前翅后缘稍向前倾,蝇类、蜂类以前翅的尖端与头相齐为准,把前翅暂时固定在展翅板上,再拉两后翅到前缘,压在前翅下面,左右对称,充分展平。最后以光滑的纸条或塑料膜条压住,以大头针固定,放于干燥处,干燥后再取下装盒。⑿幼虫吹胀器:主要用于制幼虫标本。吹胀器可分两部分:一为幼虫吹胀器,一为幼虫干燥器,干燥器的制作是用铁棍作好一个架子,上面放一个洋灯罩,为了防止虫烤焦,可在灯罩内放些干砂,下放一酒精灯加热。吹胀器也可自己制作,即将一根玻管在酒精灯上烧红后慢慢拉长成细管,然后折断,在管子的一端装一个橡皮管,再在玻管的适当位置上装一个厚铁皮夹便可使用。(2)昆虫的采集方法:首先要掌握昆虫的习性,了解昆虫最喜欢栖息的场所,分不同昆虫对象采用不同的采集方。网捕、振落,灯光诱集,或用手捕捉,用试管或指形管套捉等。采集的昆虫,立即放入毒瓶杀生,杀死后随即取出,幼虫或小甲虫可投入浸渍液中,蛾、蝶类可放入三角纸包,成虫稚虫,若虫也可放入密闭的标本盒中保存。方法是:在盒底铺一层平整的棉花,将虫放在棉花上,其上再放一层纸,以记录采集情况,一层放好后,再铺一层棉花,棉花上再放一层虫,直到标本盒放满为止。带回室内整理,并放干燥环境保存,以免发霉。(3)昆虫标本的制作:①针刺标本的制作:此法用以制成虫标本。其方法是以昆虫针直接插入昆虫(成虫)胸部的方法,插针应在虫体未变硬时进行,已变硬的昆虫须软花后再插,否则不易插进,易碎。插入部位,因虫而定,一般半翅目从中胸小盾片中央垂直插入,鞘翅目从右翅鞘基部,鳞翅目和膜翅目从中胸中央插入,直翅目从前胸背板右面插入,鳞翅目针刺后,并将四翅展于展翅板上,膜翅目及其它细腰昆虫,针插后,须用硬纸或针使腹部与胸部成一直线,待全干后方能除去。微小昆虫如粉虱,叶蝉,寄生蜂类,可用垂插法与三角纸点胶法来制作。重插法是先用微针(00号)从虫的腹面插入固定在一块长方形小软木上,再按其它昆虫针插法,将软木片插在普通的昆虫针上,三角纸点胶法是将特制的三角纸(用较好的硬纸或用旧照相胶片洗净后,因其透明比纸更好)插在昆虫针上,其尖端粘少许万能胶,贴在虫体的前足与中足间。针插标本要注意插针一定要与虫体垂直。昆虫在虫针上要有一定的高度,一般应是从针尖末端到虫体背面的距离等于三级台第一级(8MM),每一虫针上应有标签,注明采集日期,地点,采集人,昆虫学各,中名等。虫针作好后插在软木板上,放于干燥器内干燥,待彻底干燥后,将软木板连虫针放于标本盒内。②昆虫浸渍标本的制作:一般昆虫卵,幼虫,身体柔软或细小的成虫,蛹等多作成浸渍标本保存。采集幼虫标本,首先饿1~2天,让体内粪便排完,再放在开水中煮至虫体硬直为止.体大皮厚的需煮5~10min,小而软的幼虫煮2~3min,未经煮过的标本,放入保存液后虫体易收缩变形.煮好后立即投入标本瓶保存液中,但体大的虫子,虫体含水多,浸泡后要更换几次浸渍液,才能永久保存.身体柔嫩或体躯细小的昆虫成虫或卵、幼虫、蛹多用保存液浸在试管中。浸渍液种类很多,主要的介绍如下:酒精浸渍液:75%酒精+0.1~1%甘油.可浸渍一般标本.FAA:冰醋酸5ml+福尔马林5ml+酒精90ml,最常用,效果好.保色标本浸渍液:一般保色标本浸渍液:白糖5g+冰醋酸5ml+福尔马林4ml+酒精6ml+蒸馏水100ml。此液保存标本不收缩,不变黑,浸渍液不沉淀,对保存绿色、黄色红色幼虫有一定效果,但对多种绿色幼虫效果较差。绿色幼虫浸渍液:硫酸铜10g+蒸馏水1000ml,将此液煮沸后投入绿色幼虫,煮时开始退去原色,后恢复到原来色彩,即取出用清水洗净,浸入5%福尔马林溶液中。黄色幼虫浸渍液:无水酒精6ml+冰醋酸1ml+氯仿3ml,先用此液浸24h,再移入75%酒精中保存。红色幼虫浸渍液:硼砂2g+50%酒精10ml,将幼虫直接投入保存。(4)病虫标本的保存:已作好的病虫标本,应按病虫分类
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