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文档简介

微生物生长测定技术第一页,共十页,编辑于2023年,星期二微生物的生长繁殖微生物在适宜的环境条件下,不断地吸收营养物质,并按照自己的代谢方式进行代谢活动,如果同化作用大于异化作用,则细胞质的量不断增加,体积得以加大,于是表现为生长。简单地说,生长就是有机体的细胞组分与结构在量方面的增加。单细胞微生物如细菌,生长往往伴随着细胞数目的增加。当细胞增长到一定程度时,就以二分裂方式,形成两个基本相似的子细胞,子细胞又重复以上过程。在单细胞微生物中,由于细胞分裂而引起的个体数目的增加,称为繁殖。在一般情况下,当环境条件适合,生长与繁殖始终是交替进行的。从生长到繁殖是一个由量变到质变的过程,这个过程就是发育。第二页,共十页,编辑于2023年,星期二大肠杆菌在琼脂上的生长金色葡萄球菌在琼脂上的生长第三页,共十页,编辑于2023年,星期二I:适应期II:对数期III:稳定期IV:衰亡期细菌的生长曲线图第四页,共十页,编辑于2023年,星期二生长四阶段(1)适应期:少量细菌接种到新鲜培养基后,在开始一段时间,细菌数几乎保持不变,甚至稍有减少。处于延迟期细菌细胞的特点是分裂迟缓、代谢活跃。(2)对数期:对数期又称指数期。这一阶段突出特点是细菌数以几何级数增加,代时稳定,细菌数目的增加与原生质总量的增加,与菌液混浊度的增加均呈正相关性。(3)稳定期:又称恒定期或最高生长期。处于稳定期的微生物,新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等,此时生长速度又逐渐趋向零。(4)衰亡期:稳定期后如再继续培养,细菌死亡率逐渐增加,以致死亡数大大超过新生数,群体中活菌数目急剧下降,出现了“负生长”,此阶段叫衰亡期。第五页,共十页,编辑于2023年,星期二测定方法一:测生长量1.测体积2.称重法3.比浊发4.含氮测定法5.测含碳量6.其他二:计繁殖法1.显微镜直接计数法2.平板计数法3.薄膜过滤计数法第六页,共十页,编辑于2023年,星期二

血球计数板,通常是一块特制的载玻片,其上有四条槽构成三个平板,中间的平台又被一短横槽隔成两半,每一个平台上都刻有一个方格网,每个方格网共分九个大方格,中间的大方格即为计数室,微生物的计数就在技术室中进行。第七页,共十页,编辑于2023年,星期二血球计数板的使用1.镜检计数室。在加样前先对计数板的计数室进行镜检。若有污物则需清洗,吹干后才能进行计数。2.加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片。用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液,滴于盖玻片边缘让培养液自行缓缓渗入一次性充满计数室,防止产生气泡。充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去。3.计数。稍待片刻(约5min)待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后,将计数板放在载物台的中央,先在低倍镜下找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并记录。第八页,共十页,编辑于2023年,星期二进行微生物生长测定,可以更好的掌握微生物的生长特性和特点,在食品药品等行业具有重要意义。可

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