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文档简介

外植体消毒一、外植体预处理常用方法用75%的酒精对植物体表进行擦拭一、外植体预处理常用方法对材料进行流水处理一、外植体预处理常用方法对植物材料进行洗手液或洗洁剂浸泡处理，特别是对于植物体表有绒毛的植物外植体。一、外植体预处理常用方法对植物材料进行低温处理，减少后期褐化一、外植体预处理常用方法对植物材料进行清水催芽处理，选取催出的新芽进行外植体消毒利于后期消毒，特别是一些常规不易消毒的植物可以用此方法二、外植体消毒处理前期处理完成后我们就要对植物材料进行消毒处理，消毒处理的目的就是为了去除植物体表和体内的菌类物质，使其得到我们需要的无菌材料。二、常见消毒剂浓度、消毒时间及灭菌效果药物种类浓度/(%)灭菌时间/min效果酒精70-750.1-2（+）好升汞（氯化汞）0.1-0.22-25（+++）最好漂白粉饱和上清液5-30（++）很好次氯酸钠25-30（++）很好二、常见消毒剂浓度、消毒时间及灭菌效果药物种类浓度/(%)灭菌时间/min效果酒精70-750.1-2（+）好升汞（氯化汞）0.1-0.2-25（+++）最好漂白粉饱和上清液5-30（++）很好次氯酸钠25-30（++）很好不同的消毒剂有各自的优缺点，如升汞消毒效果较好，可是对人体有毒，操作需要小心，而且在植物体内不易清除；次氯酸钠、漂白粉等毒性低且易清除，只是消毒效果相对较差。二、常见消毒剂浓度、消毒时间及灭菌效果药物种类浓度/(%)灭菌时间/min效果酒精70-750.1-2（+）好升汞（氯化汞）0.1-0.23-25（+++）最好漂白粉饱和上清液5-30（++）很好次氯酸钠25-30（++）很好有些植物材料我们会同时选取两种或两种以上的消毒剂配合使用对植物进行消毒处理三、蝴蝶兰外植体消毒1、蝴蝶兰花梗的前期处理Ⅰ蘸有75%酒精的脱脂棉从基部往顶端擦拭1、蝴蝶兰花梗的前期处理Ⅱ要求：刀片锋利，快、准切段芽上1.5-1.8CM,芽下1.8-2.2CM1、蝴蝶兰花梗的前期处理Ⅲ将花梗切分为4种不同的级别，方便消毒2、蝴蝶兰花梗的消毒处理Ⅰ75%酒精消毒30秒2、蝴蝶兰花梗的消毒处理Ⅱ无菌水冲洗2次2、蝴蝶兰花梗的消毒处理Ⅲ0.1%升汞消毒8-25分钟不同级别花梗对应消毒时间花梗级别消毒时间（分钟）顶芽8嫩芽12-15中芽15-18老芽18-252、蝴蝶兰花梗的消毒处理Ⅳ无菌水冲洗3次3、蝴蝶兰花梗消毒后处理切段（芽上0.5-0.7CM,芽下1-1.2CM）4、无菌接种5、写好标签并放育苗室培养5、写好标签并放育苗室培养标签书写需要注明品种代码、接种日期和操作员代码三个信息5、写好标签

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