液相色谱讲义六液相色谱的定性定量分析

液相色谱讲义六液相色谱的定性定量分析第一页，共二十六页，编辑于2023年，星期日用保留时间定性用“标样”的保留值定出被测组份的位置第二页，共二十六页，编辑于2023年，星期日进一步的确认标准加入同时用其他方法其他色谱方法（改变机理，如：用不同的色谱柱）其他检测器PDA，光谱图比较、谱库检索MS，质谱图解析、谱库检索其他仪器方法第三页，共二十六页，编辑于2023年，星期日标准加入法举例废水样品中五氯苯（PCP）的分析梯度曲线梯度曲线PCP4ppm3ppm2ppm1ppm第四页，共二十六页，编辑于2023年，星期日峰一致性的确认确认色谱峰的纯度保证每个色谱峰下只有一个被测的组份检查是否有共流出的物质（杂质）干扰色谱峰纯度确认的方法用光电二极管矩阵检测器比较光谱图峰纯度鉴定，双波长Ratio996的纯度角理论第五页，共二十六页，编辑于2023年，星期日用二极管矩阵检测器比较光谱图苯的色谱及光谱图（Index）第六页，共二十六页，编辑于2023年，星期日996的纯度角理论996的纯度角理论可快速得到纯度结果第七页，共二十六页，编辑于2023年，星期日定量分析的具体内容确定样品的类型，主要成分/痕量成分使分析条件的分离度（R）大于：1.5色谱峰的定性，峰一致性测定检测限及定量限：确定灵敏度及线性范围用标样建立标准曲线检查方法的准确度及精确度用标样定期检查方法第八页，共二十六页，编辑于2023年，星期日痕量分析如信/噪比不够，定量的精确度会受影响，因此要：分析前浓缩样品选择高灵敏度检测器用衍生法使色谱体系最优化使用短的微径柱（减少样品的稀释）使用高效色谱柱使k'值尽可能小增加进样体积和浓度使用低流速（N增加）采用梯度淋洗第九页，共二十六页，编辑于2023年，星期日液相色谱定量的精度测量的精度第十页，共二十六页，编辑于2023年，星期日定量的准确度

误差∶E=O-TO∶观测到的值T∶真值第十一页，共二十六页，编辑于2023年，星期日液相色谱定量精度的计算测量精度的计算第十二页，共二十六页，编辑于2023年，星期日准确度的衡量色谱方法是相对定量方法，如不考虑损失及杂质干扰等的因素，其结果同“标样”的准确程度关系密切一般的衡量方法是做回收率实验或不同方法之间的比较：相关系数相关系数：其中，X及Y分别代表不同方法的实验值及平均值第十三页，共二十六页，编辑于2023年，星期日准确度的影响因素标样的可靠性及其配制的准确度色谱方法的可靠性色谱泵的精确度（GPC的影响更大）进样器的准确度，进样技术第十四页，共二十六页，编辑于2023年，星期日流速与检测面积的关系如在不改变系统效率的情况下，流速降低峰高几乎不变，然而峰面积与流速相应成反比增加。第十五页，共二十六页，编辑于2023年，星期日溶剂强度、K'及峰高的关系第十六页，共二十六页，编辑于2023年，星期日柱效和峰高的关系如其他因素不变，如：K‘，a，流速等，柱效增加峰面积基本不变，而峰高增加。第十七页，共二十六页，编辑于2023年，星期日常用的定量方法峰面积百分比法由于检测技术的影响，在液相色谱中不常用外标法在液相色谱中用的最多内标法准确，但是麻烦在标准方法中用的最多第十八页，共二十六页，编辑于2023年，星期日外标法定量配制一系列已知浓度的标样第十九页，共二十六页，编辑于2023年，星期日外标法定量（二）实际色谱图标准曲线第二十页，共二十六页，编辑于2023年，星期日外标法定量（三）计算公式特点无需各组份都被检出、洗脱需要标样标样及样品测定的条件要一致进样体积要准确第二十一页，共二十六页，编辑于2023年，星期日进样技术对定量结果的影响固定体积定量管（loop）的进样器精度最好，其准确度取决于进样器的结构可变体积进样器的精度取决于操作者的技术，准确度通常更高，因为进样用的注射器结构的准确度高，操作者的技术水平也有影响，但不大WISP自动进样器精确度及准确度都可达到定量管进样器的水平，因为其每一微升分27步以上。然而它又保留了可变体积进样器的优点第二十二页，共二十六页，编辑于2023年，星期日内标法定量（一）配制一系列浓度的标样，其中加有内标样第二十三页，共二十六页，编辑于2023年，星期日内标法定量（二）实际色谱图标准曲线第二十四页，共二十六页，编辑于2023年，星期日内标法定量（三）计算公式：特点：无需各组份都被检出、洗脱需要标样，需要内标样结果与进样体积无关第二十五页，共二十六页，编辑于2023年，星期日内标法定量（四）对内标物的要求化学结构与待