抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号中药对大鼠肺间质纤维化的干预作用-

抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号中药对大鼠肺间质纤维化的干预作用*【摘要】目的探讨中药对肺间质纤维化的预防和治疗作用。方法Wistar大鼠160只，随机分为8组：对照组［组］：灌胃生理盐水/(kg·d)；强的松组［组］：灌胃强的松6mg/(kg·d)；预防Ⅰ组［、组］：灌胃抗肺纤Ⅰ号/(kg·d)、15g/预防Ⅱ组［、组］：灌胃抗肺纤Ⅱ号/(kg·d)、15g/(kg·d)；治疗组［(7)、(8)组］，分别灌胃抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号15g/(kg·d)。~各组于气管内滴入博莱霉素5mg/kg，次日开始给药。、组于气管内滴注BLMA5，5mg/kg，15天后开始给药。各组动物分别于给药14天、28天随机处死10只，然后检测各项观察指标。结果观察28天后，对照组：动物体重增加71%，肺胶原蛋白含量提高%，过氧化脂质含量提高倍，羟脯氨酸含量提高%。强的松组：动物体重减轻80%，肺胶原蛋白降低%，羟脯氨酸含量降低%。预防组：动物体重分别增长%和%，肺胶原蛋白含量降低%和%，羟脯氨酸含量降低%和%。治疗组肺胶原蛋白降低%和%，羟脯氨酸含量降低%和%。结论抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号均具有预防和治疗肺间质纤维化的作用。

【关键词】肺间质纤维化；中药；预防和治疗；皮质类固醇

TheinhibitoryeffectofantipulmonaryfibrosisagentsⅠandⅡontheratmodelofblemycin-inducedpulmonaryfibrosis

ZHANGQi-kun，XIAOSecondHospitalofLanzhouUniversity，Lanzhou730030，China

【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectofantipulmonaryfibrosisagentⅠandⅡontheratmodelofblemycin-inducedpulmonaryWistarratsinducedbyintratrachealinstillationofblemycinwererandomlydividedintosixgroupswithtwentyeachbronchuswasrecepteddailysaline/kg(groupA)，prednisone6mg/kg(groupB)，APFAⅠ15g/kg(groupC)andAPFAⅠ15g/kg(groupD)fromthenextdayratsingroupEandFreceiveddailyAPFAⅠ15g/kgandAPFAⅠ15g/kgrespectivelyfromthe15thratsineachgroupwererandomlysacrificed14and28daysafterintratrachealtheratsweightcollagen，hydroxyprolineofthelungtissuewereCollagenofratlungtissueingroupB，C，D，EandFdecreased%，%，%，%and%(fiveofP＜，respectively)，meanwhilehydroxyprolinedecreased%，%，%，%and%(fiveofP＜），Theanti-pulmonaryfibrosisagentsⅠandⅡcanpreventandtreatblemycin-inducedpulmonaryfibrosisinrats.

【Keywords】pulmonaryfibrosis；herbalmedicine；preventionandtreating；corticoid

弥漫性肺间质纤维化、牛血清白蛋白、L-羟脯氨酸、强的松、博莱霉素、抗肺纤Ⅰ号、抗肺纤Ⅱ号。

实验仪器日本岛津UV-120—02型分光光度计，MettlerAE-260电子天平，LD4-2A医用离心机，OLYMPUS-B07照相显微镜。

实验动物分组及给药剂量［1］清洁级Wistar大鼠160只，雌雄各半，体重g，由甘肃省医学科学研究院实验动物研究室提供。随机分为8组，每组20只。对照组：灌胃生理盐水强的松组：灌胃强的松6mg/(kg·d)；抗肺纤Ⅰ号小剂量组：灌胃抗肺纤Ⅰ号中药/(kg·d)；抗肺纤Ⅰ号大剂量组：灌胃抗肺纤Ⅰ号中药15g/(kg·d)；抗肺纤号Ⅱ号小剂量组：灌胃抗肺纤Ⅱ号中药/(kg·d)；抗肺纤Ⅱ号大剂量组：灌胃抗肺纤Ⅱ号中药15g/(kg·d)；抗肺纤Ⅰ号治疗组：灌胃抗肺纤Ⅰ号中药15g/(kg·d)；抗肺纤Ⅱ号治疗组：灌胃抗肺纤Ⅱ号中药15g/(kg·d)。~各组于气管内灌注BLMA5、组于气管内灌注BLMA5测定按MDA-TBA比色法，用日本岛津UV-120-02型分光光度计532nm处比色测定。

肺组织胶原蛋白含量测定按Lowyr法［2］，以、、、、标准牛血清白蛋白及其A值绘制标准曲线。用回归法公式计算肺组织胶原蛋白含量(x)，回归法公式：Y=a+bx(a=，b=，r=，Y：肺组织光密度）。

肺组织羟脯氨酸测定羟脯氨酸多以寡肽形式存在，测定羟脯酸含量时，先将肺组织用6ml/L的HCl水解成游离羟脯氨酸，再用氯氨T将羟脯氨酸氧化，在加热条件下，羟脯氨酸的氧化产物δ-吡洛啉-4羟基-2羟酸和吡咯-2羟酸与对二甲基氨基苯甲醛作用呈红色，用日本岛津UV-120-02型分光光度计560nm处比色。以、、、、标准羟脯氨酸及其A值绘制标准曲线，用回归法公式Y=a+bx(a=，b=，r=，Y：肺组织光密度），计算肺组织羟脯氨酸含量。

组织病理学检查在光学显微镜下观察，根据Szapiel等［3］方法确定。肺泡肺炎和纤维化的程度各分为4级：无肺泡肺炎；轻度无肺泡肺炎；中度无肺泡肺炎；重度无肺泡肺炎。肺间质纤维化分级标准：无纤维化；轻度纤维化；中度纤维化；重

度纤维化。

统计学方法所有数据用表示，组间比较采用t检验。肺泡炎及肺纤维化程度以等级资料统计。率的比较采用χ2检测，P＜为具有统计学意义。

2结果

实验结果见表1~7。

气管灌注博莱霉素后，其他各组给药动物体重增长率显着低于对照组，其中强的松组较给药前体重减轻了80%，见表1。

表1抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号中药对大鼠体重的影响

注：与对照组比较，*P＜，**P＜

气管灌注博莱霉素第28天，强的松组动物生存率显着低于对照组，停药后7天比较，强的松组动物生存率为0，其他各组再未见死亡，见表2。

表2抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号中药对IPF大鼠生存率的影响

注：与对照组比较，*P＜

气管灌注博莱霉素至少第28天，给药组动物肺组织胶原蛋白含量显着低于对照组，组内不同时间比较，给药28天动物肺组织胶原蛋白含量显着低于14天，其中抗肺纤Ⅰ号中药更为明显，见表3。

表3抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号中药对IPF大鼠肺组织胶原蛋白含量的影响

注：与对照组比较，*P＜；组内不同时间比较，▲P＜

表4抗纤Ⅰ和Ⅱ号中药对IPF大鼠肺组织过氧化脂质含量的影响

注：与对照组比较，*P＜，**P＜

由表4看出，气管灌注博莱霉素第14天，给药组动物肺组织过氧化脂质含量明显低于对照组，其中抗肺纤Ⅱ治疗组更为显着。给药28天，动物肺组织胶原蛋白含量降低，动物肺组织过氧化脂质含量升高。

表5抗纤Ⅰ和Ⅱ号中药对IPF大鼠肺组织羟脯氨酸含量的影响

注：与对照组比较，*P＜；组内不同时间比较，▲P＜

由表5看出，气管灌注博莱霉素第28天，给药组动物肺组织羟脯氨酸含量显着低于对照组。其中抗肺纤Ⅱ号中药尤为显着。

表6给药第14天各组动物肺组织病理学分级情况

表7给药第28天各组动物肺组织病理学分级情况

以上实验结果：在对照组，气管灌注博莱霉素第28天测定，动物体重增长了71%，肺组织胶原蛋白含量比第14天提高了%，过氧化脂质含量提高了倍，羟脯氨酸含量提高了%。肺组织病理学检察，炎性细胞数、纤维化程度明显增加，IPF大鼠模型建成。在预防组，气管灌注博莱霉素，给药第28天测定，强的松组动物体重减轻了80%，肺组织胶原蛋白降低了%，羟脯氨酸含量降低了%。抗纤Ⅰ和Ⅱ号中药组体重分别增长了%和%，肺组织胶原蛋白分别降低了%和%，羟脯氨酸含量分别降低了%和%。肺组织病理学检查，炎性细胞、纤维化程度明显降低。说明强的松和抗纤Ⅰ和Ⅱ号中药具有抑制肺纤维化的作用。但是，强的松抑制内分泌系统和免疫系统功能。因毒副作用大而导致实验动物死亡数增加［3］。在治疗组，气管灌注博莱霉素后15天给药，给药28天测定，肺组织胶原蛋白分别降低了%和%，羟脯氨酸含量降低%~%。说明抗纤Ⅰ和Ⅱ号中药治疗IPF，不但具有抑制肺纤维化的作用，而且能逆转肺纤维化，具有较好的预防和治疗作用。

3讨论

通过上述动物实验结果，我们认为：采用糖皮质激素和免疫抑制剂治疗IPF，可抑制炎症和模型动物肺组织羟脯氨酸、胶原蛋白的合成，起到治疗肺纤维化的作用［3］。但是，糖皮质激素和免疫抑制剂可使内分泌系统、免疫系统受到抑制，因免疫功能低下而导致死亡［4］。采用中药抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号治疗IPF，不但可抑制炎症和模型动物肺组织羟脯氨酸、胶原蛋白的合成，起到预防肺纤维化作用，而且避免了常规治疗的不足和治疗中出现的毒副作用［5~7］。采用中药抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号治疗IPF，可使已形成的胶原纤维组织降解，起到治疗肺纤维化的作用。采用中药抗肺纤Ⅰ号治疗IPF毒副作用小，安全可靠，价格便宜，服用方便，值得推广使用。

【参考文献】

1李仪奎.中药药理实验方法学.上海：上海科学技术出版社，1991，203-222.

2SzapielSV，ELsonNS，Fulmerinterstitialpulmonarydiseaseinnude，athymicRevRespirDis，1979，120：893.

3智屹惠.曹世宏教授论治肺间质纤维化.南京中医药大学学