微生物生长量的测定（微生物学与操作技术）

微生物量的测定方法微生物学及操作技术

微生物生长量测定义1

方法一

测定生长量2

方法二

计繁殖数3目录页CONTENTSPAGE1微生物生长量测定评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响；评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果；客观地反映微生物生长的规律；过渡页TRANSITIONPAGE单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的变化2测定生长量法

测体积法

直接法测定生长量

称干重法

比浊法

间接法测定生长量过渡页TRANSITIONPAGE生理指标法一、测生长量直接测生长量的方法1、直接法粗放型，在刻度离心管中测沉降量。测体积法测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法称干重法在精确型，离心法和过滤法获得菌体细胞，微生物的干重一般为其湿重的10％～20％。一、测生长量

直接测生长量方法1、直接法测体积法刻度离心管中离心，测定沉淀多少来确定微生物的生长情况。测干重法将细胞培养液离心或过滤后，洗涤除去培养基成分后转移到适当的容器，置100~105℃干燥箱烘干或低温低压干燥（60~80℃）至恒重后，称重。一、测生长量

间接测定生长量方法2、间接测定法比浊法用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行测定，一般选用450～650nm波段。

生理指标法一种特定的微生物，每一个细胞中的ATP浓度几乎是一个常数，所以测定这种微生物的ATP含量，即可知其细胞数。3计繁殖数法计繁殖数直接法计繁殖数间接法过渡页TRANSITIONPAGE一、计繁殖数直接法计繁殖数法其中最重要的是计数板计数法。：

指采用计数板（细菌计数板或血球计数板），在光学显微镜下直接观察微生物细胞并进行计数的方法。（计算一定容积里样品中微生物的数量）计数板直接计数方法1.计数板直接计数法2.染色后活菌计数法3.

比例计数法4.过滤计数法一、计繁殖数直接法计繁殖数法1.计数板直接计数方法——采用血球计数板测定细胞个数一、计繁殖数直接法计繁殖数法缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察。1.计数板直接计数方法——计算细胞个数一、计繁殖数直接法计繁殖数法

采用特定的染色技术进行活菌染色，然后用光学显微镜计数的方法。可分别对活菌和死菌进行计数。例：美蓝→酵母→

活细胞→无色死细胞→蓝色2.染色后活菌计数法1.计数板直接计数法2.染色后活菌计数法3.

比例计数法4.过滤计数法染色后活菌计数法二、计繁殖数间接法真核微生物的细胞构造是一种活菌计数法，这是一种依据活菌在液体培养基中会使其变混或在固体培养基上（内）形成菌落的原理而设计。最常用的是菌落计数法（colony-countingmethods）。二、计繁殖数间接法计繁殖数法可用浇注平板（pourplate）或涂布平板（spreadplate）等方法进行。此法适用于各种好氧菌或厌氧菌。采用培养平板计数法要求操作熟练、准确，否则难以得到正确的结果。1.平板菌落计数法1.2.膜过滤培养菌落计

数法平板菌落计数法二、计繁殖数间接法计繁殖数法样品充分混匀；每支移液管及涂布棒只能接触一个稀释度的菌液；同一稀释度三个以上重复,取平均值；每个平板上的菌落数目合适，便于准确计数；二、计繁殖数间接法计繁殖数法1.平板菌落计数法一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用菌落形成单位（colonyformingunits，CFU）来表示，而不是直接表示为细胞数。二、计繁殖数间接法计繁殖数法2.膜过滤培养菌落计数法