分解纤维素的微生物的分离 省赛获奖

课题1果酒和果醋的制作P2-4阅读P2-5，思考：1.果酒制作的原理？（所用微生物？该微生物呼吸方式？该微生物新陈代谢类型？呼吸作用的反应式？反应适合的温度？鉴定方式？）2.果醋制作的原理？（所用微生物？该微生物呼吸方式？反应式？反应适合的温度？）3.能够解释P4A、B发酵装置设置原因？分解纤维素的微生物的分离阅读P27-29思考1.什么是纤维素？什么是纤维素酶？纤维素酶的组成？2.筛选纤维素分解酶的方法？3.分离纤维素分解菌的实验设计流程包括哪些？4.思考P29资料二的三个问题？5.刚果红染色法的过程如何？2.纤维素酶

纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶(外切酶)、CX酶(内切酶)和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素刚果红染色法

刚果红能与纤维素形成红色复合物，而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。

阅读P28（二）纤维素分解菌的筛选

当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，这样我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌①取二支20mL的试管实验：纤维素酶分解纤维素的实验②各加入一张滤纸条③各加入pH4.8，物质量为0.1mol/L的醋酸－醋酸钠缓冲液11ml和10ml甲乙④在乙试管中加入1mL纤维素酶⑤两支试管固定在锥形瓶中，放在140r/min的摇床上振荡1h⑥结果：乙试管的滤纸条消失

讨论：乙试管的滤纸条为什么会消失？甲试管的作用是什么？二、实验设计

请你根据实验流程图和提供的三个资料以及“操作提示”，在思考有关问题的基础上，设计出一个详细的实验方案。流程：土壤取样选择培养梯度稀释

将样品涂布在鉴别纤维素分解菌的培养基上

筛选产生透明圈的菌落P29培养基成分分析（提供了什么营养？）培养基组成提供主要的营养物质纤维素粉5g碳源（能源）NaNO31g氮源、无机盐KCl0.5gNa2HPO4·7H2O1.2gKH2PO40.9gMgSO4·7H2O0.5g无机盐酵母膏0.5g生长因子、碳源、氮源水解酵素0.5g氮素、生长因子溶解后，蒸馏水定容至1000mL水A、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？

是液体培养基，原因是配方中无凝固剂（琼脂）B、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？有选择作用，本配方中纤维素作为主要碳源，只有能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。4.将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上（1）制备鉴别培养基:（2）涂布平板：P18-19

将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1ml涂布到平板培养基上，30℃倒置培养。将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环_______在_______旁冷却接种环，并打开棉塞将试管口通过火焰.将已______的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划__________条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。.将试管通过火焰，并塞上棉塞火焰冷却三至五灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的_______开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。末端烧红将平板_____放入培养箱中培养。

倒置14.如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：(1)依物理性质，该培养基属于____培养基。依用途划分，则属于_____培养基。(2)根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是_____，培养的微生物可能是______。(3)该培养基中的碳源是____。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是______。(4)若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是_____，应加入的物质是_____，为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入____。阅读P72，回答：1.植物芳香油的提取方法有哪些？2.水蒸气蒸馏法原理？分为哪三种？根据什么而分？3.柑橘、柠檬为何不合适用水中蒸馏法？3.萃取法原理？蒸馏、压榨、萃取1.植物芳香油的提取方法有哪些？（1）原理：混合物又会重新分离出油层和水层。（植物芳香油提取的常用方法）1、水蒸气蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来形成油水混合物冷却后

水中蒸馏水上蒸馏水气蒸馏（2）分类：问题二：水蒸气蒸馏法原理？分为哪三种？根据什么而分？一般是将原料先放入蒸锅内，然后加入清水或上一锅的馏出水，水高度刚满过料层。也有在锅底设置筛板以防原料与热源直接接触造成烧焦，影响精油品质。A、水中蒸馏又称隔水蒸馏，是把原料置于蒸馏锅内的筛板上，筛板下盛放一定水量以满足蒸馏操作所需的足够的饱和蒸汽，水层高度以水沸腾时不溅湿原料底层为原则。B、水上蒸馏是由外来的锅炉蒸汽直接进行蒸馏。通常在筛板下锅底部位装有一条开小孔的环形管，锅炉来的蒸汽通过小孔直接喷出。C、水气蒸馏

因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题柑橘和柠檬芳香油的制备常采用压榨法2、压榨法（柑橘、柠檬芳香油制备的常用方法）通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油问题3.柑橘、柠檬为何不合适用水中蒸馏法？适合用什么方法？3、为提高压榨