艾滋病梅毒和乙肝实验室检测实用版课件

艾滋病梅毒和乙肝实验室检测文档梅毒的实验室检测梅毒筛查检测筛查检测用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染梅毒：梅毒血清学检测筛查检测应具有较高的灵敏度和特异度操作简单、容易获得、便宜尽可能在“当日”获得结果3筛查检测何时使用何种检测？梅毒检测方法非梅毒螺旋体抗原血清学试验（RPR或TRUST检测）梅毒螺旋体抗原血清学试验（TPPA、ELISA或梅毒快速检测）检测时间第一次产检（孕早期）或下一次产检时如有必要，孕晚期再次检测此前无检测结果，则在分娩时检测梅毒血清学试验基本实验室设备检方法检测样本类型必要设备血清血浆全血RPR/TRUST√√水平旋转仪TPPA√√震荡仪ELISA√√酶标仪、洗板机POCT检测√√√无需特殊设备血清学试验检测梅毒感染相关抗体

非梅毒螺旋体抗原血清学试验（检测非特异性抗体）RPR（快速血浆反应素环状卡片试验）TRUST（甲苯胺红不加热血清试验）VDRL（性病研究实验室试验）梅毒螺旋体抗原血清学试验（检测特异性梅毒螺旋体抗体）TPPA（梅毒螺旋体颗粒凝集试验）ELISA（酶联免疫吸附试验）POC（快速检测、一站式检测）梅毒诊断检测梅毒早期诊断的依据之一是病原学检测，即在组织或分泌物中检测到苍白螺旋体：暗视野显微镜镀银染色镜检梅毒诊断检测7非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体感染可产生非特异性抗体（非梅毒螺旋体抗体）非梅毒螺旋体抗体又称之为反应素，是抗心磷脂等抗原的抗体随菌体和宿主细胞的类脂质抗原量升高除梅毒外，其他医学情况会造成非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性结果，包括结核、疟疾、妊娠和风湿关节炎、狼疮及硬皮病等自体免疫学疾病非梅毒螺旋体抗原血清学试验的特点非梅毒螺旋体抗原血清学试验：快速、简便、便宜敏感性和特异性较高硬下疳后1-2周变为阳性可用于筛查样本评估对治疗的反应鉴别复燃还是再次感染9确保非梅毒螺旋体抗原血清学试验

质量的关键点按照标准操作程序（SOPs）进行操作推荐使用评价特性较好的试剂*按照统一的标准报告结果开展实验室质控（QC）和参加室间能力验证（PT）*由中国疾病预防控制中心性病中心国家参比实验室提供非梅毒螺旋体抗原血清学试验抗体滴度通常与疾病活动度有关。治疗后（可能几个月）非梅毒螺旋体抗原血清学试验通常转变为不反应如果用同一种实验，相同试验滴度4倍变化（如从1:16下降到1:4或从1:8上升到1:32）为临床显著变化有些病人，抗体滴度可始终处于较低水平，有时可持续终生（血清固定）注意：病人血清学监测应在同一个实验室使用同一种检测方法（RPR、TRUST）进行连续多次检测；RPR和TRUST方法均有效，但检测的滴度结果不能直接进行比较11治疗后非梅毒螺旋体抗原血清学试验

抗体滴度变化的临床意义一期梅毒和二期梅毒：成功治疗，抗体滴度应3个月后下降2倍6个月后下降4倍一期梅毒：1年后抗体滴度转阴二期梅毒：2年后抗体滴度转阴晚期梅毒：治疗后抗体滴度缓慢下降50%的病人2年后抗体滴度仍为阳性梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒螺旋体抗原特异性抗体可用于确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果，排除其假阳性阳性结果可持续存在，即使治疗后仍可为阳性。*梅毒螺旋体抗原血清学试验与疾病的活动度无关，不能用于鉴别现症感染还是既往感染，也不能用于判断疗效*一期梅毒治疗病人中，15%-25%可在2-3年后转为血清学阴性妊娠期梅毒检测所有孕产妇应进行梅毒筛查检测：孕期尽早（如果可能，在孕早期时）以及如果在分娩前/临产时没有筛查检测结果，在分娩时检测筛查检测可应用以下任何一类方法：非梅毒螺旋体抗原血清学试验（滴度）或梅毒螺旋体抗原血清学试验所有筛查检测结果阳性的孕产妇都应用另外一类检测方法进行复检确认是否为现症梅毒所有产妇及所生婴儿出院前，产妇梅毒检测结果都应记录在病历中，以确保需要时给予治疗孕产妇梅毒检测流程非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验孕产妇治疗后，随访监测非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验每3个月进行非梅毒螺旋体抗原血清学试验如果需要进行治疗报告：非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性报告：两种检测均阳性治疗病人报告：

梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性报告：非梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性报告：梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性阳性反应阴性反应阴性反应阳性反应阳性反应或阴性反应阳性反应阴性反应阳性反应15HIV感染病人的梅毒血清学试验一些HIV感染病人，其梅毒血清学试验结果不典型，包括滴度超常高或超常低滴度不断变动如果临床表现提示早期梅毒，而血清学试验结果与此不一致，考虑病灶活检或暗视野显微镜检查注意：对于大多数HIV感染病人而言，梅毒血清学试验是诊断梅毒感染、随访观察疗效准确、可靠的检测方法母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度水平的比较先天梅毒的诊断复杂，应根据：或者受检者已经感染了HIV，但处于窗口期：3个月后检测结果阴性的婴儿接受母乳喂养，必须在停止母乳喂养后6周再次进行PCR检测，以确保婴儿没有在母乳喂养期间感染HIV。CD4+T淋巴细胞计数PCR（多聚酶连反应法）检测梅毒血清学检测结果的解释对调整抗病毒治疗方案提供指导筛查检测可应用以下任何一类方法：满18月龄（必要时，见HIV抗体检测流程）孕期尽早（如果可能，在孕早期时）以及有些病人，抗体滴度可始终处于较低水平，有时可持续终生（血清固定）应用梅毒血清学试验进行梅毒筛查PI类药物可致血糖升高孕期每3个月及产后4–6周应进行CD4+T淋巴细胞检测急性感染时可适当推迟检测，(因为在急性感染期，CD4+T淋巴评估是否需要抗病毒治疗检测梅毒螺旋体抗原特异性抗体满18月龄（必要时，见HIV抗体检测流程）一期梅毒：1年后抗体滴度转阴监测对抗病毒治疗的反应梅毒血清学检测结果的解释非梅毒螺旋体试验梅毒螺旋体试验临床参考意义+-RPR假阳性–考虑其他医学状况*+

+现症梅毒-

+既往感染或极早期梅毒-

-排除梅毒感染由于免疫缺陷，也可发生于艾滋病晚期*包括结核、疟疾、风湿性关节炎或妊娠。暴露婴儿的梅毒检测18梅毒暴露婴儿先天梅毒检测母体非梅毒螺旋体和梅毒螺旋体IgG抗体可通过胎盘，所以应谨慎地对婴儿梅毒血清学试验结果进行解释婴儿需要接受预防性治疗还是规范的抗梅毒治疗应根据：母亲确诊梅毒感染母亲治疗情况婴儿梅毒感染的临床表现、实验室或放射线检查结果母亲及婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度水平的比较（尽可能在同一个实验室使用相同的试验方法）19先天梅毒的诊断先天梅毒的诊断标准：梅毒暴露婴儿具有以下条件之一：任何先天梅毒临床表现暗视野显微镜检梅毒螺旋体阳性（+）梅毒螺旋体IgM抗体阳性*RPR/TRUST检测阳性，滴度比母亲分娩前最近一次滴度高4倍及以上RPR/TRUST监测随访中，任何一次滴度不下降或反而上升满18月龄后，TPPA检测阳性*IgM抗体反映近期感染，可帮助鉴别婴儿先天梅毒，但我国尚不能广泛开展20梅毒暴露婴儿的评估梅毒暴露婴儿：婴儿RPR检测婴儿RPR检测不能使用脐带血，因其易被母体血液污染，从而出现假阳性结果检查先天梅毒临床表现：非免疫性水肿、黄疸、肝脾大、鼻炎、皮疹、末端肢体假性麻痹对可疑病灶或体液进行暗视野显微镜检查21先天梅毒检测流程婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量检测梅毒暴露婴儿母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量检测（应同时进行梅毒螺旋体抗原血清学试验，用于随访诊断）组织或分泌物暗视野显微镜检，有条件进行IgM抗体检测报告母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测滴度水平报告婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测滴度水平报告暗视野显微镜检或IgM抗体检测结果阳性阴性或没有梅毒感染的症状有梅毒感染的症状梅毒早期梅毒诊断可根据在组织或分泌物样本中通过显微检测到苍白螺旋体而诊断应用梅毒血清学试验进行梅毒筛查非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒感染过程中产生的非特异抗体。滴度通常与疾病的活动度有关，因此可用于监测对治疗的反应梅毒螺旋体抗原血清学试验检测对抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体，可用于确认临床诊断或非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果，可反映任何阶段的梅毒暴露先天梅毒的诊断复杂，应根据：母亲梅毒感染状态母亲梅毒治疗情况婴儿梅毒感染的临床表现、实验室或X线检查结果母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度水平的比较随访HIV和HBV的实验室检测HIV和HBV筛查检测筛查检测用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染HIV和HBVHIV抗体检测乙肝表面抗原（HBsAg）检测筛查检测应具有较高的灵敏度和特异度操作简单、容易获得、便宜尽可能在“当日”获得结果何时使用何种检测？HIVHBV检测方法

HIV快速检测和/或ELISA

HBsAg检测如果有条件，其他乙肝标记物检测检测时间第一次产检（孕早期）或下一次产检时此前未检测，分娩时应检测第一次产检（孕早期）或下一次产检时此前未检测，分娩时应检测梅毒螺旋体抗原血清学试验与疾病的活动度无关，不能用于鉴别现症感染还是既往感染，也不能用于判断疗效按照标准操作程序（SOPs）进行操作细胞通常会下降）非梅毒螺旋体抗原血清学试验HIV筛查检测结果的含义尽快再次采血再次进行DNA-PCR检测CD4+T淋巴细胞检测梅毒螺旋体IgM抗体阳性*尽快再次采血再次进行DNA-PCR检测和/或ELISA细胞通常会下降）此前未检测，分娩时应检测末端肢体假性麻痹婴儿RPR检测不能使用脐带血，因其易被母体感染过程中位于病毒表面的蛋白如果HBV/HCV阳性，避免使用NVP非梅毒螺旋体抗原血清学试验满18月龄HIV抗体检测阳性，可确认儿童HIV感染。HIV感染的实验室监测非梅毒螺旋体抗原血清学试验：HIV试验和检测HIV检测：抗体检测一个人感染了HIV病毒后，体内将产生特异性抗体对抗HIV病毒*。HIV抗体通常在感染后4–6周出现，但也有时也会在感染后3个月才出现。从感染HIV病毒到出现特异的HIV抗体的一段时期称为“窗口期”。标准的HIV诊断检测是识别HIV抗体**注意：*与其他大多数疾病不同，HIV抗体没有保护性作用。HIV抗体检测类型快速检测ELISA免疫印迹（WB）准确性灵敏度特异度非常高几乎100%>99%非常高几乎100%>99%因为特异度极高，用于检测结果不确定样本的确认试验成本++++++结果报告时间<1小时<3天<10天需要专门实验室设备否是是对检验人员技术要求高否是是HIV检测：病毒核酸检测这些检测检测HIV感染者血液或血浆中的病毒必须由经过专门培训的实验室人员操作实验室需有资质，并配备专门设备昂贵，不是针对所有人进行的常规检测方法PCR（多聚酶连反应法）检测HIVDNA定性检测血液中是否含有病毒，用于诊断18月龄内婴儿是否感染HIVHIVRNA定量检测病毒载量，即血浆中的病毒数量，用于监测对抗病毒治疗的反应。HIV筛查检测结果的含义HIV筛查检测结果“阴性(-)”：受检者没有感染HIV或者受检者已经感染了HIV，但处于窗口期：3个月后再次进行检测HIV筛查检测结果“阳性(+)”：病人可能已经感染HIV,但应再次重复检测HIV确认试验结果的含义如果筛查检测结果阳性，两次重复检测中1次或2次检测结果为阳性，需要进行确认试验免疫印迹法（WB）确认试验结果：阳性病人确认感染HIV阴性受检者没有感染HIV不确定结果为“不确定”受检者必须在4周后再次采血，重复前述所有步骤进行检测中国预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播HIV检测流程在产前检查服务中开展整合的检测咨询所采用的HIV检测流程产时HIV抗体检测流程中国预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播HIV检测流程儿童HIV检测HIV暴露婴儿和儿童的HIV抗体检测

不是所有HIV感染母亲所生儿童都会感染HIV，但是如果对12-18个月以内的婴儿进行HIV抗体检测，所有HIV感染母亲所生婴儿都将是HIV检测结果阳性。即使婴儿并没有感染HIV由于母体自身抗体可通过胎盘进入胎儿体内母体传入的抗体可在婴儿体内持续18个月，所以12-18月龄以内的婴儿不能应用抗体检测方法进行诊断。36PCR（多聚酶连反应法）检测婴儿感染早期诊断（EID）

HIV病毒检测（DNA-PCR）用于监测对抗病毒治疗的反应。或者受检者已经感染了HIV，但处于窗口期：3个月后对调整抗病毒治疗方案提供指导治疗后，随访监测非梅毒螺旋体抗原血清学试验由于母体自身抗体可通过胎盘进入胎儿体内非梅毒螺旋体抗原血清学试验（滴度）或有些病人，抗体滴度可始终处于较低水平，有时可持续终生（血清固定）非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性HIV快速检测感染过程中位于病毒表面的蛋白应用DNA-PCR方法进行

婴儿感染早期诊断（EID）（2）梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性病毒载量测量血浆中的病毒数量如果ALT/AST升高超过3倍，不要使用NVP阳性结果可持续存在，即使治疗后仍可为阳性。如果用同一种实验，相同试验滴度4倍变化（如从1:16下降到1:4或从1:8上升到1:32）为临床显著变化非梅毒螺旋体抗原血清学试验此前未检测，分娩时应检测婴儿感染早期诊断（EID）

HIV病毒检测（DNA-PCR）HIV病毒检测（DNA-PCR）检测细胞内的HIV病毒，能够检测低至1–10拷贝前病毒DNA，以及可在HIV暴露婴儿出生后6周内诊断HIV感染用于HIV暴露婴儿HIV感染早期诊断（EID）应用DNA-PCR方法进行

婴儿感染早期诊断（EID）（1）

如果可以开展HIVDNA-PCR检测，应用干血斑（DBS）在婴儿6周龄时进行PCR检测。如果PCR检测结果阳性尽快再次采血再次进行DNA-PCR检测如果第二次PCR检测结果阳性，婴儿确定感染HIV如果PCR检测结果阴性婴儿出生后3个月再次进行PCR检测应用DNA-PCR方法进行

婴儿感染早期诊断（EID）（2）出生后3个月再次进行HIVDNA-PCR检测如果PCR检测结果阳性尽快再次采血再次进行DNA-PCR检测如果第二次PCR检测结果阳性，婴儿确定感染HIV如果PCR检测结果阴性婴儿视为未感染HIV考虑在婴儿满12月龄时进行HIV抗体检测（如有必要，在18月龄时再次进行检测）检测结果阴性的婴儿接受母乳喂养，必须在停止母乳喂养后6周再次进行PCR检测，以确保婴儿没有在母乳喂养期间感染HIV。婴儿HIV感染早期诊断流程HIV暴露婴儿/儿童的HIV抗体检测所有HIV感染母亲所生儿童，在出生后6周或3个月未接受早期感染检测者，应进行HIV抗体检测。检测时间：满12月龄和满18月龄（必要时，见HIV抗体检测流程）出生后3个月（接受早期感染检测者）检测结果为阴性的儿童也应接受HIV抗体检测满18月龄HIV抗体检测阳性，可确认儿童HIV感染。HIV暴露儿童HIV抗体检测流程HIV感染的实验室监测HIV感染的实验室监测实验室监测主要用于：决定开始抗病毒治疗还是预防性应用抗病毒药物是否有抗病毒治疗指征？效果监测抗病毒治疗有效吗？毒性监测抗病毒药物是否引起了其他问题？44CD4+T淋巴细胞是HIV病毒攻击的靶细胞CD4+T淋巴细胞检测用于：决定开始抗病毒治疗还是预防性应用抗病毒药物

为判断抗病毒治疗成功或失败提供定量依据对调整抗病毒治疗方案提供指导孕期每3个月及产后4–6周应进行CD4+T淋巴细胞检测急性感染时可适当推迟检测，(因为在急性感染期，CD4+T淋巴细胞通常会下降）CD4+T淋巴细胞检测病毒载量测量血浆中的病毒数量病毒载量检测可用于：

是抗病毒治疗失败早期、最可靠的标记物监测对抗病毒治疗的反应

诊断HIV感染后和孕晚期各进行一次病毒载量检测病毒载量（RNA-PCR）检测预防应用抗病毒药物：CD4≥350个细胞/mm3检测梅毒螺旋体抗原特异性抗体非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性非梅毒螺旋体抗原血清学试验*由中国疾病预防控制中心性病中心国家参比实验室提供敏感性和特异性较高受检者必须在4周后再次采血，重复前述所有步骤进行检测有些病人，抗体滴度可始终处于较低水平，有时可持续终生（血清固定）*IgM抗体反映近期感染，可帮助鉴别婴儿先天梅毒，但我国尚不能广泛开展必须由经过专门培训的实验室人员操作满18月龄（必要时，见HIV抗体检测流程）胸部X线片和/或结核皮肤试验治疗后，随访监测非梅毒螺旋体抗原血清学试验报告暗视野显微镜检或IgM抗体检测结果实验室需有资质，并配备专门设备如果用同一种实验，相同试验滴度4倍变化（如从1:16下降到1:4或从1:8上升到1:32）为临床显著变化应用DNA-PCR方法进行

婴儿感染早期诊断（EID）（2）一期梅毒：1年后抗体滴度转阴如果Hb<9g/dl，不用使用AZT滴度通常与疾病的活动度有关，因此可用于监测对治疗的反应检测检测对象原因临床指导CD4+T淋巴细胞计数所有HIV感染孕产妇基线评估是否需要抗病毒治疗抗病毒治疗：CD4<350个细胞/mm3预防应用抗病毒药物：CD4≥350个细胞/mm3全血细胞计数（CBC）所有HIV感染孕产妇AZT(叠氮胸苷）可引起贫血或白细胞计数降低如果Hb<9g/dl，不用使用AZT转氨酶所有HIV感染孕产妇如果ALT或AST升高，NVP（奈韦拉平）肝损害副作用的风险较高如果ALT/AST升高超过3倍，不要使用NVP尿肌酐所有HIV感染孕产妇如果升高，需要调整抗病毒药物的剂量需要参考各种抗病毒药物剂量说明HIV感染孕产妇常规实验室监测（1）检测检测对象原因临床指导血糖所有HIV感染孕产妇PI类药物可致血糖升高糖尿病人避免应用PI（蛋白酶抑制剂）类药物血脂如果使用PI类药物PI类药物可致血脂升高如果血脂升高，避免应用PI类药物梅毒血清学试验所有HIV感染孕产妇筛查是否同时感染梅毒如果梅毒检测阳性，治疗梅毒HBsAg如果需要，丙肝血清检测所有HIV感染孕产妇筛查HBV/HCV感染HBV暴露婴儿出生后24小时内给予HBV疫苗和免疫球蛋白注射；如果HBV/HCV阳性，避免使用NVP胸部X线片和/或结核皮肤试验所有HIV感染孕产妇筛查结核进一步调查如果活动结核，治疗如果必要，考虑异烟肼预防性治疗（IPT）HIV感染孕产妇常规实验室监测（2）HBV感染的检测妊娠期HBV感染筛查标记物描述作用动力学乙肝表面抗原（HBsAg）感染过程中位于病毒表面的蛋白血液中可检测到提示感染无法鉴别急性或慢性感染暴露后3–5周后出现，持续到感染消除所有孕产妇均应在孕期尽早接受HBsAg检测筛查是否感染HBV如果分娩前尚未有检测结果，应在分娩前尽快进行检测

如果HBsAg检测阳性，有条件可考虑进行其他HBV标记物检测。

注意，暴露婴儿的处置不受母亲其他HBV标记物检测结果的影响乙肝标记物列表抗原/抗体解释

临床意义

HBsAg 潜在感染出现症状前数周或之后数月可检测到慢性感染时持续存在感染HBVHBeAg病毒复制，传染性