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分子生物学重点第七章什么是染色体?染色体功能?DNA的一段给定区域及与之结合的蛋白质称为染色质(chromatin)DNA包装为染色体的重要性?基因大小、基因数量、基因密度的概念不参与基因的表达的染色体元件在真核细胞中,影响基因密度大小的因素DNA重复序列的特点和分布细胞周期概念?真核染色体在细胞周期中的复制和分裂过程端粒酶的功能核小体组成核小体是由8个组蛋白所形成的核心组成,DNA缠绕在组蛋白核心上。每个核小体之间的DNA叫做连接DNA。与核小体连接最紧密的DNA叫做核心DNA,在所有的真核细胞中长度约147bp的核心DNA是核小体一个不变的特征。相反核小体之间的连接DNA的长度是可变的。细胞周期检查点的作用组蛋白结构特点组蛋白是带正电的小分子蛋白质,其H2A、H2B、H3、H4是核心组蛋白。两个拷贝的这几种蛋白形成核小体的蛋白核,核小体DNA缠绕其上。组蛋白中带正电荷的氨基酸含量很高所以能与带负电的DNA分子紧密结合。染色体1,2,3,4级结构染色体结构的调节因素第八章名词解释:半保留复制半不连续复制前导链后随链冈崎片段复制子复制叉解旋酶引物酶拓扑异构酶DNA聚合酶端粒端粒酶DNA复制过程及过程中涉及的原料及其功能原核真核DNA聚合酶结构、功能异同大肠杆菌DNA复制过程端粒的复制与衰老的关系第九章DNA突变、损伤原因(环境、复制过程)一、环境因素(物理化学)1、自发损伤水解:N-糖苷键水解发生去嘌呤化,形成脱碱基的AP位点。脱氨基作用:C→U、5-mC→T(产生天然存在的甲基)、A→次黄嘌呤(与C配对)、G→黄嘌呤(与C配对)。2、DNA损伤烷基化:G甲基化生成O6-甲基鸟嘌呤与T配对,导致G:C→A:T。氧化反应:活性氧簇攻击生成oxoG与A配对,导致G:C→T:A。紫外线:相临嘧啶之间发生光化学聚合生成嘧啶二聚体。3、碱基类似物和嵌入剂引起的突变碱基类似物:5-BrU(T的类似物);通过烯醇互变异构体与G错配;导致T:A→G:C。嵌入剂:(多环扁平分子)如EB,吖啶;与碱基相互结合或堆积,使模板扭曲或碱基距离加倍,导致一个或者几个碱基的缺失或插入。二、内因:复制过程中的错误1、小:①转换(如T→A,C→G)②颠换(如T→G或A,A→C或T)③点突变(改变单个核苷酸的突变)④微卫星DNA(打滑导致重复序列的拷贝数增多或减少)。2、大:①插入②删除(缺失)③大片段重组。机体对突变、损伤的修复机制(相关蛋白及其功能)(环境6种+自身复制过程1种)1.错配修复(MutS,MutL,MutH)MutS:扫描DNA,通过错配引起的DNA骨架扭曲来识别。MutL:与MutS组成复合体通过直接接触激活MutH。MutH:在错配位点附近的一条链上产生一个切口。(通过半甲基化标记要被修复的链)错配修复过程中同样涉及到解旋酶、核酸外切酶、DNA聚合酶等。2.直接逆转修复光修复:DNA光解酶;光激活作用直接逆转紫外辐射造成的嘧啶二聚体结构。烷基转移:甲基转移酶;去除甲基化碱基O6-甲基G上的甲基。3.碱基切除修复利用糖基化酶识别并通过AP内切酶(切5留3)、外切酶(切3留5)水解糖苷键去除受损碱基。碱基弹出机制:DNA具有很强的柔韧性。4.核苷酸切除修复(转录中起作用)核苷酸切除修复酶识别双螺旋形状上的扭曲。UvrA:检测扭曲;UvrB:产生一单链凸起;UvrC:产生两个切口;UvrD:解旋。5.双链断裂修复(DSB,同源重组修复)6.直接连接修复NHEJ:非同源末端连接;通过断裂末端突出的单链之间错排配对,断裂DNA的两个末端直接相互连接。7.移损合成修复防故障机制使复制机器绕过损伤部位直接合成DNA;DNA聚合酶的Y家族(如UmuD2’C)。第十章同源重组的功能同源重组两种模型、两种过程及其异同大肠杆菌同源重组机器及机制大肠杆菌和真核生物同源重组过程中涉及的关键蛋白及其作用第十一章名词解释:特异性重组转座特异性重组微点特点重组及特异性重组酶家族异同转座类型、转座插入目的序列不同的后果三种基本转座因子及结构特征转座的两种机制剪切、粘贴的机制第十二章DNA复制与转录的异同原核生物、真核生物RNA聚合酶种类及功能转录的三个基本阶段每个阶段的主要事件细菌启动子的结构特征(序列、位置、结构)因子结构,识别启动子拿个部位体内外真核生物转录起始过程异同(主要蛋白质功能)真核原核mRNA区别(头尾、真核有前体)第十三章名词解释:RNA剪接可变剪接剪接体套马索结构核酶RNA剪接化学基础(结构特征)剪接过程(PPT29-38)第十四章名词解释:翻译多顺反子单顺反子核糖体结合位点翻译机器的组成、翻译过程的阶段、每阶段的主要事件真核原核翻译起始的异同tRNA1,2,3级结构及特点氨基酸附加到tRNA的过程氨基酸与氨酰tRNA合成酶及tRNA数量对应关系氨酰tRNA合成酶识别位点(氨基酸接受臂和反酶大小环)原核生物与真核生物的核糖体组成(大小亚基的活性中心是什么、核糖体大小亚基循环肽键的形成翻译延伸的过程(主要因子、及其作用)(原核)翻译矫正过程机制蛋白合成过程中能量消耗(起始(原核真核)、延伸(原核))第十五章密码子的简并性反密码子的摆动性密码子的3个规律终止密码子有哪些同义错义无义突变的意思、遵循的规律第十六章原核生物调控原则(3)调控蛋白的类型(2正负)乳糖操纵子生理作用、组成、调控机制色氨酸调控子生理作用、组成、调控机制λ噬菌体裂解和融原调控转换机制第十七章名词解释:顺式作用原件反式作用因子激活蛋白DNA结合结构域4类型两个实验(酵母双杂交、)过程、作用、概念、意义组蛋白的化学修饰有哪些,有哪些生理功能(影响核小体结构、损伤时子母链、基因表达调控)第十八章名词解释:DNA干扰技术SiRNA第十九章微阵列技术发育调控的三种策略(mRNA定位、相互作用、)5个例子酵母交配型转换及机制如何调控、激活、抑制果蝇胚胎发育中前后轴背腹轴形成过程中设计的
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