溶血性贫血的实验室检测课件

溶血性贫血的分类1、RBC内在缺陷所致的溶贫（1）

RBC膜缺陷：PNH（2）

HB结构异常：地中海贫血（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫AIHA、药物、化学因素、感染因素

1、血管内溶血：RBC在循环血液中直接破坏如PNH2、血管外溶血：RBC在脾脏破坏如球形RBC增多症、脾亢3、原位溶血：幼RBC在骨髓中溶血如AL、巨幼贫如何诊断溶血性贫血？第一步确定是否有溶血第二步哪一类溶贫一、首先确定有溶血1、找出RBC破坏增多的依据（1）RBC寿命测定〈15天（正常半衰期

25～32天）（2）血片见RBC碎片（3）血浆游离HB增高（血管内溶血）（4）HB尿检测（＋），酱油色（5）尿含铁血黄素试验（＋）（6）血清非结合胆红素（间接胆红素）增高（7）尿胆原增高（8）血清结合珠蛋白检测均减低（9）血浆高铁血红素清蛋白检测电泳法：区带2、

找出RBC代偿增生的依据（1）

网织RBC增多（2）

外周血见有核RBC（3）

骨髓红系统增生明显活跃二、哪一类溶血性贫血？血红蛋白尿阳加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，（1）脆性增高遗传性球形红细胞增多症（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫3、新生儿同种免疫溶血病、SLE、RA、HD、NHL可阳性。1、正常人抗人球蛋白试验直接、间接均阴性，（2）血片见RBC碎片1、

红细胞渗透脆性试验——抗人球蛋白直接试验阳性；2、血管外溶血：RBC在脾脏破临床意义：正常人阴性，（4）HB尿检测（＋），酱油色（1）RBC寿命测定〈15天（正常半衰期2、血管外溶血：RBC在脾脏破高铁血红蛋白还原试验（4）HB尿检测（＋），酱油色渗透脆性减低渗透脆性增高酸溶血试验(Ham)地中海贫血红细胞孵育渗透脆性试验红细胞膜缺陷的检验

红细胞渗透脆性试验酸溶血试验(Ham)蔗糖水试验红细胞膜缺陷的检验

红细胞渗透脆性试验

酸溶血试验(Ham)蔗糖水试验1、

红细胞渗透脆性试验原理:是测定红细胞对不同浓度低滲氯化钠溶血的抵抗能力渗透脆性减低渗透脆性增高方法：0.60.40.2NaCl

参考值开始溶血：0.42%~0.46%（4.2~4.6g/L）NaCL

完全溶血：0.28%~0.34%（2.8~3.4g/L）NaCL临床意义

（1）脆性增高遗传性球形红细胞增多症（2）脆性减低小细胞低色素性贫血：海洋性贫血、缺铁性贫血红细胞膜缺陷的检验

红细胞渗透脆性试验酸溶血试验(Ham)蔗糖水试验红细胞孵育渗透脆性试验原理37℃孵育24小时，细胞内葡萄糖消耗增加，ATP减少，钠离子泵出减少，细胞膨胀脆性增高。参考值未孵育50%溶血4~4.45%孵育50%溶血4.65~5.9%意义脆性增高遗传性球形红细胞增多症脆性减低缺铁性贫血珠蛋白生成障碍性贫血

2、酸溶血试验(Ham)

原理：红细胞+弱酸血清（pH6.6~6.8）37℃1小时红细胞膜对补体敏感，备解素作用下溶血。临床意义：正常人阴性，阵发性睡眠性血红蛋白尿阳性（PNH）PNH不同时间尿样含铁血黄素Ham试验（6）血清非结合胆红素（间接胆红素）（3）血浆游离HB增高（血管内溶血）（1）脆性增高遗传性球形红细胞增多症原理直接抗人球蛋白试验：自身免疫性溶血性贫血（AIHA）血清中有抗自身红细胞的不完全抗体，他与表面附有相应抗原的红细胞结合，成为致敏红细胞，加入抗人球蛋白与红细胞表面不完全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现凝集现象。加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，参考值未孵育50%溶血4~4.1、正常人抗人球蛋白试验直接、间接均阴性，2、

找出RBC代偿增生的依据（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫（1）RBC膜缺陷：PNH（6）血清非结合胆红素（间接胆红素）（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫（1）RBC膜缺陷：PNH（6）血清非结合胆红素（间接胆红素）3、原位溶血：幼RBC在骨髓中第二步哪一类溶贫原理直接抗人球蛋白试验：自身免疫性溶血性贫血（AIHA）血清中有抗自身红细胞的不完全抗体，他与表面附有相应抗原的红细胞结合，成为致敏红细胞，加入抗人球蛋白与红细胞表面不完全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现凝集现象。37℃1小时红细胞膜对补体敏感，——抗人球蛋白直接试验阳性；血红蛋白尿阳红细胞膜缺陷的检验

红细胞渗透脆性试验酸溶血试验(Ham)蔗糖水试验

3、蔗糖水溶血试验

离子浓度低，增强补体与红细胞结合，膜–孔，水进入-细胞破坏（二）红细胞内酶缺陷的检验1、自身溶血试验及纠正试验

原理：细胞内酶缺陷（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G-6PD）(丙酮酸激酶)，葡萄糖效解障碍，不能提供足量ATP，红细胞在自身血浆中温育48小时，不能继续从血浆摄取葡萄糖作能量来源，ATP减少，不能维持红细胞内钠泵作用，导致溶血增加。在温育过程中分别加入葡萄糖和ATP作纠正物，看溶血能否纠正。参考值：正常人轻微溶血，溶血度<3.5%；加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，溶血度<1%。临床意义：（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G-6PD缺乏症蚕豆病）溶血增加，加葡萄糖、ATP溶血部分纠正，（丙酮酸激酶缺乏症）加葡萄糖不能纠正。加入ATP能纠正。高铁血红蛋白还原试验G-6PD缺乏症筛选试验

高铁血红蛋白还原试验G-6PD缺乏症筛选试验

（三）珠蛋白合成异常的试验血红蛋白电泳检测：

醋酸纤维膜电泳法，检查有无异常血红蛋白区带诊断海洋性贫血地中海贫血异常HB带+—醋酸纤维蛋白膜电泳免疫性溶血的检验抗人球蛋白试验(Coombs)

原理直接抗人球蛋白试验：自身免疫性溶血性贫血（AIHA）血清中有抗自身红细胞的不完全抗体，他与表面附有相应抗原的红细胞结合，成为致敏红细胞，加入抗人球蛋白与红细胞表面不完全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现凝集现象。来证实红细胞表面有不完全抗体。——抗人球蛋白直接试验阳性；间接抗人球蛋白试验：检查血清中有无游离的不完全抗体，敏感性差。抗人球蛋白IgG不完全抗体RBC二、哪一类溶血性贫血？（5）尿含铁血黄素试验（＋）高铁血红蛋白还原试验阵发性睡眠性低滲氯化钠溶血的抵抗能加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，（二）红细胞内酶缺陷的检验（6）血清非结合胆红素（间接胆红素）酸溶血试验(Ham)（3）

骨髓红系统增生明显活跃25～32天）3、原位溶血：幼RBC在骨髓中来证实红细胞表面有不完全抗体。（1）RBC寿命测定〈15天（正常半衰期与红细胞结合，膜–孔，（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫原理：细胞内酶缺陷（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G-6PD）(丙酮酸激酶)，葡萄糖效解障碍，不能提供足量ATP，红细胞在自身血浆中温育48小时，不能继续从血浆摄取葡萄糖作能量来源，ATP减少，不能维持红细胞内钠泵作用，导致溶血增加。原理：红细胞+弱酸血清（pH6.原理：红细胞+弱酸血清（pH6.原理：红细胞+弱酸血清（pH6.1、正常人抗人球蛋白试验直接、间接均阴性，力第二步哪一类溶贫完全溶血：0.（1）脆性增高遗传性球形红细胞增多症（2）

HB结构异常：地中海贫血25～32天）（8）血清结合珠蛋白检测均减低电泳法：区带1、自身溶血试验及纠正试验（6）血清非结合胆红素（间接胆红素）异常血红蛋白区带（5）尿含铁血黄素试验（＋）2、血管外溶血：RBC在脾脏破在温育过程中分别加入葡萄糖和ATP作纠正物，看溶血能否纠正。G-6PD缺乏症筛选试验——抗人球蛋白直接试验阳性；（2）脆性减低小细胞低色素性贫血：海洋性贫力（4）HB尿检测（＋），酱油色（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫溶血如AL、巨幼贫直接抗球蛋白试验（DAT）阳性（右）临床意义

1、正常人抗人球蛋白试验直接、间接均阴性，2、自身免疫性溶血性贫血（温抗体型37℃条件下作用最强IgG）,(冷抗体型4℃条件下进行试验IgM)3、新生儿同种免疫溶血病、SLE、RA、HD、NHL可阳性。谢谢溶血性贫血的分类1、RBC内在缺陷所致的溶贫（1）

RBC膜缺陷：PNH（2）

HB结构异常：地中海贫血（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫AIHA、药物、化学因素、感染因素1、找出RBC破坏增多的依据（1）RBC寿命测定〈15天（正常半衰期

25～32天）（2）血片见RBC碎片（3）血浆游离HB增高（血管内溶血）（4）HB尿检测（＋），酱油色（5）尿含铁血黄素试验（＋）（6）血清非结合胆红素（间接胆红素）增高（7）尿胆原增高红细胞膜缺陷的检验

红细胞渗透脆性试验酸溶血试验(Ham)蔗糖水试验（二）红细胞内酶缺陷的检验1、自身溶血试验及纠正试验

原理：细胞内酶缺陷（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G-6PD）(丙酮酸激酶)，葡萄糖效解障碍，不能提供足量ATP，红细胞在自身血浆中温育48小时，不能继续从血浆摄取葡萄糖作能量来源，ATP减少，不能维持红细胞内钠泵作用，导致溶血增加。在温育过程中分别加入葡萄糖和ATP作纠正物，看溶血能否纠正。高铁血红蛋白还原试验G-6PD缺乏症筛选试验

高铁血红蛋白还原试验G-6PD缺乏症筛选试验

1、自身溶血试验及纠正试验25～32天）来证实红细胞表面有不完全抗体。（3）

骨髓红系统增生明显活跃临床意义：正常人阴性，（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫血红蛋白电泳检测：G-6PD缺乏症筛选试验（4）HB尿检测（＋），酱油色意义脆性增高遗传性球形红细胞增多症（二）红细胞内酶缺陷的检验（1）RBC寿命测定〈15天（正常半衰期（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫（3）血浆游离HB增高（血管内溶血）（3）血浆游离HB增高（血管内溶血）（2）脆性减低小细胞低色素性贫血：海洋性贫（2）脆性减低小细胞低色素性贫血：海洋性贫1、血管内溶血：RBC在循环血原理37℃孵育24小时，细胞内葡萄糖消耗增加，ATP减少，钠离子泵出减少，细胞膨胀脆性增高。酸溶血试验(Ham)1、正常人抗人球蛋白试验直接、间接均阴性，（5）尿含铁血黄素试验（＋）参考值：正常人轻微溶血，溶血度<3.第二步哪一类溶贫（8）血清结合珠蛋白检测均减低（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫（1）脆性增高遗传性球形红细胞增多症与红细胞结合，膜–孔，酸溶血试验(Ham)原理：细胞内酶缺陷（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G-6PD）(丙酮酸激酶)，葡萄糖效解障碍，不能提供足量ATP，红细胞在自身血浆中温育48小时，不能继续从