动物胚胎移植-牛的非手术法胚胎移植（动物繁殖技术）

牛的非手术法胚胎移植供体牛的选择

供体牛：供体牛应选择健康的良种母牛，具有较高的育种价值、良好的生产性能、稳定的遗传性、旺盛的繁殖机能，而且超排效果较好，年龄选择最好在14月龄至10岁之间。受体牛的选择

受体牛：受体牛可选用非良种个体，要求体型较大、膘情中等，具有正常的发情周期，繁殖性能良好，无繁殖机能和传染疾病。供体牛的同步发情同步发情方法：缩短黄体期的前列腺法（PG法）、延长黄体期的孕酮法。供体牛的超数排卵牛有FSH+PG法和CIDA+FSH+PG法两种；发情后8－13天开始；常用的激素为FSH；注射方法一般是连续4d递减注射,每天2次,间隔12小时（半衰期短）；发情后8－12小时配种，间隔12小时再配种一次。供体牛的超数排卵（图片来源于网络）

配种操作的要求：选择系谱清晰，具有优良性状的种公牛，配种时对母牛外阴部清洗消毒，保持输精枪无菌，选择合适的输精枪和输精部位，输精次数不少于2次。

确定发情时12h后进行第一次人工输精，间隔12h进行第二次人工输精，每次输精的有效精子不少于3×107。供体牛的配种胚胎收集（1）动物准备：

牛的胚胎非手术回收前，需对动物禁食24小时以上，以减轻腹压和瘤胃的压力对非手术回收操作的影响。在冲胚前使其镇静，作尾椎硬膜外局部麻醉，以松弛子宫颈环肌。对外阴进行清洗、消毒，并吸除子宫颈粘液。

胚胎收集

（2）操作步骤：

1.插入子宫角胚胎回收管：术者通过直肠把握，将带有钢芯的子宫角胚胎回收管经过母牛阴道和子宫颈送入一侧子宫角大弯处。再将钢芯稍微向后抽出，再将胚胎回收管送到子宫角大弯前至小弯基部。

胚胎收集2.利用气囊固定子宫角胚胎回收管：利用注射器通过胚胎回收管后端的送气管向回收管前端的气囊慢慢送入空气，一般青年牛充气8～10毫升，经产牛12～15毫升，充气结束后，封闭送气管，抽出钢芯。

胚胎收集

3.子宫角胚胎冲洗：将胚胎回收管的冲胚液通过进液管缓慢向子宫内灌注，再回收冲胚液，反复冲洗，每次冲胚液注入量为30～50毫升，单侧子宫角冲胚液总量为300～500毫升。两侧冲完，向子宫内注入抗菌药物。

子宫角回收的液体较多，可以通过专用胚胎漏斗除去多余的冲卵液，在实体显微镜下进行检卵；

胚胎的质量评定：主要采用形态学方法，优质胚胎才能用于进行胚胎冷冻或移植。胚胎检查胚胎检查不同发育阶段的牛正常胚胎（图片来源于网络）胚胎检查（图片来源于网络）牛异常胚胎1.卵圆形透明带2.卵裂球脱离3.卵裂球不规则4.破碎桑葚胚5.卵裂球分散6.不规则细胞团7.空泡化8.透明带破裂

（1）移植前受体牛的准备：对受体牛禁食12～24小时，减轻腹压和瘤胃的压力对胚胎非手术移植操作的影响。选择黄体发育良好的受体牛进行保定，用2%普鲁卡因2～3毫升作第二尾椎硬膜外腔麻醉；除去直肠内宿粪，清洗和消毒外阴部。胚胎移植胚胎移植

（2）胚胎及移植器械准备：移植前，先将胚胎装入胚胎细管内，防止胚胎丢失。将含胚胎的细管装入胚胎移植枪塑料硬外套，并将胚胎细管送至塑料外套的前端与金属头相贴，金属内芯轻缓插入细管的棉栓端内，最后在移植枪尖涂上消毒润滑剂。非手术胚胎移植装置1、1ml注射器

；2、装管接头；

3、细管A.、棉塞；

B、气泡Ⅰ、Ⅲ、保护液；Ⅱ、含胚段胚胎移植（图片来源于网络）胚胎移植

（3）胚胎非手术法移植：术者将胚胎移植装置装入专用塑料保护膜内，准备移植。用手扒开外阴，持移植枪插入阴道，移植枪到达子宫颈口时将移植枪塑料软保护膜捅破，插入子宫颈口，