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文档简介
如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!检定菌保存、传代、使用、销毁标准操作规程规范药品微生物学检定用菌的管理,最大限度降低变异率,确保菌种本规程适用于检定用菌种的管理,包括菌种的申购、保存、传代、使。标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内,每萌发一次即如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!计划,交由质量管理部部长审批后,向中检所菌种保藏中心或省(市)药检所购买冻干菌种(标准菌种);也可以直接向省(市)药检所购买传代用1)上,内容包括:名称、数量、编号(无编号者按检定菌种的编号原则编6.3.检定菌的保存4~8℃冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存,并应随时检查其石蜡保存法。保存法如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面的菌苔,并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到预先装制备好的菌悬液中加入等体积的无菌甘油(浓度20%),即为10%甘油菌悬2取出一支放至室温,转种增菌培养或接种至琼脂斜面复苏,挑取纯菌落传此种方法主要适用于需氧细菌和酵母菌的保藏(如大肠埃希菌、金黄中,在适宜条件下培养结束后,在层流台下用无菌吸管吸取上述无菌液体绝,并将试管直立,置于-20℃冷冻或2~8℃冰箱中保存。此法主要适用于霉菌、厌氧菌、放线菌、芽孢杆菌的保存(如枯草芽等)。如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!检定菌菌种的传代因冻干菌(标准菌种)与传代用菌种而不完全相同。代6.4.1.1.1.把冻干菌种管、灭菌毛细滴管(1ml)、双碟、镊子、营养肉汤培养基(或其它适宜培养基)数支,移入接种室或超净工作台。擦净,放在灭菌双碟内,待干。点燃酒精灯,将标准菌种管的封口一端在火焰上,烧灼红热,用灭菌毛细滴管吸取营养肉汤培养基(或其它适宜的碟内,另取1支灭菌毛细滴管,在火焰旁吸取营养肉汤培养基(或其它适宜的培养基)少许,加至菌种管底部,将冻干菌块搅动促使溶解,随即吸出管内菌液,接种至营养肉汤培养基(或其它适宜的培养基)内,并根据不同菌种类型而将其培养于相宜的温度下24~72小时(细菌需要24~48菌(121℃,45分钟)。种复活生长,若不浑浊,在将其作为无活菌生长的培养物丢弃以前,细菌应高温灭活处理(2如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!或玫瑰红钠培养基(真菌和酵母菌)平板上,或相应的宜于该菌生长的鉴别培养基平板上,然后在30~35℃下培养3天(细菌);20~25℃下培养5天(真菌和酵母菌)。培养后,首先观察其是否具有典型的菌落形态,然后以便收集较多的生长旺盛的典型单菌落,进行保存和鉴定。鉴定时作革兰氏染色、镜检,观察其染色特性及形态特征。最后再做生化实验以进一步应将此被污染了的培养物灭活处理,并寻找原因。应根据其原因采取措施126.4.1.3.2.菌种确认后,挑取平板上纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管,作为保存菌种(G),也称传代用菌种,同时挑取纯菌落转接斜如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!36.4.1.3.3.将第2代(G)菌种管冷冻保存,将工作用菌(W)于适236.4.1.3.4.取一支冷冻保存的第2代(G)菌种转种于平板和斜面培2养基上,平板上的菌种制成冷冻保存管第3代(G);斜面培养基的菌种经3适当温度下培养适当时间后用作工作用菌种,此仍为第3代(W)。36.4.1.3.5.将第3代菌种(G)冷冻或低温保存,将生长、转种后的3第2代(G)菌种经高温灭活处理后丢弃。245当无标准用菌种时,可从省(市)药检所购买菌种作为传代用菌种,如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!取在冰箱4~8℃保存的工作用菌种用普通琼脂斜面传代,并将新传代也可取用“甘油冷冻管保藏法或液体石蜡覆盖保藏法”保存的菌种,佩带无菌手套,实验完成以后消毒实验进行的区域、实验仪器和器具。如6.5.检定菌种的编号字表示:英文缩写字母—代次—传代日期—顺序号菌种的英文缩写字母:大肠埃希菌(E.c)、金黄色葡萄球菌(S.a)、枯草芽孢杆菌(B.s)、白色念珠菌(C.a)、黑曲霉菌(A.n)、乙型副伤寒如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!333在菌种的保存期间,应每天检查保存菌种冰箱的温度、菌种管的塞子菌种在保存期内均应根据菌种的特性(工作用菌种每转种两代一次、传代用菌种每三个月一次)检查其菌落性状、革兰染色、显微镜下菌体形态及生化特性等项目,若发现与原菌种变异较大,应重新分离、纯化、鉴6.7.检定菌种的领用与使用如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!(附表6),以便追踪菌种使用历史。6.8.检定菌种(废弃)的销毁品)销毁处理记录》(附表7)。件二份,附表六份:如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!附表7:《废弃菌种(物品)销毁处理记录》MCCBCMCCB〕复活培养基划线用培养基如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!收记录名称及编号数量代数来源接收日期接收人检查情况保存条件如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!检定菌种传代、分离记录购进(领取)日期年月数量编号数量编号有效期代码页次1共1页日来源如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!记录名称检定菌种保存、领用登记台账收到日期名称及编号数量接收人移交人领用日期1如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!观察记录塞子是否松动是否霉变页次1如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!定记录年月日鉴定人复核人如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!记录名称检定菌种使用登记台账领用日期名称及编号数量使用人如不慎侵犯了你的权益,请联系我们告知!附表7:《废弃菌种(物品)销
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