科迪亚E6E7讲义课件

浅谈临床对ASC-US病人的管理

-----子宫颈癌E6/E7癌基因筛查

2014.06.16目录

病例分析1

E6/E7mRNA检测意义2

临床管理3病例分析1----30岁已婚女性2013.12.3体检：

E6/E7mRNA(+)低度风险未进行干预性治疗，3个月复查2014.3.25细胞学：ASC-US

E6/E7mRNA(+)高度风险术后病检结果：宫颈1点、6点慢性宫颈炎，部分区域呈湿疣性改变；12点处小灶区域CIN2LEEP病例分析2------50岁已婚女性2007年前绝经，后无阴道异常排液、出血及白带中带血等不适，就诊前10天无诱因出现阴道出血，量少（每天护垫一张），色鲜红，有异味。2013.12.9门诊细胞学及B超检查，同时病人自行口服妇炎康胶囊。2天后，出血少但仍腰骶部疼痛，无尿频、排尿困难、畏寒、发热等症状。细胞学检查ASC-H,E6/E7mRNA(+)高风险，B超结果示子宫内膜厚0.6cm

行子宫+双附件+盆腔淋巴结切除术术后病检结果：宫颈非角化鳞状细胞癌，癌灶环状累及宫颈1/2周（癌灶最大径约2.5cm），间质浸润深约0.8cm，水平扩散约2cm，可见脉管癌栓；萎缩性子宫内膜。阴道断端部分区域VINⅡ～Ⅲ；病例分析小结2例ASC细胞学结果的病人，都在接受干预性手术前筛查过癌基因E6/E7mRNA检测，及早的发现了癌前病变。我们乐见病人的细胞学筛查管理又多了一个高特异性的分流手段，通过进一步的筛查确认，尽量采取保守的干预治疗手段，从而大大提高了患者的生活质量。目录

E6/E7mRNA检测意义2

病例分析1

临床管理3E6/E7mRNA是癌基因致癌活动的必由之路E6/E7癌蛋白:外源性高危HPV病毒核酸片段插入正常人类基因组引入的癌蛋白；E6蛋白能与人体自身抑癌蛋白P53结合，而E7癌蛋白能与另一种人体抑癌蛋白Rb结合，二者综合作用导致细胞分裂机制的破坏，进而引起宫颈基底层细胞无限制恶性增生HPV致癌过程图示：E6/E7mRNA是癌基因活跃的直接产物E6/E7癌蛋白诱使细胞转化HPVDNA检测DNA预示着HPV病毒的存在E6/E7mRNA检测E6/E7mRNA预示着HPV癌基因的活跃程度E6/E7mRNA检测：提示病毒癌基因转录表达情况。评估宫颈癌变的风险与发展趋势；明确锁定关键风险因素：活跃的HPV癌基因E6/E7mRNA检测意义HPVE6/E7mRNA在宫颈组织中表现癌基因活性，是宫颈癌变开始和进展的必要条件。E6/E7癌基因E6/E7mRNA筛查对于常规细胞学束手无策的ASC-US病人拥有更高的特异性检出率。E6/E7mRNA与子宫颈癌癌前病变程度呈正相关。E6/E7mRNA检测意义E6/E7癌基因筛查：相较于液基细胞学筛查又积极了一些，相比于HPVDNA检测，E6/E7mRNA癌基因检测又更为保守一些。感染了HPV并不一定会患宫颈癌：E6/E7mRNA大大削减了女性患者在接受治疗时的心理压力。我院1-4月份门诊数据分析共1629例进行E6/E7mRNA检测，30岁以下的女性有691例，占总量的42.4%。共59例进行了组织学诊断，其中细胞学ASCUS女性有10例，占总量的16.9%。细胞学ASCUS的10例患者：

30岁以下的女性有5例；

HPVE6/E7mRNA检测阳性的有9例。细胞学ASCUS且E6/E7mRNA（+）的9例：

CIN1的女性有3例，CIN2+的女性有2例，鳞状细胞癌的女性有1例。病例所用E6/E7mRNA检测介绍HPV癌基因E6/E7mRNA检测试剂盒（宫颈稳态检测试剂盒）检测靶标：WHO公布的14种高危HPV的癌基因E6/E7的转录产物-E6/E7mRNA。检测技术：分支链DNA(b-DNA)德国西门子的核心专利技术；

无需检测靶标的扩增，而是对检测信号进行放大。Amplificationcalculation:amplifierno.(6,20)xlabelprobeno.(4;20)xtreeno.(3;6-8)实验原理（分支链DNA技术,branchedDNA,bDNA)

检测优势：

1、无需PCR实验室,可做分子检测实验。2、检测准确：无需靶标的提取、纯化、反转录、扩增，特异性探针捕获靶序列后，仅进行信号级联放大，检测更准确。3、操作相对简单：细胞裂解后，直接加入探针，进行靶标捕获、信号放大后，通过仪器读取数据。4、检测标本多样：细胞样本（单独取样、TCT剩余标本等）组织样本（石蜡切片、新鲜组织等）。5、临床使用范围广：可用于宫颈癌变的早期筛查、辅助诊断、术后随访。病例所用E6/E7mRNA检测介绍ASCUS/LSIL随访中被诊断为CIN2+的可能性:E6/E7mRNA(+)是E6/E7mRNA(-)的69.8倍DNA(+)是DNA(-)的5.7倍。

E6/E7mRNA检测具有较高的预测功能细胞内E6/E7mRNA量化，与巴氏细胞学相比，可以更好的预测CIN2+病变结论指出E6/E7mRNA定量，可以有效地对ASC-US/LSIL进行分流，包括30岁以下女性。E6/E7mRNA检测有效对细胞学筛查分流E6/E7mRNA检测有效对细胞学筛查分流用HPVRNA和DNA检测预测CIN2+:对巴氏筛查为ASCUS或LSIL的那行进行2年跟踪随访本文显示HPV

RNA检测与DNA检测（PCR）相比，敏感度相当，特异性较高。为ASCUS或LSIL的分流提供一种改进方法。E6/E7mRNA检测的其它意义有文献研究E6/E7mRNA检测在以下几方面的意义：与组织学检测联合，辅助诊断；与细胞学检测联合，辅助治疗；用于年轻女性；用于术后随访。在组织学鉴定结果为CIN1或阴道镜检查为阴性的妇女中，HPVmRNA检测的预后价值：随访研究结论：在组织学阴性，高危型-HPVDNA阳性妇女，尤其是为了降低后续随访强度，E6/E7mRNA的过量表达检测是一个很好的候选物。E6/E7mRNA检测辅助治疗女性轻度宫颈病变分流：数据表明E6E7mRNA检测是一种“检测和治疗”方法。结论：40岁以上女性，若E6/E7mRNA阳性结果或有相应的病变直接治疗的好处：减少随访次数、成本，和不必要的心里负担等。E6/E7mRNA检测辅助治疗E6/E7mRNA用于年轻女性HPV在年轻女性中感染率高、表达率相对低。仅仅是感染趋势。E6/E7-mRNA已经被证明作为未来疾病进展可能指标！DetectionofResidual/RecurrentCervicalDiseaseafterSuccessfulLEEPConization:thePossibleRoleofmRNA-HPVTest.

Leep锥切术成功后检测剩余/复发的宫颈疾病：mRNAHPV检测可能发挥的作用。14%-70%的阳性切缘患者5-15%的干净切缘患者存在复发宫颈疾病的风险。E6/E7mRNA检测用于年轻女性治疗后检测残留/复发宫颈病变时：E6/E7mRNA检测具有较高的特异性和阳性预测值E6/E7mRNA检测用于年轻女性目录

病例分析1

E6/E7mRNA检测意义2

临床管理3

对应2013版NCCN宫颈癌筛查指南，30岁以下的女性中，HPV感染率很高，同时自主清除率也很高——不建议这一部分人群中进行HPVDNA检测。近年来随着初次性生活年龄的提前化，HPV感染有低龄化的趋势。我院今年1-4月门诊就诊并进行HPVE6/E7癌基因筛查的1629例女性，30岁以下女性有691例，约占42.4%。重视30岁以下女性的宫颈安全！

HPVDNA负荷量较活跃，假阳性筛出率比较大，容易造成误诊或过诊过治。液基细胞学筛查还是一种相对保守的癌前病变筛查方式，但仍然会对一些容易忽略的ASC-US人群束手无策。

E6/E7mRNA检测，筛查出感染HPV且癌基因已经转录的患者。较高的特异性和阳性预测值，找出真正的癌变高风险者。E6/E7mRNA检测用于30岁以下女性宫颈管粘膜褶皱、宫颈腺体隐窝形成的复杂结构是导致临床漏诊的陷阱之一，由于漏诊陷阱，重视ASC-US诊断、分流显得愈加重要。每年有很多女性被诊断为宫颈细胞学异常，如ASC-US。多数异常会不治而愈，太过积极地治疗既不合理也不必要。较多的宫颈癌前病变和宫颈癌症患者，在早期被诊断为不确定或轻度细胞学异常,——宫颈细胞异常是不能被忽视的，尤其是ASC-US。ASCUS人群的管理E6/E7mRNA检测用于ASC-US女性可提前预估个体罹患宫颈癌风险；可验证细胞学的结果；可降低漏检，减少过度诊断治疗；可预测病变趋势。。E6、E7mRNA检测——筛出真正具有致癌风险者，提高筛查管理效率！小结

我们应该认识到子宫颈癌的疾病转化并不是一蹴而就的，这是一场病毒感染与人体免疫力之间的拉锯战；目前，从筛检性价比以及医师的认可度上来讲，细胞学筛查还是一种不可替代的常规筛查方式，因而，